【关键词】 多色性染色
关键词: 半薄切片;多色性染色
0 引言
现有的半薄切片多用甲苯胺蓝［1］ 及碱性复红染色，但在观察时往往组织结构、细胞核及细胞质分辨不够清楚.此法是在半薄切片染色改良法［2］ 的基础上，经反复实验，进一步改进而成的.本法操作简单，染色效果良好而且着色均匀，组织结构清晰，适用于电子显微镜超薄切片的准确定位.
1 材料和方法
1.1 材料 ①0.2mol・L-1 磷酸二氢钠缓冲液100mL，用0.1mol・L-1 NaOH调pH=7.2.②10g・L-1 次甲基蓝溶液:次甲基蓝1g，加蒸馏水至100mL.③0.5g・L-1 碱性复红溶液:碱性复红0.05g，硼砂0.25g，加蒸馏水至100mL.3种试剂分别装入125mL滴瓶，使用前将上述3种试剂依次按10∶2∶8比例混合后搅拌均匀，即可进行染色.
1.2 方法 用超薄切片机切取1～2μm厚的半薄切片，用白金丝圈捞在载玻片上，置于加热板，在40℃～60℃下烘干.用吸管吸染色液数滴于切片上，40℃～60℃染色1～2min.用蒸馏水彻底洗除切片上的多余染液（也可用自来水冲洗）.为防止掉片，洗片时不要直接冲洗切片，可采取冲洗载玻片反面的方法将染液慢慢洗净.自然晾干或加热烘干后即可于镜下观察.
2 结果
细胞核呈蓝色，细胞质、间质呈玫瑰红色.组织结构清晰，反差良好，胞核、核膜及染色质清晰可辨.
3 讨论
这种改良的染色法操作简单省时，一次即可完成染色.染色鲜艳，效果良好，并可保持较长的时间不褪色，适合于电镜研究的精确定位.如经氢氧化钾乙醇溶液脱去环氧树脂后再染色，则切片将更清晰，分辨力更高，还可用于光镜的常规显微照相.
参考文献
［1］郭淑华，李海伦.塑料切片与电镜半薄切片多色性染色方法［J］.电子显微学报，1996;15（5）:425.
［2］钟 瑛.改良半薄切片多色性染色方法［J］.临床与实验病理学杂志，1992;8（3）:228.转贴于