作者：曹晓明 王执民 张洪新 曹玮 郭卫平 王义清 李文献 倪代会 关彦
【关键词】 肝肿瘤
关键词: 介入性热疗;肝功;肾功;肝肿瘤;荷瘤兔
摘 要:目的 研究经肝动脉介入热疗对荷瘤兔肝肾功能及生命体征的影响，探讨介入热疗治疗肿瘤的安全性. 方法 建立可供实验研究的兔VX2 移植性肝癌模型10只;30min内经兔肝动脉缓慢匀速注入60℃生理盐水40mL.分别于灌注前及灌注后1，3，5和7d检查肝、肾功的动态变化情况. 结果 荷瘤兔的呼吸、心率、体温都有一定程度的改变，但1h内均可恢复正常;ALT，AST于灌注后开始升高（ALT7倍，AST2倍），之后逐渐恢复，1wk后恢复正常;胆红素、白蛋白及γ-GT无明显变化.对肾功指标的监测表明，热疗对肾脏无明显影响. 结论 介入性热疗对荷瘤兔生命体征及肝肾功的影响是轻度的、可逆的，可以耐受.
Keywords:interventional thermo-therapy;liver function;re-nal function;liver-neoplasms;tumor-bearing rabbits
Abstract:AIM To evaluate the injury of interventional thermo-therapy on tumor-bearing rabbit hepatic and renal tis-sues at60℃via hepatic artery.METHODS VX2 carcinoma cells were inoculated into the hepatic parenchyma of white rabbits.Forty mL saline at60℃was perfused via hepatic artery in30min，2wk after the inoculation.Liver and kidney functions was checked before perfusion and1，3，5and7d after the perfusion.RESULTS Elevation of the serum ALT，AST levels was observed（ALT7times，AST2times）after the perfusion but reversed in a week，while Bil，Alb，γ-GT，BUN，Cr，Uric Acid indicated no significant changes at all.Vital sign levels were observed during the perfusion but reversed in an hour.Hepatocellular degenera-tion was marked in the tumor-free lobe，but was much sever-er in the tumor-bearing lobe.CONCLUSION Inter-vention-al thermotherapy at60℃via hepatic artery may cause minor injury in tumor-bearing rabbits.
0 引言
肝癌介入性热化疗（interventional thermoche-motherapy）是将导管选择性插入肿瘤供应动脉，然后灌注加热的液体或化疗药液进行治疗的方法.它可以发挥高温与化疗的互敏作用，有其独特的优点，亦有不足之处.梁志会等［1］ 认为经过60℃的介入性热疗，正常犬的肝组织受到轻微的一过性损伤，但无肝细胞坏死的发生，肝的正常生理功能亦未受到明显破坏.介入热疗对耐受力已下降的荷瘤兔影响如何?我们进行了探讨.
1 材料和方法
1.1 材料 德国西门子公司生产的1250mA，Polydoros-100附带DSA的大功率X线机;美国Cook公司生产的2/3F微导管;恒温水浴箱;600g・L-1 泛影葡胺;戊巴比妥钠;健康家兔20只，体质量（2.5±0.5）kg，雌雄不限（由唐都医院实验外科提供）;VX2 冰冻肿瘤细胞悬液，由日本京都Funabashi公司提供.
1.2 方法 按照一般细胞培养技术进行VX2 冰冻肿瘤细胞复苏，后离心5min（800r・min-1 ），弃上清液，加入PBS液并用玻璃棒搅匀，取制好的肿瘤细胞液0.5mL接种于兔后腿外测肌肉内，2wk后可扪及后腿外测肌肉内有一实质性包块，即制成荷瘤种兔.将包块切下，取瘤块边缘生长旺盛的鱼肉样组织数块，制成细碎组织块，无菌盐水稀释制成悬液.兔经戊巴比妥钠（30mg・kg-1 ）iv后，取上腹部正中切口2cm切开腹腔.充分暴露兔肝左中央叶，纱布隔离周围组织.用带16号针头的注射器将瘤组织悬液注入肝实质.接种后压迫止血1～2min，检查无出血即可关腹.2wk后B超检查可发现肿块，兔肝VX2 肿瘤的实验模型即以制成［2-4］ .热疗前清晨空腹，从兔耳缘静脉抽血1mL，送检验科测定肝、肾功各项指标.然后进行介入性热疗:兔戊巴比妥钠（30mg・kg-1 ）iv后，仰卧固定于手术台上.右腹股沟区脱毛、消毒后，经股动脉搏动处纵型切开皮肤2cm，钝性分离暴露右侧股动脉，夹住近端、暂时阻断血供后，用4号丝线提起远端，用眼科剪剪开一小斜口，将导管鞘插入动脉并固定，导入2/3F微导管，在X线机引导下，插管至肝动脉，然后进行灌注［5］ .以10mL注射器抽取水浴箱中60℃的无菌生理盐水［1］ 匀速灌注，30min总共灌入40mL.灌注结束后拔管，止血，缝合切口.热疗后分别于热灌注后1，3，5和7d从兔耳缘静脉抽空腹血1mL，送检测定肝功各项指标.
统计学处理:用SPLM统计软件，各组均以（x ±s）表示，用t检验.
2 结果
热疗过程中，兔的呼吸、心率、体温都有一定程度的加快.但1h内全部恢复正常（Tab1）.热灌注后，兔血清ALT和AST明显升高，1wk后恢复正常，γ-GT，Alb，TBil未发生明显变化（Tab2）.肌酐、尿素氮虽略有波动，但其变化无统计学意义（P&>0.05）.尿素氮与肌酐的比值一直位于正常范围内.尿酸虽然于热疗后明显增高（P&<0.01），但1wk内恢复正常（Tab2）.热灌注后1d，部分肝细胞发生混浊肿胀、球样变，汇管区可见中性白细胞浸润，呈急性炎症性改变;3d至1wk病理检查已恢复正常（Fig1，2）.
表2 荷瘤兔热疗前后肝功、肾功能情况 略
3 讨论
隔离热灌注的副作用常见发热、全身不适、恶心、呕吐［6］ ;血清肌酸激酶升高（升高200倍）［7］ .肝病理检查为1wk内可恢复正常的轻度受损［8］ .介入性热化疗的毒副作用则研究较少.文献报道介入性热化疗（药物为5-FU，灌注液温度为60℃）治疗大鼠肝脏移植性肿瘤时对大鼠的肝、肾功不产生明显影响［5］ .有人认为介入性热疗（60℃生理盐水）引起正常犬肝组织的一过性轻微损伤，但无肝细胞坏死的发生，肝的正常生理功能亦未受到明显破坏［1］ .人或动物患肝癌后其肝、肾功及耐受力均受影响，对其进行介入热疗情况会如何?我们进行了探讨.在经肝动脉热灌注后，ALT，AST均可明显增高（P&<0.01），但很快下降，至1wk后全部恢复正常，表明肝组织受到了一定的损伤，但损伤是轻微的、可逆的.血清γ-GT热疗前后无明显差异（P&>0.05），提示无肝细胞坏死的发生，病理切片也证明了这一点（Fig1，2）.Alb合成和胆红素变化无统计学意义（P&>0.05），这说明肝脏的正常生理功能未受到明显损伤.肌酐、尿素氮虽略有波动，但其变化无统计学意义（P&>0.05）.尿素氮与肌酐的比值一直位于正常范围内.综上所述，介入性热疗对荷瘤兔生命体征及肝、肾功的影响是轻度的、可逆的，荷瘤兔可以耐受.为介入热疗治疗肝肿瘤的安全性提供了理论依据.
图1 －图2 略
参考文献
［1］Liang ZH，Wang ZM，Zhang HX，Qi LJ，Gou WP，Wang YQ，Ni DH，Guan Y，Li WX.Effect of interventional thermotherapy through hepatic artery on liver function in dogs ［J］.Di-si Junyi Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），2000;21（4）:430-432.
［2］Cao W，Wang ZM，Zhang HX，Wang YQ，Gou WP，Li WX，Ni DH，Liang ZH，Qi LJ.The builder of retrofit model of Vx2 carcinoma in rabbit liver and the DSA imagining features of the tumor ［J］.Di-si Junyi Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），2001;22（7）:619-622.
［3］Zhang YD，Gong LS，Li NF，Mao XH.An animal experimental of isolated hyperthermic liver perfusion ［J］.Zhongguo Xiandai Yixue Zazhi（China J Modern Med），1999;9（7）:1-7.
［4］Tu G，Qiao TY，Yang GY，Chen WZ，Wang ZB.Rabbits bear-ing VX2 kidney tumors were established ［J］.Zhonghua Miniao Waike Zazhi（Chin J Urol），1999;20（3）:167.
［5］Yang JJ，Zhu YF.Thermo-chemotherapy via hepatic artery in liver cancerof VX2 tumor-bearing rat ［J］.Zhonghua Fangshexue Zazhi（J China Radiol），1995;299（5）:331-333.
［6］Formenti SC，Shrivastava PN.Abodomino-pelvic hyperthermia and intraperitoneal carboplatin in epithelial ovarian cancer:Fea-sibility，tolerance and pharmacology ［J］.IntJ RadiatOncol Bi-ol Phys，1996;35（5）:993-1001.
［7］Hohenberger P，Haier J.Assessment of regional and systemic toxicity of isolated hyperthermic extremity perfusion with tumor necrosis factor-alpha and melphalan ［J］.Chirurgie，1997;68（9）:914-920.
［8］Lang H，Thyen A，Nadalin S，Frerker M，Moreno L，Flem-ming P，Martin M，Oldhafer KJ，Raab R.Isolated hyperther-mic liver perfusion with high dose necrosis factor alpha in pigs ［J］.Eur Surg Res，2000;32（1）:1-10.