作者：李晓斌 夏天 张仲海 王宗仁 王文 刘国诚 章必成 杨国愉
【关键词】 胃癌前病变
关键词: 消萎灵;慢性萎缩性胃炎;胃癌前病变;胃粘膜血流量;血浆胃动素
摘 要:目的 观察中药复方消萎灵对大鼠慢性萎缩性胃炎（CAG）及胃癌前病变（PLGC）动物模型胃粘膜血流量（GMBF）和血浆胃动素（MTL）的影响及其病理逆转治疗作用. 方法 在成功制作大鼠CAG及PLGC动物模型后，用激光多普勒血流计测定大鼠CAG及PLGC的GMBF，用放射免疫法测定血浆MTL含量，并在不同组间进行比较，同时对各组CAG及PLGC的病理镜检结果进行比较. 结果 模型组较正常组胃粘膜血流量明显降低（6.91±0.72→4.46±0.71，P&<0.05），消萎灵高、低剂量组和维酶素组可明显提高GMBF（0.34±0.31，6.55±0.89，5.58±0.68，P&<0.05），消萎灵高、低剂量组均优于维酶素组（P&<0.05），消萎灵高剂量组接近正常组水平（P&>0.05）;模型组MTL较正常组显著减少（84.3±4.2，86.9±4.3，94.7±7.1，P&<0.05），消萎灵高、低剂量之间无显著差异，而且均优于维酶素组（P&<0.05），消萎灵高剂量组、低剂量组病理镜检结果明显优于维酶素组（P&<0.05）. 结论 中药消萎灵可提高CAG及PLGC大鼠GMBF和降低其异常增高的血浆MTL水平，改善组织病理，为消萎灵治疗CAG及PLGC提供了实验依据.
Keywords:Xiaowelin;chronic atrophic gastritis;precancer-ous lesions of gastric cancer;gastric mucosia blood flows;plasma motilin
Abstract:AIM To explore the effects of Xiaoweilin on GMBF and MTL in rats with atrophic gastritis and precan-cerous lesions of gastric cancer and to study its therapeutic ef┐fects.METHODS A complex method was used to establish the model that was stimulating the various factors to cause the PLGC.GMBF were measured directly by laser doppler flow meter.The data of different groups were analyzed and compared with each other;their histopathologic changes were also compared.RESULTS In the model group，the GMBF decreased（6.91±0.72→4.46±0.71，P&<0.05）while the MTL increased（8.16±9.2→10.17±6.3，P&<0.05）.Xi-aoweilin high，low dose therapy group and Weimeisu therapy group increased the GMBF（0.34±0.31，6.55±0.89，5.58±0.68，P&<0.05）but decreased the MTL（84.3±4.2，86.9±4.3，94.7±7.1，P&<0.05），and the Xiaoweilin high dose therapy group and Xiaoweilin low dose therapy group were both better than the Weimeisu therapy group（P&<0.05）.The GMBF of Xiaoweilin high dose therapy group were no more than the control group（P&>0.05），and the histopathologic changes of the Xiaoweilin high，low dose therapy groups were both better than those of the Weimeisu therapy group（P&<0.05）.CONCLUSION The experimen-tal PLGC have lower GMBF and higher MTL.Xiaoweilin can modulate this state and improve the various pathological man-ifestations of CAG and PLGC.
0 引言
应用中医药防治慢性萎缩性胃炎（chronic at-rophic gastritis，CAG）是我国医药的优势所在［1］ .消萎灵具有活血化瘀，软坚散结的功效，治疗CAG疗效良好.我们观察了消萎灵对大鼠CAG及胃癌前病变（PLGC）的胃粘膜（GMBF）和血浆胃动素（MTL）的影响.
1 材料和方法
1.1 材料 Wistar大鼠，全部雄性，体质量（180±20）g，由第四军医大学实验动物中心提供，均先在我科实验室作3d适应性饲养后进入本研究;药品消萎灵（当归、三棱、赤芍、莪术、黄药子、党参）水煎浓缩液，含生药量3kg・L-1 ，由本实验制备;维酶素由河南省医药工业公司新星制药厂生产，0.2g/片，研碎后用清水配成混悬液;完全Freund佐剂由华美生物技术公司提供;去氧胆酸钠由SERVA进口分装;MTL试剂盒由天津千叶生物技术公司提供;激光多普勒血流计由南开大学电子仪器厂生产，多普勒血流计频移范围为5～7kHz，时间常数选1s，量程选X1，用特制外径2.8mm，长2m的光纤探头，输出功率≥1mW，测定范围为半径1.5mm半球形体微区;血流量单位用多普勒信号的电压值“u”表示.实验前开机预热30min，并调零.
1.2 方法 动物模型的复制参照赵敏等［1］ 的方法.每只大鼠足底注射佐剂抗原（同种大鼠胃粘膜匀浆与Freund佐剂以1∶1配成乳剂）0.3mL/次，1次/4wk，共2次.去氧胆酸钠自由饮用，浓度为20mmol・L-1 .将猪胆汁离心后置-20℃冰箱备用，ig前溶解至冰水混合物，抽取液体部分，按12.5mL・kg-1 给大鼠ig，1次・d-1 ，共90d.饥饱失常法:2d喂食，1d停食，保证足量，自由饮水.其中正常组于62d死亡1只，选模组于113d死亡1只，杀检，取其血清液氮中冷藏并统一测定MTL.50只大鼠随机分为5组，每组10只，正常组每日每只大鼠灌服生理盐水2mL，连续140d;模型组造模90d后杀检:以下3组在造模90d均连续用消萎灵水煎液ig50d，其剂量分别为:①消萎灵低剂量组:每只大鼠灌服10g・kg-1 ・d-1 ;②消萎灵高剂量组每只大鼠灌服消萎灵水煎液20g・kg-1 ・d
-1 ;③维酶素治疗组每只大鼠灌服维酶素水溶液1g・kg-1 ・d-1 .以上5组在给药期间，观察并记录一般情况和质量变化.给药结束后，各组大鼠禁食24h，自由饮水.用10g・L-1 戊巴比妥纳（40mg・kg-1 ）ip麻醉后在尾静脉取血2mL，并按MTL放免试剂盒说明进行预处理.打开腹腔，沿胃大弯侧作一0.8～15.0cm切口，将胃内容物冲洗干净，将多普勒血流计光纤探头轻放于胃小弯粘膜上，保持中等压力而没有距离，即时测定有GMBF.将摘除的大鼠胃沿胃大弯剪开，生理盐水中洗净胃粘膜，肉眼观察胃粘膜大体情况后，固定于40g・L-1 甲醛液中，供病理组织镜检.将预处理的血样品按RIA试剂盒说明书中的程序测定血浆MTL含量.
2 结果
2.1 大鼠体质量的变化 正常组在整个实验过程中，未出现便溏.模型组均有便溏，各治疗组便溏有不同程度好转.其中消萎灵治疗组大鼠的便溏消失.维酶素组大鼠的便溏也有一定的改善.模型组质量增长逐渐减慢，在给药后25d及给药后50d明显低于正常组及各治疗组（P&<0.05），给药50d后消萎灵治疗组体质量较维酶素治疗组明显为重（P&<0.05，Tab1）.
表1 各组大鼠体质量变化 略
2.2 胃粘膜组织病理学观察 正常组:上皮细胞及腺体排列整齐，大小形状一致，细胞呈单层柱状，胞质透明或呈空泡状，腺上皮与腺管分界清楚，固有腺及粘膜无扩张瘀血，粘膜肌层无增生.PAS（+），AB（-）.模型组:粘膜萎缩变薄，腺体数量减少，间质内有淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞浸润，上皮变性、坏死、脱落，粘膜肌增生增厚，向粘膜固有层伸展，呈分枝状插入腺体间，可见肠上皮化生（40%）及不同程度的不典型增生（20%），表现为细胞大小、形状不一，核浆比例增大，极向紊乱，核分裂明显，个别腺体呈共壁现象或囊性扩张.治疗组:消萎灵高、低剂量组胃腺排列较紧密规则，粘膜层有少量淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞浸润，无明显变性坏死、表现为轻度浅表性胃炎或接近正常组织.维酶素组:粘膜色泽发暗而较薄，光镜下可见CAG及浅表性胃炎等病理改变（Tab2，Fig1～5）.
图1 －图5 略
2.3 胃粘膜血流量和血浆胃动素 模型组GMBF较正常组明显减少，各治疗组均可提高降低的GMBF，消萎灵高、低剂量组优于维酶素组.模型组MTL较正常明显增高，各治疗组可降低异常增高MTL水平，中药组显著优于维酶素组（Tab3）.
表3 大鼠胃粘膜流量及血浆胃动素水平比较 略
3 讨论
研究表明GMBF减低的程度依次为胃癌&>胃癌前病变&>慢性浅表性胃炎，局部供血减少，使细胞长期处于缺氧状态下生存，这种环境更适合肿瘤的发生发展，因而引起细胞突变［2］ .增加GMBF可保证胃粘膜细胞正常的需氧和物质能量代谢，因而可以迅速清除和缓冲对胃粘膜具有损伤作用的代谢产物，达到促进萎缩腺体再生修复的作用.本结果大鼠CAG及胃癌前病变动物模型GMBF较正常组明显减少（P&<0.05），应用消萎灵治疗后，在组织病理改善的同时，胃粘膜血流量增加，说明增加胃粘膜血流量是消萎灵可能的有效作用环节之一.室内温度、胃粘膜暴露的时间、取样的胃粘膜部位、多谱勒血流计探头的压力等因素对GMBF的测定结果均有影响，本研究统一规定室内温度为25℃，胃粘膜暴露的时间≤3min，取样的胃粘膜部位为胃小弯中部，使结果较为可靠，对多谱勒血流计探头的压力未严格控制是本测定方法的不足.
MTL是22个氨基酸残基组成的多肽［3］ ，MTL在体内分布十分广泛［4］ ，主要分布于十二指肠，空肠上端，由MO细胞分泌，MTL具有强烈的刺激消化道机械运动和电活动的作用，可诱发胃强烈收缩和小肠明显的分节运动，加强回肠和结肠的运动，也可使胃内压力及幽门压力增高，对胃肠腔内容物起清扫作用［5，6］ ，新近研究结果表明，胃肠道疾病的发生发展与胃肠激素的调节失常密切相关［7］ .有报道CAG及胃癌前病变患者血浆MTL水平高于正常对照组［8］ ，我们的研究表明模型组大鼠血浆MTL较正常组显著升高（P&<0.05），同以上研究结果相一致.应用中药消萎灵治疗后在组织病理学改善的同时血浆MTL水平有明显降低（P&<0.05）.
参考文献
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