组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA的合成研究

【摘要】 目的：改进组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA的合成工艺。方法:以辛二酸为起始原料，经缩合、活化、氨解合成SAHA。结果:经3步反应得到目标化合物。结论：改进后的合成工艺简便、条件温和、原料易得。

【关键词】 组蛋白去乙酰化酶抑制剂;抗肿瘤药物;SAHA;合成

　　[ABSTRACT] Objective: To improve the synthetic procedure of the histone deacetylase (HDAC) inhibitor SAHA. Methods： Suberic acid was selected as the start material， and the SAHA was obtained through condensation， activation and ammoniated. Results： The final product was synthesized in 3 steps. Conclusions： The modified synthetic procedure is with easily obtained material， mild conditions and convenient operation.

　　[KEY WORDS] HDAC inhibitor; Anticancer drug; SAHA; Synthesis

　　肿瘤严重威胁人类的生命与健康，传统的抗肿瘤药由于选择性较差而易引起较为严重的毒副反应。近年来，随着生命科学研究的飞速进展，与肿瘤致病和发病机制等相关的各种基本过程正在被逐步阐明。开发可选择性作用于肿瘤发生和发展过程中的特定靶标的抗肿瘤药物已经成为当前抗肿瘤药物研究的重要目标。

　　组蛋白去乙酰化酶(HDAC)与肿瘤的发生和转移密切相关，对肿瘤细胞的生长调控具有普遍生物学意义，因此有可能成为广谱低毒抗肿瘤药物的作用靶点。目前已经发现了多种结构类型的小分子组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)，其中羟肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂受到了广泛的关注[1]。SAHA(suberoylanilide hydroxamic acid)是由默克公司开发的羟肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂[2]。在体内研究中，SAHA可在多种癌症模型中显示出抗肿瘤活性[3]。2期临床研究表明，SAHA可在患有实体瘤和血液恶性肿瘤的患者中显示出抗肿瘤活性[4，5]。SAHA已于2006年10月获美国FDA批准以商品名Zolinza上市，用于治疗皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)。

　　1 合成路线

　　目前文献报道的SAHA的合成路线主要是以辛二酸(1)为起始原料，与苯胺反应生成7苯胺甲酰基庚酸(2)，将2甲酯化后胺解可得到SAHA[6]。这种合成方法采用了具有高毒性和腐蚀性的氯化亚砜为反应试剂，且反应时间较长，需室温反应24h。

　　根据文献报道，本实验以辛二酸为起始原料，与苯胺反应生成7苯胺甲酰基庚酸(2)，将2用N羟基琥珀酰胺活化得到7苯胺甲酰基庚酸琥珀酰胺酯(3)，3胺解后可得到SAHA。改进后的合成工艺简便、条件温和、原料易得，且缩短了反应时间、提高了产率。具体合成路线见图1。

　　图1 SAHA的合成路线

　　2 实验部分

　　化合物熔点由显微熔点仪测定，温度未经校正;1HNMR光谱由日本JNMGX400核磁共振谱仪测定;FAB质谱由Zabspect高分辨质谱仪测定。

　　2.1 7苯胺甲酰基庚酸(2)的合成

　　将苯胺(4.09g，0.044mol)和辛二酸混合物于180℃加热10min后，冷却至室温。将反应液倒入4.0g KOH溶于50mL水的溶液中。过滤除去不溶物后，滤液用HCl水溶液酸化，过滤得到固体。将产物用水重结晶后得到4.06g白色固体，产率40.7%，mp128129℃。

　　2.2 7苯胺甲酰基庚酸琥珀酰胺酯(3)的合成

　　将4.06g(16.3mmol)7苯胺甲酰基庚酸、1.87g(16.3mmol)N羟基琥珀酰胺和3.36g(16.3mmol)N，N二环己基碳酰亚胺溶于40mL无水四氢呋喃，室温反应1h，过滤，滤液直接用于下一步反应。

　　2.3 SAHA的合成

　　将2.23g(32.3mmol)盐酸羟胺溶于20mL无水DMF中，加入3.26g(3.17mmol)三乙胺，搅拌下加入7苯胺甲酰基庚酸琥珀酰胺酯的无水四氢呋喃溶液。室温反应1h后，过滤，减压蒸除溶剂，产物用水稀释，析出固体，四氢呋喃重结晶，得白色固体2.92g，mp158159℃，产率68.0% (文献[7]:mp:159160.5℃，产率64.0%)。1HNMR(DMSOd6)，δ10.34(s，1H)，9.85(s，1H)，8.67(s，1H)，7.58(d，2H，J=7.8Hz)，7.28(t，2H，J=7.8Hz)，7.01(t，1H，J=7.5Hz)，2.28(t，2H，J=7.5Hz)，1.93(t，2H，J=7.3Hz)，1.54(m，4H)，1.27(m，4H)。FABMS m/z:265[M+H]+。

　　3 结果与讨论

　　文献报道的SAHA合成方法是以氯化亚砜为反应试剂将7苯胺甲酰基庚酸甲酯化后胺解得到目标产物[7，8]。本研究以N羟基琥珀酰胺为活化试剂，代替

参考文献

中的氯化亚砜，改进后的合成方法缩短了反应时间、提高了产率，且所采用的试剂无毒性和腐蚀性，对环境的污染较小。所合成的目标产物经核磁共振谱及质谱测试确证了化学结构。

参考文献

　1　Marks PA， Breslow R. Dimethyl sulfoxide to vorinostat: development of this histone deacetylase inhibitor as an anticancer drug [J]. Nat Biotechnol， 2007， 25(1): 8490.

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　　4Duvic M， Talpur R， Ni X， et al. Phase 2 trial of oral vorinostat (suberoylanilide hydroxamic acid， SAHA) for refractory cutaneous Tcell lymphoma (CTCL)[J]. Blood， 2007， 109(1): 3139.

　　5Blumenschein GR Jr， Kies MS， Papadimitrakopoulou VA， et al. Phase Ⅱ trial of the histone deacetylase inhibitor vorinostat (Zolinza， suberoylanilide hydroxamic acid， SAHA) in patients with recurrent and/or metastatic head and neck cancer[J]. Invest New Drugs，2008， 26(1): 8187.

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