LDL┐C自动浅析测定法与间接计算结果的比较

代写论文网： 　　　　　　 作者：周铁成　于文彬　程晓东　秦庆　肖鹏涛

【关键词】 低密度脂蛋白胆固醇
　　关键词: 低密度脂蛋白胆固醇;冠心病;Friedewald公式 中图号:R446.112 文献标识码:B
　　
　　0 引言
　　流行病学研究已确定了与冠心病（CHD）有关的几个脂蛋白危险因素，血清总胆固醇（TC）升高伴随有低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）升高，显著增加CHD的危险性.LDL-C浓度降低，CHD症状改善，能引起损伤的好转［1］ .目前临床上LDL-C测定多采用聚乙烯硫酸沉淀法［2］ ，Friedewald公式间接计算法［3］ .前者麻烦，费时，后者受许多因素的影响.我们采用均相分析的LDL-C试剂盒，无需沉淀分离，自动分析测定LDL-C，方法先进、简便、快速、准确、适宜自动化分析.
　　
　　1 反应原理
　　试剂1中的活性剂1能特异性水解高密度脂蛋白（HDL），极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微（CM），被包裹在上述脂质中的胆固醇即被释放并立即与酶试剂反应转变成一种无色产物.此时加入试剂2，低密度脂蛋白（LDL）即被活性剂2水解，并在偶联剂作用下产生一种有色化合物.该化合物在546/660波长下有特异性吸光系数.
　　
　　2 材料和方法
　　
　　2.1 仪器 日立7170型自动生化分析仪.
　　
　　2.2 LDL-C测定试剂盒 日本第一化学药品株式会社生产.标准品:LDL-C校正物，含胆固醇3.7mmol・L-1 ，冻干品加1mL蒸馏水溶解后即可使用.甘油三酯（TG）和总胆固醇测定，用上海长征公司生产的试剂盒.HDL-C用自动分析测定法，日本第一化学药品株式会社生产的试剂盒.

　　2.3 方法
　　
　　2.3.1 LDL-C自动分析测定法参数 两点终点法，温度37℃，主波长546nm，副波长660nm，样品用量2.4μL，R1 试剂240μL，反应5min，加R2 试剂80μL，反应5min，监测16～34点吸光度.
　　
　　2.3.2 对照法 用Friedewald公式LDL-C=TC-HDL-C-TG/2.2，间接计算LDL-C.其中TG和TC测定用酶法，LDL-C用自动分析测定法.
　　
　　3 结果
　　
　　3.1 精密度 批内CV:取低、中、高浓度LDL-C样品各一份，LDL-C浓度分别为1.45，2.86和3.94mmol・L-1 .用本法同时测定10次CV分别1.32%，0.72%和0.48%.批间CV:取低、中、高浓度LDL-C混合血清各一份，LDL-C浓度分别为1.41，2.98和3.89mmol・L-1 ，置4℃冰箱保存，每天测定一次，连续10d，批间CV分别3.61%，2.45%和3.41%.
　　3.2 回收率 取一LDL-C浓度为3.82mmol・L-1 的血清样本，加入校正物1.85mmol・L-1 ，作回收实验，共测3次，回收率在99.2%～103.2%之间.
　　
　　3.3 线性关系 用一混合血清溶解LDL-C校正物，经反复测定4次浓度为6.70mmol・L-1 .将此血清用生理盐水作梯度稀释，使含血清1/5，2/5，3/5，4/5及原血清，用自动分析法测定，结果显示在6.70mmol・L-1 范围内线性关系良好，回归方程（X为浓度，Y为吸光度）为Y=0.0013+0.0934X（r=0.9997，P&<0.01）.
　　
　　3.4 与Friedewald计算结果的偏离 随机取临床送检样本150份，用自动分析法测LDL-C（D），同时测定TG，TC和HDL-C，用F公式计算LDL-C（F），按TG高低分组进行统计分析（Tab1）. 　　表1 LDL-C自动分析法测定与间接计算的比较 （略）
　　
　　4 讨论
　　一般认为当TG&<4.52mmol・L-1 ，及排除高脂血症的条件，上述计算公式是可行的.我们的研究结果也表明当TG&<4.52mmol・L-1 时，LDL-C计算结果与自动分析测定结果相比无显著性差别，且高度相关（r&>0.95），计算偏差&<5%.但TG&>4.52mmol・L-1 时，LDL-C计算结果与自动分析测定结果相比有显著性差别（P&<0.05，r&<0.80），计算偏差&>15%.可见LDL-C自动分析测定法在高TG浓度条件下有一定的临床应用价值，与文献报道一致［4］ .但在Ⅲ型脂蛋白血症，乳糜微粒血清等条件下的应用价值有待进一步探讨.
　　 参考文献:
　　
　　［1］Rifai N，Warnick P.Mcnamara JR et al.Measurement of low-density-lipoprotein cholesterol in serum:A status report ［J］.Clin Chem，1992;38（2）:150-152.
　　［2］中华人民共和国卫生部医行政司编.全国临床检验操作规程［M］.第2版.南京:东南大学出版社，1997:281-282.
　　［3］Fridedewald WT，Levy RI，Fredrickson DS.Estimation of con-centration of low-density-lipoprotein cholesterol in plasma，without use of the precipitative ultracentrifuge ［J］.Clin Chem，1972;18（5）:499-501.
　　［4］Harris N，Neufeld EJ，Newburger JW et al.Analytical perfor-mance and clinical utility of a direct LDL-cholesterol assay in a hyperlipidemin pediatric population ［J］.Clin Chem，1996;42（10）:1182-1183.