作者:毛彩霓,杨卫丽,刘明生
【摘要】 目的:比较薜荔水提取物与乙醇提取物的抗炎作用。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法和醋酸致小鼠腹腔毛细管通透性增高法观察薜荔水提取物与乙醇提取物对炎症的抗炎作用。结果:醇提取物对两种抗炎模型均有明显的抑制作用,能显著降低小鼠腹腔毛细血管通透性增加及抑制小鼠耳廓肿胀。结论:薜荔药材乙醇提取物的抗炎效果优于水提取物。
【关键词】 薜荔;提取物;抗炎
[ABSTRACT] Objective: To observe the antiinflammatory effects in water extracts and alcohol extracts of Ficus pumila L. Methods: The antiinflammatory action was assessed by xyleneinduced ear swelling in mice and HAcinduced peritoneal capillary permeability in mice. Results: Alcohol extracts of Ficus pumila L. significantly improved the ear swelling in mice and inhibited the phlogistic infiltration in mice. Conclusion: Antiinflammatory effect of alcohol extracts of Ficus pumila L. is better than alcohol extracts of Ficus pumila L.
[KEY WORDS] Ficus pumila L.;Extracts;Antiinflammatory
薜荔(Ficus pumila L.)是属桑科(Moraceae)榕属(Ficus L.)攀援植物,又名木莲、凉粉树、爬墙虎、王不留行等[1],薜荔的茎、叶可供药用, 性平,味淡酸微苦,可祛风除湿,通血活络,解毒消肿,产于我国和日本,在我国主要分布于江西、湖南、四川、海南和台湾等省区,在海南主要产于昌江,白沙,文昌,万宁与保亭等市县[1]。药理研究显示薜荔具抗菌、增强免疫、抗肿瘤、抗诱导、抗炎镇痛与驱蛔虫等活性[2]。
本实验首次采用小鼠耳廓肿胀和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性炎症模型观察薜荔药材传统水煎煮提取物与乙醇提取物的抗炎效果,为进一步开发利用该植物资源提供依据。
1 材料与方法
毛彩霓等.薜荔药材两种提取物的抗炎作用研究
1.1 实验仪器与试药
R205旋转蒸发仪(上海申胜生物技术公司);Sh3D(Ⅲ)型循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂);日本JASCO650紫外分光光度计(日本分光);FA1104电子分析天平(梅特勒—托利多仪器有限公司,上海);TGL16c高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂);DK9811A电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司)。
薜荔采自海南省万宁市兴隆华侨农场,经中国医学科学院药用植物研究所海南分所鉴定为桑科(Moraceae)榕属(Ficus L.)植物薜荔(Ficus pumila L.)药材;阿司匹林肠溶片(湖南新汇制药有限公司提供,批号:090201);伊文思蓝(国药集团化学试剂有限公司,批号:WC20090209);二甲苯、正丁醇、乙酸乙酯均为分析纯;生理盐水(海南医学院药学院实验室配制)。
1.2 实验动物
昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄各半,由湖南省长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供(许可证号:SCXK(湘)20060001)。根据实验性质和性别分笼喂养,自由采食饮水。
1.3 薜荔药材不同提取物的制备
1.3.1 薜荔水提取物
取干燥薜荔茎叶药材300g,加10倍量水煎煮提取两次,每次1.5h,滤过,两次滤液合并,浓缩至每毫升对应薜荔生药5g。
1.3.2 薜荔醇提取物
取干薜荔茎叶药材300g,加7倍量75%乙醇[3]回流提取3次,合并滤液,减压回收乙醇至无醇味,浓缩至每毫升对应薜荔生药5g。
1.4 抗炎实验
1.4.1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀法[4]
选取昆明小鼠40只,体重18~22g,雌雄各半,随机分为4组,雌雄各半,每组10只。给药组分别为水提取物组、乙醇提取物组(二者剂量均为按生药量计100g/kg),阳性对照组为阿司匹林组(0.2g/kg),空白对照组给予等体积的生理盐水。各组灌胃给药,1次/d,给药容积0.4mL/20g小鼠体重,连续7d,于末次给药1h后,将二甲苯(20μL/只)均匀涂于每只小鼠右耳正反两面,左耳不涂作对照,致炎30min后脱颈椎处死小鼠,沿耳廓基线剪下双耳,用打孔器(直径9mm)在相同位置取下圆耳片,电子天平称重,计算左耳片和右耳片的重量差值(肿胀度)及肿胀率:
肿胀率(%)=(右耳重-左耳重)/左耳重×100%。
1.4.2 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高法[5]
取昆明种小鼠40只,体重18~20g,雌雄各半,随机分为4组,每组10只,组别与给药方法都同“1.4.1”项。末次给药20min后给各小鼠尾静脉注射 0.5%伊文思兰溶液10mL/kg,随即腹腔注射 0.6%醋酸溶液0.01mL/只。20min后脱颈椎处死,暴露腹腔,用5mL生理盐水洗涤腹腔,吸取洗涤液约3mL,3000r/min离心15min,取上清液于590nm处用比色法测定吸光度(A)。
1.5 统计学处理
各组数据以±s表示,组间差异比较用t检验,检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
二甲苯致小鼠耳肿胀模型是急性非特异性炎症模型,薜荔水提取物组、乙醇提取物组均能使小鼠耳廓肿胀明显降低,与空白对照组比较均有统计学差异(P&<0.01)。说明薜荔水提取物、乙醇提取物对急性、早期炎症具有很好的抗炎作用。结果见表1。表1 薜荔药材提取物对耳廓肿胀的影响注:与空白对照组比较,*P&<0.05,**P&<0.01。
3.2 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
薜荔药材乙醇提取物能降低醋酸引起的小鼠毛细血管通透性增加,使腹腔内渗出的染料明显减少(P&<0.05),与水提取物比较,差异具有统计学意义(P&<0.05),说明薜荔醇提取物可以降低毛细血管的通透性,减少急性、早期炎症的渗出,而水提取物无效果。结果见表2。表2 薜荔药材提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(±s)
3 结论
本实验首先通过预实验考察了二者是否具有抗炎作用及具有抗炎效果的最佳剂量。本预实验采用二甲苯所致小鼠耳廓肿胀模型进行预实验,每组6只小鼠,将给药组分为低、中、高剂量组,实验结果表明,中剂量组抗炎效果明显,故确定给药量为中剂量,即:按生药量计100g/kg。
薜荔醇提取物可显著抑制两种抗炎模型(P&<0.01),而薜荔水提取物仅能抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P&<0.05),说明薜荔药材醇提取物能抑制毛细血管扩张、通透性增加、渗出性水肿为主的炎症早期反应,且抗炎效果优于水提取物,此结果为进一步寻找抗炎有效成分提供科学依据。
参考文献
1 中华本草编委会.中华本草[M].上海:上海科技出版社,1999.499.
2 Zhong XQ, Xu HH. Summary of the research about Ficus officinal plant [J].Chin Tradit Herb Drugs,2000, 31(9): a3a4.
3 范明松,叶冠,黄成钢. 薜荔化学成分研究[J].中草药,2005,7(7):36.
4 Xu SY, Bian R L, Chen X. Methodology of pharmacological experiment[M]. Beijing: People′s Medical Publishing House, 1991.
5 Chen Q.Methodology in pharmacological study on Chinese materia medica[M]. Beijing: People′s Medical Publishing House, 1993.