作者：孟毅 罗晓阳 曹治 王育敏 王嘉军
【关键词】 内皮素
关键词: 内皮素;脑创伤;急性肺损伤;纳络酮
摘 要:目的 研究纳络酮治疗脑创伤致急性肺损伤大鼠中对内皮素的影响. 方法 成年Wistar大鼠随机分为对照组（n=10）、脑创伤组（n=40）和纳络酮治疗组（n=10）.采用Feeney脑创伤模型，观察脑创伤后大鼠不同时间点肺组织的病理改变，放免法测定血浆和肺组织ET-1含量变化及应用纳络酮对其的影响. 结果 脑创伤大鼠出现程度不同的急性肺损伤的病理改变，尤以伤后6h为重.血浆和肺组织ET-1含量明显增高（201.7±63.7vs21.8±1.9，P&<0.01;190.2±65.6vs17.5±0.8，P&<0.01），伤后6h达峰值，72h仍持续性升高.治疗组肺组织病理改变明显减轻，血浆和肺组织ET-1尽管于伤后72h仍高于对照组（30.4±3.1vs21.8±1.9，P&<0.01;25.6±1.8vs17.5±0.8，P&<0.01），但明显低于创伤组（30.4±3.1vs96.4±18.8，P&<0.01;25.6±1.8vs60.4±19.0，P&<0.01）. 结论 脑创伤可致程度不同的急性肺损伤，ET-1可能在其发病过程中起重要作用，纳络酮对急性肺损伤有一定的治疗作用.
Keywords:endothelin-1;brain trauma;acute lung injury;naloxone
Abstact:AIM Effect of naloxone on content of endothelin-1（ET-1）in the plasma and lung tissue of rat with acute lung injury caused by brain trauma and pathological changes were observed.METHODS Wistar rats were randomly pided into control（Ctr n=10），brain trauma（BT n=40）and naloxone groups（Nal n=10）.Pathologic changes of lung in model of brain trauma of rats were observed.The levels of ET-1in the plasma and lung tissue were determined by ra┐dioimmunassay.RESULTS Brain trauma can cause some degrees acute lung injury in special at6h after injury.The levels of ET-1in the plasma and lung tissues increased signif-icantly after brain trauma（201.7±63.7vs21.8±1.9，P&<0.01;190.2±65.6vs17.5±0.8，P&<0.01），arriving the highest level at6h，but still higher at72h.Pathologic changes of rat with naloxone treating were abated markedly.The levels of ET-1in the plasma and lung tissue of rat with naloxone treating were higher than control group（30.4±3.1vs21.8±1.9，P&<0.01;25.6±1.8vs17.5±0.8，P&<0.01），but significantly lower than trauma groups（30.4±3.1vs96.4±18.8，P&<0.01;25.6±1.8vs60.4±19.0，P&<0.01）.CONCLUSION Brain trauma can caused some de-grees acute lung injury;ET-1may play an important role in pathophsiology of acute lung injury caused by brain trauma;naloxone can abate its injury effects.
0 引言
急性肺损伤（acute lung injury，ALI）为急性呼吸窘迫综合症（acute respiratory distress syndrome，ARDS）的早期阶段，创伤、感染、休克和缺氧等因素可诱发加重，进一步发展为ARDS.严重颅脑损伤是ALI发病的最重要的诱发因素之一［1］ ，内皮素（en-dothlin，ET）参与ALI的发生过程［1，2］ ，降低血浆内皮素水平可明显减轻ALI［2-4］ .我们通过脑创伤大鼠模型观察脑创伤后肺组织的病理改变、血浆和肺组织ET-1的含量变化及应用纳络酮治疗对其的影响作用，探讨纳络酮的治疗作用.
1 材料和方法
1.1 材料 成年Wistar大鼠60只，雌雄不拘，由兰州医学院动物中心提供，体质量190～230g，分为脑创伤组（BT）、纳络酮治疗组（Nal）和对照组（Ctr）.创伤组40只，分为伤后0.5，6，24和72h组，每组各10只.治疗组、对照组各10只.
1.2 方法 大鼠以20g L-1 戊巴比妥钠50mg kg-1 ip，麻醉后俯卧位固定，采用落体撞击法建立右顶叶局限性脑挫裂伤模型（打击力1500g cm2 ，肉眼见局限性脑挫裂伤范围占右侧大脑半球1/2）.治疗组于伤后立即给予腹腔注射纳络酮（北京四环制药厂生产）1mg kg-1 ，并分别于伤后24，48，70h各追加注射1次，剂量相同，于72h处死.对照组不做任何处理.断头处死大鼠采血4mL，加入抑肽酶，离心后取血浆;取左肺下叶组织500mg制成组织匀浆，采用放免法测定血浆和肺组织匀浆中ET-1的含量（药盒由解放军总院东亚免疫技术研究所提供ng L-1 ）.取每组大鼠右肺，经40g L-1 甲醛固定，常规脱水、包埋、切片和HE染色，置光镜下检查.
统计学处理:采用随机资料方差分析，并行相关分析.
2 结果
2.1 病理形态改变 大体见脑创伤大鼠两肺叶表面散在暗红色出血实变区，随病程发展出血区增多.光镜下伤后0.5h即可见到肺毛细血管扩张、充血、间质水肿，局灶性肺泡内出血，肺不张和肺气肿.伤后6h上述损伤改变明显加重，肺间质可见中性粒细胞及淋巴细胞浸润，微血管内血栓形成偶见Fig1.此种病理变化持续到伤后72h.治疗组仅见小灶性轻度淤血及出血，肺泡上皮水肿明显减轻Fig2.对照组无明显病理异常改变.
3 讨论
脑创伤后大鼠肺泡上皮、毛细血管内皮细胞水肿，胞质内镧颗粒聚集，且细胞核、线粒体内及表面均可见到镧颗粒，尤以伤后6h为重，且持续到伤后72h［1］ .我们观察到脑创伤可引起程度不同ALI，光镜下伤后0.5h即可见到肺毛细血管扩张、充血、间质水肿，局灶性肺泡内出血和肺不张.伤后6h上述损伤明显加重，肺间质可见中性粒细胞及淋巴细胞浸润，微血管内血栓形成偶见，此种病理变化持续到伤后72h.
表1 血浆及肺组织匀浆ET-1含量变化 略
图1 － 图2 略
ARDS患者血浆和肺泡灌洗液ET-1含量持续增高［2］ ，ALI时肺小血管内皮细胞和平滑肌，以及支气管粘膜上皮和平滑肌的ET-1阳性表达增强;ALI动物吸入ET受体拮抗剂可明显改善肺脏的气体交换氧合，稳定肺动脉压而不引起外周血管扩张［3］ ，应用山莨菪碱、心纳素等治疗，降低血浆和肺泡灌洗液ET-1水平，可明显减轻肺损伤［4，5］ ，因此，目前多认为ET-1参与ALI的病理生理过程.临床研究证实急性颅脑损伤患者早期血浆ET-1含量显著增加，且与颅脑损伤的严重程度有关.因此，ET-1可能在脑创伤所致ALI中起重要作用.纳络酮不仅通过直接清除氧自由基而减轻ET的毒性作用，还可通过提高血浆CGRP水平发挥其对ET的生物拮抗作用，减轻脑损伤.我们应用纳络酮治疗脑创伤大鼠，伤后72h血浆和肺组织ET-1水平尽管仍高于对照组，但明显低于脑创伤组，且ALI的病理改变明显减轻.表明纳络酮不仅可降低脑创伤大鼠血浆ET-1水平，而且可减少肺组织ET-1的释放，减轻ALI的病理改变.
参考文献:
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