甲状腺肿瘤患者血清中甲状腺球蛋白含量的检测

　　　　 作者：李琦， 宋朝君， 张 赟， 陈丽华， 王鑫 ， 徐竹蔚， 金伯泉

【关键词】 甲状腺球蛋白; 夹心ELISA; 检测

　　甲状腺是人体内重要的内分泌腺， 其分泌的主要成份为甲状腺球蛋白（thyroglobulin， TG）， TG在甲状腺激素的合成、 分泌和贮存过程中起着重要作用。我们在前期的研究中， 制备了抗TG的单克隆抗体(mAb)， 并应用免疫组织化学方法对文献标记码不同甲状腺肿瘤组织中TG分布进行了研究［1］。本实验利用本室建立的检测人TG夹心ELISA试剂盒， 对甲状腺肿瘤术前、 术后血清中TG水平进行检测， 为甲状腺癌患者术后疗效的判断提供帮助。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料 人甲状腺球蛋白（TG）由北京倍爱康生物技术有限公司提供; 正常人血清取自本校卫生处健康查体人员， 甲状腺肿瘤患者血清标本取自本校西京医院内分泌科及普通外科。

　　1.2 方法 将抗TG mAb （NO.6） 10 mg/L包被于ELISA板中， 4℃过夜后， 洗3次， 加入不同浓度的TG标准品及待检血清， 100 μL/孔， 37℃ 孵育1 h， 洗板3次后加入兔抗人TG多克隆抗体， 100 μL/孔， 37℃孵育1 h， 洗板3次， 再加入HRP标记的羊抗兔IgG二抗， 37℃孵育1 h后洗板5次， 加ABTS底物液显色， 测A410值， 绘制标准曲线， 并根据标准曲线计算标本中TG含量。

　　2 结果

　　2.1 敏感性 建立的mAb 与多克隆抗体夹心ELISA方法敏感度为30 μg/L， 正常体检人员100名血清中Ig含量均底于30 μg/L， 与文献报道正常人血清中TG含量为0～20 μg/L接近［2］。

　　2.2 初步应用 20例甲状腺癌患者手术前后血清中TG水平变化明显。另有甲状腺癌患者术后转移患者血清TG水平要明显高于正常人和术后患者（表1）表1 甲状腺肿瘤患者血清中TG含量测定

　　3 讨论

　　各种甲状腺疾病特别是甲状腺肿瘤， 血中TG浓度均有增高［2］。我们利用建立的检测人TG夹心ELISA方法， 对正常人及甲状腺肿瘤， 特别是甲状腺癌， 术前及术后血清中TG水平进行了检测。结果表明， 甲状腺癌患者术前与术后血清中TG水平表达差异明显， 此外又对14例甲状腺癌术后转移患者血清中TG水平检测， 结果表明TG水平明显高于正常人。上述结果提示， TG浓度在甲状腺肿瘤术前、 术后及复发中的变化可为甲状腺癌术后观察提供有意义的指标［3， 4］， 甲状腺癌手术后患者应定期复查血清中TG水平。

参考文献

［1］ 赵玉红， 李 琦， 宋朝君， 等. 抗甲状腺球蛋白单克隆抗体的制备及应用［J］. 现代肿瘤医学， 2006， 14(6): 669-670.

［2］ Zophel K， Wunderlich G， Smith BR. Serum thyroglobulin measunements with a high sensitivity enzymelinked immunosorbent assay: is there a clinical benefit in pathents with differentiated tryroid carcimoma?［J］. Thyroid， 2003， 13(9): 861-865.

［3］ Wunderlich G， Zophel K， Crook L， et al. A highsensitivity enzymelinked immuno sorbent assay for serum thyroslobulin［J］. Thyroid， 2001， 11(9): 819-824.

［4］ Lima N， Cavaliere H， Tomimori E， et al. Prognostic value of serial serum thyroglobulin determinations after tofal thyroidctomy for differentiated thyroid cancer［J］. J Endoerinal Invest， 2002， 25(2): 110-115