作者：张建国 王惠民 李开龙 阎振成 徐有奇
【关键词】 增生性肾小球肾炎，
关键词: 表皮生长因子;增生性肾小球肾炎
摘 要:目的 探讨表皮生长因子（hEGF）在增生性肾小球肾炎（PGN）发病中的作用. 方法 采用放射免疫分析法检测24例PGN、12例非PGN患者及13例正常人血清、尿液和肾活检组织hEGF含量. 结果 PGN组肾组织、尿hEGF含量显著高于非PGN组（0.63±0.18vs0.59±0.15，275±51vs64±19，P&<0.01）和正常对照组（0.63±0.18vs0.54±0.14，275±51vs54±18，P&<0.01），PGN组血清hEGF较非PGN和正常对照组均无显著差异:肾组织hEGF含量愈高，肾小球病理改变程度愈重（r=0.651，P&<0.01）;尿hEGF含量与肾组织hEGF含量正相关（r=0.806，P&<0.001）. 结论 hEGF可能与PGN发病机制有关，尿hEGF含量测定可反映肾组织局部hEGF含量变化.
Keywords:epidermal growth factor;proliferative glomem-lonephritis
Abstract:AIM To investigate the effect of human epidermal growth factor（hEGF）in the pathogenesis of proliferative glomemlonephritis（PGN）.METHODS Twenty-four pa-tients with PGN and twelve non-PGN were included in this study.Thirteen healthy person were included as normal con-trol.The concentrations of hEGF in serum.urine and renal biopsy tissues was detected by using immunofluorescence as┐say.RESULTS The hEGF concentrations of renal tissues and urine in patients with PGN is much higher than that in patients with non-PGN（0.63±0.18vs0.59±0.15，275±51vs64±19，P&<0.01）and in normal control（0.63±0.18vs0.54±0.14，275±51vs54±18，P&<0.01），and the concen-trations correlated with the extent of glomerular histological changes（r=0.651，P&<0.01）.There was correlationship be-tween urinary and renal hEGF level（r=0.806，P&<0.001）.CONCLUSION hEGF may play a role in the pathogenesis of PGN，urinary hEGF concentrations in patients with PGN might be a reflection of the renal hEGF level.
0 引言
肾小球内系膜细胞（MC）增殖和细胞外基质（ECM）增加是增殖性肾炎（PGN）最常见、最重要的病理特征.人表皮生长因子（hEGF）是众多细胞因子网络中的重要因子之一，其在PGN患者肾局部是否异常升高及其在肾小球免疫损伤中的作用罕有明确报道［1］ .我们观察了肾组织hEGF含量改变与PGN患者病理改变关系，并评价检测尿hEGF的临床意义.
1 材料和方法
1.1 材料 原发性慢性肾小球肾炎患者36（男16，女20）例，平均年龄（29.4±1.2）岁，平均病程（4.6±0.3）a.肾穿活检标本均进行光镜和免疫荧光检查，并按WHO1982年制订的肾小球疾病分类标准进行病理诊断.其中PGN24例（系膜增生性肾炎17例，系膜毛细血管性肾小球肾炎7例），非PGN12例（膜性肾小球肾炎11例，局灶节段性肾小球病变1例）.所有病例均排除了继发性肾脏病.另设13例健康成人血、尿及移植供肾组织作对照.
1.2 方法 取晨空腹不抗凝静脉血及一次性随意尿各3mL，于4℃下1000r min-1 离心10min，分离上清液备检.每例肾活检标本均取10mg肾组织置于冷试管中，均存在于-20℃以下冰箱中.测定时于肾组织管中加入生理盐水2mL，内切式匀浆机匀浆5min后，离心方法同上，取上清液备检.采用放免法测定各样本中hEGF含量，按说明书操作.所有肾活检标本肾小球至少10个.在光镜下，将肾小球病理改变依据病变程度分为轻、中、重度［2］ .计数3个以上正切肾小球细胞数，取其均值作为单个肾小球细胞数，反映MC的增生程度.同时观察系膜区有无免疫球蛋白沉积.另以常规方法对肾病理切片进行PASM染色，参照姜傥等［3］ 的方法测定肾间质容量以定量反映ECM病变程度.间质面积（I）=总皮质面积（C）-（小球总面积+血管总面积+小管总面积）;间质容量（Vi）=I/C×l00%.用四层PAP法分别检测肾间质CD4+ 和CD8+ 淋巴细胞，用测微器计数每mm2 肾皮质、髓质区的CD4+ 和CD8+ 细胞数，以两部位CD4+ ，CD8+ 细胞数之和的均值表示间质淋巴细胞数［4］ .
统计学处理:数据用x ±s表示，采用t检验、相关分析及Sperman等级相关分析.
2 结果
PGN组尿和肾组织hEGF含量均显著高于非PGN和正常对照组（P&<0.01），血清hEGF较非PGN和正常对照组无显著差异（P&>0.05）;PGN组肾小球细胞数、Vi，CD4+ 及CD8+ 亦显著高于非PGN和正常对照组（P&<0.01）;肾小球细胞数、Ⅳ及尿hEGF与肾组织hEGF正相关（r=0.738，P&<0.001;r=0.689，P&<0.01;r=0.806，P&<0.001），肾组织hEGF分别与CD4+ 及CD8+ 呈正相关（r=0.551，P&<0.01;r=0.472，P&<0.05，Tab1）.
PGN患者不同程度肾小球病变hEGF含量比较:PGN伴中度肾小球病变患者肾组织及尿hEGF含量均显著高于PGN伴轻度肾小球病变组［肾组织:（33285±71）μg L-1 vs（24769±50）μg L-1 ，P&<0.01;尿:（296±55）μg L-1 vs（211±48）μg L-1 ］;PGN肾小球病变程度分别与肾组织、尿hEGF含量正相关（r=0.651，P&<0.01;r=0.551，P&<0.05）.PGN患者肾小球系膜免疫球蛋白沉积组与无沉积组肾组织hEGF含量比较，PGN肾小球系膜免疫球蛋白沉积组肾组织hEGF含量显著高于无沉积组［（289±51）μg L-1 vs（251±48）μg L-1 ，P&<0.05］.
3 讨论
hEGF作为一种具有很强致细胞分裂活动的因子，可能控制肾小球MC的生长，并影响肾小球ECM的形成［5］ .近期研究发现，hEGF在肾小球肾炎发病中影响着肾小球的滤过率以及炎性细胞的浸润［6，7］ .我们通过对PGN患者肾组织hEGF含量的测定，提示hEGF可能在PGN发病中起一定作用.PGN患者肾局部存在hEGF含量的异常增加，其可能通过促进MC的增殖和ECM的增多与积聚参与了PGN的发病，并与肾小球病理改变程度密切相关.体外实验证实hEGF可由上皮细胞、内皮细胞、T淋巴细胞、MC和成纤维细胞等合成和分泌hEGF，而这些细胞正是肾脏固有细胞和PGN主要浸润细胞.PGN时由于各种致病因素和本研究所观测提示的免疫球蛋白沉积和淋巴细胞浸润等的作用，引起细胞因子网络失调，肾脏固有细胞和浸润细胞合成和分泌hEGF异常，并在肾局部形成高浓度hEGF，hEGF又促进MC增殖，二者互为因果，形成恶性循环.其结果可导致肾小球持续过度的免疫损伤，并促进MC不断增殖和ECM积聚，最终导致肾小球纤维化和硬化［8］ .因此深入探讨hEGF的致病作用机制和调整肾局部hEGF分泌异常状态，将有助于对PGN免疫发病机制的认识和寻找新的有效治疗方案.
我们还发现，PGN组尿hEGF含量亦显著高于非PGN和正常对照组，并与肾组织hEGF含量正相关;尿hEGF含量愈高，肾小球病理改变程度愈重.上述结果表明，检测尿hEGF含量可间接反映肾局部hEGF含量的变化，可作为判断肾脏病变轻重、疗效及预后一个重要指标.
参考文献
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