正常孕妇不同孕周血清中sHLAG的水平

　　　　　　 作者：侯彩英， 闵保华， 王 珺， 姚元庆

【摘要】 目的: 探讨正常妊娠妇女不同孕周血清可溶性人类白细胞抗原G(sHLAG)在妊娠过程中的作用。方法: 采用ELISA法检测20例正常孕妇不同孕周血清中的sHLAG水平。结果: 血清sHLAG的水平在正常妊娠的早、 中、 晚孕期的均值依次为（11.96±4.27）μg/L、 （11.50±4.17）μg/L、 （10.72±3.40）μg/L; 差异无统计学意义。结论: 血清sHLAG的水平在正常妊娠的整个过程中差别不大， 对维持胎儿的正常发育具有重要意义。

【关键词】 sHLAG; 正常妊娠; 免疫耐受

　　妊娠过程中， 带有父源性人类白细胞抗原（HLA）的胎儿， 直接接触富含免疫活性细胞的母体蜕膜， 理应受到母体免疫系统识别， 产生以细胞免疫为主的免疫应答而遭到母体的排斥。但事实相反， 母体对胎儿形成免疫耐受， 大多数胎儿在母体子宫内安然生长近10个月， 直至分娩。母胎免疫耐受现象的维持涉及诸多因素， 其中HLAG诱导的母胎耐受是目前关注的热点。HLAG的多态性较低且呈组织选择性分布， 主要分布在不表达HLAA、 B的母胎界面绒毛外滋养细胞上。HLAG独特的表达方式以及在原因不明的习惯性流产、 产前子痫等病理妊娠个体中母胎界面组织缺乏HLAG表达或表达降低， 推测HLAG可能在妊娠过程中起重要作用［1］。同时， 在人类辅助生殖技术中， 在胚胎的培养液中可检出可溶性HLAG， 并推测分泌sHLAG是胚胎能够着床的先决条件［2， 3］。因此， 研究HLAG基因在妊娠中的作用， 对于了解母胎耐受的机制具有重要意义， 对人类辅助生殖技术可能提供有益的提示。

　　1 对象和方法

　　1.1 研究对象 选择2006-10/2007-11在唐都医院产科门诊建卡及分娩的初产妇120名， 随访其妊娠结局， 建卡时孕周均≤12周， 从中随机抽取正常分娩初产妇20例进行了实验研究， 平均年龄为（26.3±3）岁， 早、 中、 晚孕期平均孕周分别为（8.5±0.7）周、 （18.4±0.4）周、 （37.8±1.0）周， 婴儿体重平均为（3060±344）g; 分娩时均实行剖宫产， 无吸烟及孕期服用大量药物史， 无孕期感染及内科疾病、 输血、 免疫治疗史。既往无高血压、 心脏病、 贫血、 糖尿病及肝肾病史。

　　1.2 方法 建卡孕妇分别于建卡时、 中孕、 临产前及抽取肘静脉血， 分离血清， 置于-80℃冻存。采用ELISA法（试剂盒购自捷克Biovendor公司）检测sHLAG的水平， 具体操作严格按试剂盒的说明书进行。本实验测定的为总的sHLAG水平。选用奥地利TECAN 128C340酶标仪测定吸光度（A）值， 波长为450 nm。

　　统计学分析: 采用Excel软件和SPSS l3.0进行统计学分析， 结果以x±s表示， 组间比较采用t检验， 以P＜0.05为差异具有统计学意义。

　　2 结果

　　ELISA法检测结果表明， 20例正常孕妇早、 中、 晚孕期血清sHLAG的水平， 依次为（11.96±4.27）μg/L、 （11.50±4.17）μg/L、 （10.72±3.40）μg/L， 3期之间比较无统计学意义(P&>0.05)。

　　3 讨论

　　相对于经典HLAⅠ类抗原， HLAG属非经典HLAⅠ类抗原。具有3 个主要特征: ①有限的分子多态性; ②选择性的组织分布， 主要分布在母胎界面绒毛外细胞滋养层上; ③可变的mRNA 剪接形成不同异构体分子， 其中4 种为膜结合型分子， 即HLAG1、 G2、 G3 和G4; 另外3 种为可溶性分子， 即HLAG5、 G6、 G7。它的生殖免疫学功能主要表现在以下几个方面: ①抑制自然杀伤(natural kill， NK)细胞的杀伤活性［4］。在胚胎着床期间， 子宫蜕膜有大量浸润的免疫活性细胞， 其中70%～80%是NK细胞， HLAG能抑制NK细胞的杀伤活性， 从而在母胎免疫耐受上起重要作用。②通过调节细胞因子的释放来抑制NK细胞的非特异性免疫反应， 进一步抑制NK 细胞的杀伤作用［5］。③抑制T 细胞杀伤功能［6］。T 细胞占妊娠早期子宫蜕膜淋巴细胞的20%～30%， HLAG 可抑制蜕膜和外周血细胞毒性T 细胞(cytotoxic T lymphocyte， CTL)的细胞杀伤作用， 保护胎儿免受母体CTL 细胞的杀伤。④诱导T细胞的凋亡［7］。

　　目前发现人体外周血、 脐带血、 羊水及卵细胞培养液中均有sHLAG存在， 且存在妊娠各阶段， 而且孕妇血清中sHLAG水平明显高于非孕妇［8］。另有研究指出， sHLAG低表达就不能有效地诱导CD8T细胞凋亡， 从而便可能导致原因不明的习惯性流产的发生［9］。母体的这种免疫机制十分复杂， 与诸多因素有关， 但首先认为母胎耐受的产生和维持主要取决于胚胎来源的滋养细胞表达HLAG、 TLX抗原及补体调节蛋白等分子。实验证明， 可溶性的HLAG与CD8分子结合后， 可诱导CD8+淋巴细胞合成分泌FasL， 通过Fas/FasL途径诱导CD8+T细胞凋亡。另外， sHLAG对母胎界面上的同种异体反应性CD8+T细胞具有局部清除作用， 可使CD8+细胞对含有父源性HLA的胎儿产生耐受， 有利于维持妊娠。HLAG还可通过杀伤细胞抑制受体抑制NK细胞的杀伤功能。本实验的结果表明， 正常妊娠妇女早、 中、 晚期血清sHLAG的水平无统计学意义， 提示这种抑制免疫应答的HLAG分子， 从妊娠早期就发挥作用， 而且在妊娠的整个过程中， 水平变化不大， 这对维持正常妊娠具有重要意义。

参考文献

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