血清肿瘤标记物联合检测在预测肝癌复发患者中的诊断价值

【摘要】 目的：探讨联合检测血清中的αL岩藻糖苷酶(AFU)、甲胎蛋白(AFP)在预测肝癌术后复发的价值。方法：分别检测3组AFU、AFP，AFU 检测均采用比色速率法测定，设定AFU&>40U/L、GPDA&>41U/L为阳性界定值。AFP检测采用微粒子酶免法，设定AFP&>13.6μg/L为阳性界定值。结果：AFU、AFP水平A组与B组及正常对照组比较差异有统计学意义(P&<0.001);AFU、AFP水平B组较正常对照组高，但差异无统计学意义(P&>0.05);AFU、AFP水平A组肝癌复发前、后比较差异有统计学意义(P&<0.001);敏感性、准确性AFU+AFP与AFU、AFP比较差异有统计学意义(P&<0.001)，AFU与AFP比较差异无统计学意义(P&>0.05);特异性AFU+AFP、AFU、AFP两两比较差异无统计学意义(P&>0.05)。结论：联合检测血清中AFU、AFP水平可显著提高肝癌术后复发的诊断率，可作为预测肝癌术后复发的检测指标。

【关键词】 肝癌;复发;αL岩藻糖苷酶;甲胎蛋白;诊断

　　[ABSTRACT] Objective: To explore diagnosis value of the combined detection of serum AFU， AFP in predicting postoperative recurrence of hepatocellular carcinoma. Methods: The serum AFU， AFP levels were detected in three groups， AFU detection rate was used by colorimetric determination， respectively， set the AFU&>40 U / L， GPDA&>41 U / L defined as positive values. AFP was detected by microparticle enzyme immunoassay， set AFP&> 13. 6μg / L defined as positive values. Results: AFU， AFP levels of group A， group B and normal control group were significantly different (P&<0.001); AFU， AFP levels of group B were higher than that of the normal control group， but no significant difference (P&>0.05). AFU， AFP levels of group A before and after HCC recurrence were significant difference (P&<0.001). Sensitivity， accuracy of AFU + AFP and AFU， AFP were significantly different when compared (P&<0.001); AFU and AFP were no significant difference (P&>0.05); specificity of AFU + AFP， AFU， AFP were no significant differences (P&>0.05). Conclusion: The combined detection of serum AFU， AFP levels could significantly improve the diagnostic rate of liver cancer recurrence， may be as a predictor of postoperative recurrence of liver cancer detection indicators.

　　[KEY WORDS] Hepatocellular carcinoma; Recurrence; AFU; AFP; Diagnosis

　　原发性肝癌为临床一种常见病，是全球五大恶性肿瘤之一，调查显示其发病率还在逐年升高。目前，外科手术治疗仍然是可能治愈肝癌的唯一方法。然而，手术治疗后复发率和转移率较高，导致术后生存期较短、长期生存率较低[1]。研究表明，原发性肝癌患者行根治性切除术治疗后5年复发率达61.5%[2]。肝癌的发病机制是一个复杂的多因素、多步骤的过程。所以目前仍无一种特异性检测指标可在临床上预测或诊断肝癌的转移、复发[3，4]。我们发现通过联合检测血清中的αL岩藻糖苷酶(AFU)和甲胎蛋白(AFP)2种肿瘤标志物可早期发现肝癌的复发与转移，从而可进行早期治疗，延长患者生存期。现将结果报告如下。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　选取病例均为2007年1月～2008年12月在我院肝胆外科行肝癌根治术的肝癌术后患者，随访1年后分别选取临床资料完整的肝癌术后复发患者(A组)与肝癌术后未复发患者(B组)各30例。A组中男性19例，女性11例;年龄29～71岁，平均(51.5±5.6)岁。B组中男性18例，女性12例;年龄30～73岁，平均(52.5±5.4)岁。同时将在我院行体检的健康者30例设为正常对照组，其中男性20例，女性10例;年龄30～72岁，平均(52.3±5.3)岁。3组性别组成、年龄分布等一般资料比较差异无统计学意义(P&>0.05)，具有可比性。

　　1.2 病例入选标准

　　12.1 纳入标准 (1)A组、B组患者均为肝癌根治术后患者;(2)肝区可触及肿块;(3)经CT、MRI等检查证实肝脏有肿块存在;(4)生存期超过1年者;(5)告知患者本研究的目的、方法，以获得患者的同意，并与患者签署知情同意书。

　　1.2.2 排除标准 (1)排除严重的心脑疾患者;(2)排除全身其他部位或脏器伴有恶性肿瘤者;(3)排除病例资料收集不完整者;(4)排除中途失访者。

　　1.3 仪器及试剂

　　1.3.1 仪器 日立 7170A全自动生化分析仪，日本日立公司生产; 全自动电化学发光免疫分析仪。

　　1.3.2 试剂 购自瑞士 Roche 公司，试剂盒由珠海金赛尔公司和浙江夸克生物化工公司提供。

　　1.4 方法

　　所有观察对象空腹采静脉血3mL，分离血清待测。AFU检测均采用比色速率法测定，分别设定AFU&>40U/L、GPDA&>41U/L为阳性界定值。AFP检测采用微粒子酶免法，设定AFP&>13.6μg/L为阳性界定值。诊断效能评价以敏感性和特异性表示。

　　1.5 检测指标

　　联合检测3组观察对象血液中AFU、AFP2种肿瘤标志物的水平。

　　1.6 统计学处理

　　数据均经SPSS12.0软件进行处理，组间比较采用单因素方差分析，计量数据的比较采用独立样本t检验，计数数据以百分率表示，P&<0.05为差异具有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1各组血清AFU和AFP标志物水平的比较

　　AFU、AFP水平A组与B组及正常对照组比较差异有统计学意义(P&<0.001);AFU、AFP水平A组较正常对照组高，但差异无统计学意义(P&>0.05)。见表1。表1 各组血清AFU和AFP标志物水平的比较注：与B组及正常对照比较，ΔP&<0.001。

　　2.2 A组复发前后血清中AFU、AFP水平比较

　　AFU、AFP水平A组肝癌复发前、后比较差异有统计学意义(P&<0.001)。见表2。表2 观察组复发前、后血清中AFU、AFP水平比较注：与复发前比较，Δ P&<0.001。

　　2.3 血清肿瘤标志物的评价

　　敏感性、准确性AFU+AFP与AFU、AFP相比有显著差异(P&<0.001);AFU与AFP相比无明显差异(P&>0.05);特异性AFU+AFP、AFU、AFP两两比较无明显差异(P&>0.05)。见表3。　表3 观察组血清AFU和AFP的敏感性、特异性、准确性的比较

　　3 讨论

　　AFP是目前应用最为广泛的一种肝脏肿瘤标记物，其不仅可以用于早期诊断，也可用于检测肝癌的复发情况[5]。大多数学者认为[6]，AFP及AFPmRNA对预测原发性肝癌复发有意义。研究表明[7，8]，术前血清中AFP的含量大于1000μg/L时肿瘤的复发机会增高，但是AFP与肝癌的病理分型、术后复发及肝外转移并非直接相关，AFP增高也可见于部分慢性肝病、胃肠道恶性肿瘤等疾病，而且有部分原发性肝癌患者的AFP始终呈阴性，因此，单独以血清AFP作为检测原发性肝癌复发的标记物是不够准确的。有学者通过分析肝癌术后复发性患者的超声、CT结果及血清中AFPL3水平，最终认为AFPL3呈阳性的患者多处于肿瘤进展期，因此，可以AFPL3作为预测肝癌术后复发的有效指标[9]。有学者认为检测外周血中AFPmRNA的含量可作为血液循环中有恶性或良性肝细胞的标志，如血中AFPmRNA检测结果为阳性则预示有肝癌细胞的血源性转移，这证明AFPmRNA的检测是测定有肝外转移原发性肝癌患者血液循环中微量肝癌细胞的有用工具。

　　AFP属于胚胎性蛋白，是应用最广泛的肿瘤标记物。但因AFP对诊断肝癌有其局限性，文献报道IIAFP异质体(AFPRP)中的AFPL3与原发性肝癌有密切关系。血清总AFP含AFPL1，它来自良性肝病，占其主要部分;AFPL2来自孕妇，而AFPL3则为肝癌细胞特有，AFPL3&>15%～100%可诊断为原发性肝癌。AFPL3诊断肝癌的敏感性为96.9%，特异性为92.0%，准确性为95.5%，与总AFP或原发性肝癌直径间无相关性。定期检测AFPL3可作为预测肿瘤复发的有效指标。

　　AFU又名αL岩藻糖苷岩藻糖水解酶，是一种溶酶体酸性水解酶，广泛地存在于人体细胞和血液中，其中尤以肝、肾组织中的含量最高[10]。其可催化含岩藻糖基的糖蛋白、糖肽、低聚糖和糖苷进行分解代谢。目前，AFU已作为一项新的肿瘤标志物逐步应用到了肿瘤的临床诊断和治疗中。有研究表明[11]，AFU检测可作为诊断小细胞肝癌有效的方法，其在诊断小细胞肝癌时具有较高的敏感性和特异性。对于原发性肝癌患者，其血清AFU活性较慢性肝炎、肝硬化等良性病及正常健康人均有明显升高。有学者通过临床研究证明AFU在诊断原发性肝癌时敏感性可高达75%～90%，对直径小于3cm的原发性肝癌的则高于AFP，尤其对于AFP阴性的肝癌患者AFU阳性率可高达76.1%，对于小细胞肝癌也可达到70.8%[12]。

　　AFU与AFP联合诊断原发性肝癌，优势互补，可提高肝癌术后复发诊断的敏感性与准确性，尤其是早期诊断AFP检测阴性的原发性肝癌患者及小细胞肝癌患者的一项敏感度、准确性高的指标。本组资料中，联合检测血清中AFU、AFP的敏感性高达93.0%，准确性91.4%。因此，可作为预测肝癌术后复发的检测指标。

　　综上所述，联合检测血清中AFU、AFP水平显著提高肝癌术后复发的诊断率，可作为预测肝癌术后复发的检测指标。

参考文献

　　1 Mann CD，Neal CP，Garcea G，et al.Prognostic molecular markers in hepatocellular carcinoma：a systematic review[J].Eur J Cancer，2007，43(6)：979992.

　　2 Tang ZY，Ye SL，Liu YK，et al.A decade′s studies on metastasis of hepatocellular carcinoma[J].J Cancer Res Clin Oncol，2004，130(4)：187196.

　　3Yao DF，Dong ZZ，Yao M，et al.Specific molecular markers in hepatocellular carcinoma[J].Hepatobil Pancreat Dis Int，2007，6(3)：241247.

　　4 夏锋，王曙光.肝癌临床诊治的新观念[J].实用临床医药杂志，2009，13(2)：13.

　　5 Leoni S， Piscaglia F， Righini R， et al. Management ofsmall hepatocellular carcinoma [J]. Acta Gastroenterol Belg，2006，69(2)：230.

　　6 牛爱军，胡成进，闫先侠.血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶对原发性肝癌的诊断价值探讨[J].山东医药，2000，40(1)：1718.

　　7 吴兮，徐笑江，束新华.血清测定在癌症中应用价值的讨论[J].浙江临床医学，2002，11(4)：8781.

　　8 ElHouseini ME，Mohammed MS，Elshemey WM，et al.Enhanced detection of hepatocellular carcinoma[J].Cancer Control，2005，12(4)：248.

　　9 Wang NY，Zhao W，Zhang D，et al. Clinical application of avidinbiotin ELISA to detect serum hepatomaspecific gamma glutamyltransferase in patients with primary hepatic cancer[J].Zhonghua Zhong Liu Za Zhi，2009，31(2)：114117.

　　10 孟春城，陈孝平.VEGF，uPA，ICAM1和PCNA蛋白质表达与肝癌转移复发的关系[J].中华外科杂志，2002，40(9):673675.

　　11 Zhang Q，Chen X，Zhou J，et al.CD147，MMP2，MMP9 and MVDCD34 are significant predictors of recurrence after liver transplantation in hepatocellular carcinoma patients[J].Cancer Biol Ther，2006，5(7):808814.

　　12 张辉，任宁，叶青海，等.联合检测血浆骨桥蛋白和细胞间黏附分子对预测肝细胞癌患者术后预后的价值[J].中华外科杂志，2005，43(15):985988.