【摘要】 目的 通过五龙颗粒对脾虚型变态反应性鼻炎(AR)大鼠白细胞介素-2、4、6 mRNA表达影响的研究，为健脾益气固表的五龙颗粒治疗AR提供理论依据。方法 采用病证结合的方法造模，用RT-PCR法检测鼻黏膜白细胞介素mRNA的表达。结果 五龙颗粒对实验性AR大鼠鼻黏膜处白细胞介素-2、4、6 mRNA的表达具有调节作用，升高的白细胞介素-4、6下降，降低的白细胞介素-2恢复。结论 五龙颗粒可能通过调节细胞因子白细胞介素-2、4、6 mRNA的表达，对实验性AR大鼠发挥治疗作用。
【关键词】 五龙颗粒；变应性鼻炎；白细胞介素-2 mRNA；白细胞介素-4 mRNA；白细胞介素-6 mRNA
Abstract：Objective To study the effect of Wulong granules on the expression of IL-2 mRNA， IL-4 mRNA and IL-6 mRNA in allergic rhinitis (AR) rats in Spleen Qi deficiency type. To establish the clinic treatment principle-tonify Spleen and reinforce Qi of AR through the lab study. Methods Established AR model with combination of disease and Zheng， checked the expression of IL-2 mRNA， IL-4 mRNA and IL-6 mRNA of nasal mucosa were detected with RT-PCR. Results Wulong granules can adjust the expression of mRNA of AR rats' nasal mucosa. It can descend the ascensus of IL-4 mRNA， IL-6 mRNA and the drop of IL-2 mRNA. Conclusion Wulonggranules can show treatment effect to AR rats through adjusting the expression of cell factors such as IL-2 mRNA， IL-4 mRNA and IL-6 mRNA.
Key words：Wulong-granules；allergic rhinitis；IL-2 mRNA；IL-4 mRNA；IL-6 mRNA
变态反应性鼻炎(AR)常与哮喘、荨麻疹等变态反应性疾病并存，其属于Ⅰ型变态反应。中医多认为内因为脏腑功能失调，脏腑虚损，正气不足，腠理疏松，卫表不固；外因多为风寒、异气之邪侵袭鼻窍而致，寒邪束于皮毛，阳气无从泄越，故喷而上出为嚏。本实验从脾虚型AR入手，采用RT-PCR方法，从基因水平上研究五龙颗粒对实验性AR大鼠鼻黏膜白细胞介素-2、4、6 (IL-2、IL-4、IL-6)mRNA表达的影响，探讨五龙颗粒对脾虚型AR的影响及对该型AR的治疗机制。
1 实验材料
1.1 动物
SD大鼠42只，3月龄，体重180～220 g，雌雄各半，四川省医学科学院实验动物研究所提供，合格证号0012110。饲养于成都中医药大学微生物与免疫实验中心，室内温度控制在20～25 ℃。
1.2 药物及试剂
五龙颗粒，华神集团提供，药液原药材含量2.5 g/mL。息斯敏，西安杨森生产，用药前研磨成粉，用生理盐水配成0.03%的混悬液。卵白蛋白：美国Sigma公司生产，洛阳华美生物工程公司分装。TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0试剂，宝生物工程(大连)有限公司生产。PCR引物，宝生物工程(大连)有限公司合成。
2 实验方法
2.1 分组及造模
SD大鼠自由喂养1周后，将大鼠按体重、性别随机分为7组，每组6只。即空白组、脾虚AR模型组、脾虚AR中药组、脾虚AR西药组、AR模型组、AR中药组、AR西药组。
脾气虚模型：用饮食不节加游泳疲劳过度综合因素伤脾方法[1]。饮食不节：病证结合的脾虚AR模型组、脾虚AR中药组、脾虚AR西药组动物喂饲甘兰每只10～15 g/d，自由饮水；双日猪脂2 mL/只灌胃，自由进食、饮水，共8 d。过劳伤气：以上各组动物在上述处理的当日放入20 ℃水池中游泳至疲劳过度(以经驱赶无力游泳或欲溺水为指征)，1次/d，共8 d。
AR模型：按照安氏[2]报道的方法造模，实验组动物以卵白蛋白0.30 mg作抗原，氢氧化铝粉末30 mg作佐剂，加生理盐水1 mL形成混悬液，腹腔内注射，隔日1次，共7次。腹腔注射免疫完成后，在治疗的同时，每日给药1 h后再予以5%卵白蛋白溶液半量激发，即5%卵白蛋白溶液10 μL，每侧5 μL滴入大鼠双侧前鼻孔；模型组只激发不给药。空白组以生理盐水代替卵白蛋白，其余方法和步骤不变。
2.2 给药
造模结束后，即22 d后开始给药，给药时间为7 d。每日以成人临床剂量8倍的五龙颗粒(中药组)及息斯敏混悬液(西药组)灌胃，1次/d。空白组、AR模型组、脾虚模型AR组：正常喂养，不给药物。
2.3 观察指标及检测方法
2.3.1 鼻黏膜IL-2 mRNA表达的RT-PCR检测
实验结束后，在超净工作台上取鼻黏膜用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)法，进行IL-2 mRNA(信使RNA)水平表达的检测。具体方法如下：国际权威数据库中(http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/)查询相关SD大鼠基因全序列；用引物设计软件Primer 5.0设计出候选引物对；综合比较，找出最佳引物对；委托宝生物工程(大连)有限公司合成IL-2 mRNA引物：5'-CACTGACGCTTGTCCTCC- 3'，3'-TTCGTCCGGTGTC TTAAC-5'，采用美国TriZol试剂(Ne.15596-018)一步法提取总RNA→反转录反应→PCR反应，反应结果通过凝胶电泳系统检测。由于反应众多，为保障不同反应之间的可比性，采用不同反应产物带的相对荧光强度比值进行横向比较，确定不同基因在不同样本的相对表达程度。
2.3.2 鼻黏膜IL-4 mRNA表达的RT-PCR检测
测试方法同IL-2 mRNA，引物设计为：5'-TGCTGTCACCCTGTTCTG-3'， 3’-GATGCTCCCTTTATGAACG-5’。
2.3.3 鼻黏膜IL-6 mRNA表达的RT-PCR检测
测试方法同IL-2 mRNA，引物设计为：5'-CCACTGCCTTCCCTACTT-3'， 3'-TATTGTTCTTTCTGTTTCGGTC-5'。
2.4 统计学方法
计量资料采用x±s表示；组间比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)；方差齐性检验用Homageneity of variance test；如果方差齐者采用LSD法，方差不齐采用Tamhane's T2法。数据用SPSS11.5统计软件处理。
3 结果
(见表1)表1 五龙颗粒对AR大鼠鼻黏膜组织IL-2、IL-4、IL-6 mRNA
表达的影响(略) 注：与空白组比较，△P&<0.05，△△P&<0.01；与脾虚AR模型组比较，▲P&<0.05，▲▲P&<0.01；与AR模型组比较，★P&<0.05。
4 讨论
熊大经教授在多年的临床实践中发现，单纯的肺气虚寒型鼻鼽并不多见，而肺脾两虚型鼻鼽患者在临床上更为常见；认为肺气虚弱，卫气卫外功能必然减弱；而脾气虚弱，后天生化乏源，则不能助肺固表，以至邪干肺系，故治疗应从健脾入手，健脾益气，培补中土，从而达到培土生金、益气固表之目的。现代医学认为本病与遗传密切相关，带有与变应性鼻炎发病相关基因的特应型(atopic type)个体，并且本病的发生与宿主的免疫紊乱有关[3]。从而确立了本病的治疗关键在于恢复机体的正常免疫机能状态，改善特应型体质。因此，选用党参、黄芪、白术、茯苓、山药等补中益气、健脾除湿；僵蚕、蝉蜕宣肺通窍、通络止痒；枸杞子、五味子益肾止涕，组成五龙颗粒。纵观全方，通过补中益气、健脾宣肺益肾，兼顾先天、后天，从而达到消除症状、改善体质的目的。
引起AR最重要的因素是变应原引起TH细胞的分化过程。在小鼠体内发现至少存在两种以上的TH细胞，它们分别合成不同的细胞因子。TH1细胞产生IL-2、TNF-β和IFN-γ等，Th3细胞分泌IL-4、IL-5、IL-10和IL-13等。决定Th3分化的主要因素是IL-4，IL-4是由活化的Th3细胞经抗原或丝裂原刺激而产生的一种细胞因子，除了Th3细胞外，自然杀伤细胞、肥大细胞和嗜碱粒细胞也分泌IL-4。其生物效应主要包括：诱导人B细胞产生IgE、IgG1；诱导杀伤T细胞和LAK细胞的杀伤活性，诱导单核-巨噬细胞表达MHC-Ⅱ类抗原；调节造血细胞的增殖和分化[4]。本实验模型组鼻黏膜组织IL-4 mRNA的表达明显升高，用药后治疗各组明显下降，表明五龙颗粒可以抑制IL-4 mRNA的表达，其可能抑制Th3细胞、NK细胞、肥大细胞和嗜碱粒细胞分泌IL-4，从而抑制IgE的合成，阻断变态反应性鼻炎的发作。
现已证明，IL-2在人体免疫方面起着重要的作用。IL-2能增强巨噬细胞和自然杀伤 (nature killer，NK)细胞杀伤性，并可直接调节T细胞、B细胞分化增殖[5]。这些细胞表面均表达IL-2R，IL-2可与细胞表面的IL-2R结合而影响这些免疫细胞的功能。IL-2在哮喘中作用的研究报道尚有分歧，IL-2能直接促进T细胞进行有丝分裂，T细胞产生IL-4需要IL-2，IL-2可上调IL-4诱导的IgE合成，Maggi等认为IL-2可能在B细胞合成IgE中起重要作用。相反有报道IL-2能抑制正常人和过敏患者外周血单个核细胞由IL-4诱导的IgE、IgG4合成。Romano等[6]发现，特应症患者外周血单个核细胞产生IL-2很少，Tac抗原表达很少，提示有IL-2产生缺陷。对IL-2在变应性疾病及脾虚证中的变化和作用，目前认识尚不一致，本实验结果表明，五龙颗粒对AR及脾虚引起的IL-2 mRNA的表达降低具有明显的恢复升高作用。
IL-6由多种细胞合成和分泌，包括活化的T细胞和B细胞、单核巨噬细胞、内皮细胞等，是一种抑制病毒复制的细胞因子，曾称为IFN-β2。其生物学作用主要可增强T细胞产生IL-2和表达IL-2受体；诱导巨噬细胞和NK细胞分化。另外，IL-6刺激肝细胞合成急性期反应蛋白，可引起急性期炎症反应，被称为前炎症细胞因子。有研究表明Ⅰ型变态反应患者，由变应原诱导的鼻黏膜晚期反应标本表达IL-6和IL-8 mRNA细胞数明显增加。其之所以选用攻击后24 h标本作为研究模型，是因为此时炎症细胞浸润数量达最高[7]。本实验研究结果表明，模型组鼻黏膜组织IL-6 mRNA的表达明显升高，用药后治疗各组显著下降；AR鼻黏膜在发作期伴有明显的炎症反应；五龙颗粒可能通过调节IL-6 mRNA的表达对实验性AR大鼠鼻黏膜晚期炎症反应起到抑制作用。
【参考文献
】
[1] 李德新.脾虚证对生物膜结构与功能影响的实验研究[J].辽宁中医杂志，1993，20(6)：39.
[2] 安云芳.变应性鼻炎鼻黏膜P物质受体的研究[J].中华耳鼻咽喉科杂志，1998，33(3)：139－141.
[3] 刘永祥.浅谈中医免疫学[J].中国西医结合">中西医结合耳鼻咽喉科杂志，1999， 7(1)：51－52.
[4] Mosmann TR，Cherwinski H，Bond MV，et al.Two types of murine helper T cell clone.I.Defintion according to profiles of lymphokine activities and secreeted proteins[J].Immunol，1986，136：2348.
[5] Symons. Soluble IL-2 recoptoe in rheumatoid orthritis， correlation with disease activity IL-1 and IL-2 inhibition[J]. Immunol，1988，141：2612.
[6] Romano MF， Valerio G， Turco MC， et al. Defect of CD2- and CD3- mediated activation pathways in T cells of atopic patients：role of interleukin 2[J].Cell Immunol，1992，139：91.
[7] Jacobsen M R， Varney V， Sudderick R， et al. Immunohistology of allegen-induced latenasal responses[J].Allergy Clin Immunol， 1991，87：304.
【摘要】 目的 通过五龙颗粒对脾虚型变态反应性鼻炎(AR)大鼠白细胞介素-2、4、6 mRNA表达影响的研究，为健脾益气固表的五龙颗粒治疗AR提供理论依据。方法 采用病证结合的方法造模，用RT-PCR法检测鼻黏膜白细胞介素mRNA的表达。结果 五龙颗粒对实验性AR大鼠鼻黏膜处白细胞介素-2、4、6 mRNA的表达具有调节作用，升高的白细胞介素-4、6下降，降低的白细胞介素-2恢复。结论 五龙颗粒可能通过调节细胞因子白细胞介素-2、4、6 mRNA的表达，对实验性AR大鼠发挥治疗作用。
【关键词】 五龙颗粒；变应性鼻炎；白细胞介素-2 mRNA；白细胞介素-4 mRNA；白细胞介素-6 mRNA
Effects of Wulong Granules on the Interlerkin mRNA Expression of Nasal Mucosa in Alergic Rhinitis Rats
FU Wen-yang， XIE Hiu， XIONG Da-jing
1.Shenzhen Hospital of TCM， Shenzhen 518000， China；2.Chendu University of TCM， Chengdu 610075， China
Abstract：Objective To study the effect of Wulong granules on the expression of IL-2 mRNA， IL-4 mRNA and IL-6 mRNA in allergic rhinitis (AR) rats in Spleen Qi deficiency type. To establish the clinic treatment principle-tonify Spleen and reinforce Qi of AR through the lab study. Methods Established AR model with combination of disease and Zheng， checked the expression of IL-2 mRNA， IL-4 mRNA and IL-6 mRNA of nasal mucosa were detected with RT-PCR. Results Wulong granules can adjust the expression of mRNA of AR rats' nasal mucosa. It can descend the ascensus of IL-4 mRNA， IL-6 mRNA and the drop of IL-2 mRNA. Conclusion Wulonggranules can show treatment effect to AR rats through adjusting the expression of cell factors such as IL-2 mRNA， IL-4 mRNA and IL-6 mRNA.
Key words：Wulong-granules；allergic rhinitis；IL-2 mRNA；IL-4 mRNA；IL-6 mRNA
变态反应性鼻炎(AR)常与哮喘、荨麻疹等变态反应性疾病并存，其属于Ⅰ型变态反应。中医多认为内因为脏腑功能失调，脏腑虚损，正气不足，腠理疏松，卫表不固；外因多为风寒、异气之邪侵袭鼻窍而致，寒邪束于皮毛，阳气无从泄越，故喷而上出为嚏。本实验从脾虚型AR入手，采用RT-PCR方法，从基因水平上研究五龙颗粒对实验性AR大鼠鼻黏膜白细胞介素-2、4、6 (IL-2、IL-4、IL-6)mRNA表达的影响，探讨五龙颗粒对脾虚型AR的影响及对该型AR的治疗机制。
1 实验材料
1.1 动物
SD大鼠42只，3月龄，体重180～220 g，雌雄各半，四川省医学科学院实验动物研究所提供，合格证号0012110。饲养于成都中医药大学微生物与免疫实验中心，室内温度控制在20～25 ℃。
1.2 药物及试剂
五龙颗粒，华神集团提供，药液原药材含量2.5 g/mL。息斯敏，西安杨森生产，用药前研磨成粉，用生理盐水配成0.03%的混悬液。卵白蛋白：美国Sigma公司生产，洛阳华美生物工程公司分装。TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0试剂，宝生物工程(大连)有限公司生产。PCR引物，宝生物工程(大连)有限公司合成。
2 实验方法
2.1 分组及造模
SD大鼠自由喂养1周后，将大鼠按体重、性别随机分为7组，每组6只。即空白组、脾虚AR模型组、脾虚AR中药组、脾虚AR西药组、AR模型组、AR中药组、AR西药组。
脾气虚模型：用饮食不节加游泳疲劳过度综合因素伤脾方法[1]。饮食不节：病证结合的脾虚AR模型组、脾虚AR中药组、脾虚AR西药组动物喂饲甘兰每只10～15 g/d，自由饮水；双日猪脂2 mL/只灌胃，自由进食、饮水，共8 d。过劳伤气：以上各组动物在上述处理的当日放入20 ℃水池中游泳至疲劳过度(以经驱赶无力游泳或欲溺水为指征)，1次/d，共8 d。
AR模型：按照安氏[2]报道的方法造模，实验组动物以卵白蛋白0.30 mg作抗原，氢氧化铝粉末30 mg作佐剂，加生理盐水1 mL形成混悬液，腹腔内注射，隔日1次，共7次。腹腔注射免疫完成后，在治疗的同时，每日给药1 h后再予以5%卵白蛋白溶液半量激发，即5%卵白蛋白溶液10 μL，每侧5 μL滴入大鼠双侧前鼻孔；模型组只激发不给药。空白组以生理盐水代替卵白蛋白，其余方法和步骤不变。
2.2 给药
造模结束后，即22 d后开始给药，给药时间为7 d。每日以成人临床剂量8倍的五龙颗粒(中药组)及息斯敏混悬液(西药组)灌胃，1次/d。空白组、AR模型组、脾虚模型AR组：正常喂养，不给药物。
2.3 观察指标及检测方法
2.3.1 鼻黏膜IL-2 mRNA表达的RT-PCR检测
实验结束后，在超净工作台上取鼻黏膜用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)法，进行IL-2 mRNA(信使RNA)水平表达的检测。具体方法如下：国际权威数据库中(http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/)查询相关SD大鼠基因全序列；用引物设计软件Primer 5.0设计出候选引物对；综合比较，找出最佳引物对；委托宝生物工程(大连)有限公司合成IL-2 mRNA引物：5'-CACTGACGCTTGTCCTCC- 3'，3'-TTCGTCCGGTGTC TTAAC-5'，采用美国TriZol试剂(Ne.15596-018)一步法提取总RNA→反转录反应→PCR反应，反应结果通过凝胶电泳系统检测。由于反应众多，为保障不同反应之间的可比性，采用不同反应产物带的相对荧光强度比值进行横向比较，确定不同基因在不同样本的相对表达程度。
2.3.2 鼻黏膜IL-4 mRNA表达的RT-PCR检测
测试方法同IL-2 mRNA，引物设计为：5'-TGCTGTCACCCTGTTCTG-3'， 3’-GATGCTCCCTTTATGAACG-5’。
2.3.3 鼻黏膜IL-6 mRNA表达的RT-PCR检测
测试方法同IL-2 mRNA，引物设计为：5'-CCACTGCCTTCCCTACTT-3'， 3'-TATTGTTCTTTCTGTTTCGGTC-5'。
2.4 统计学方法
计量资料采用x±s表示；组间比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)；方差齐性检验用Homageneity of variance test；如果方差齐者采用LSD法，方差不齐采用Tamhane's T2法。数据用SPSS11.5统计软件处理。
3 结果
(见表1)表1 五龙颗粒对AR大鼠鼻黏膜组织IL-2、IL-4、IL-6 mRNA
表达的影响(略) 注：与空白组比较，△P&<0.05，△△P&<0.01；与脾虚AR模型组比较，▲P&<0.05，▲▲P&<0.01；与AR模型组比较，★P&<0.05。
4 讨论
熊大经教授在多年的临床实践中发现，单纯的肺气虚寒型鼻鼽并不多见，而肺脾两虚型鼻鼽患者在临床上更为常见；认为肺气虚弱，卫气卫外功能必然减弱；而脾气虚弱，后天生化乏源，则不能助肺固表，以至邪干肺系，故治疗应从健脾入手，健脾益气，培补中土，从而达到培土生金、益气固表之目的。现代医学认为本病与遗传密切相关，带有与变应性鼻炎发病相关基因的特应型(atopic type)个体，并且本病的发生与宿主的免疫紊乱有关[3]。从而确立了本病的治疗关键在于恢复机体的正常免疫机能状态，改善特应型体质。因此，选用党参、黄芪、白术、茯苓、山药等补中益气、健脾除湿；僵蚕、蝉蜕宣肺通窍、通络止痒；枸杞子、五味子益肾止涕，组成五龙颗粒。纵观全方，通过补中益气、健脾宣肺益肾，兼顾先天、后天，从而达到消除症状、改善体质的目的。
引起AR最重要的因素是变应原引起TH细胞的分化过程。在小鼠体内发现至少存在两种以上的TH细胞，它们分别合成不同的细胞因子。TH1细胞产生IL-2、TNF-β和IFN-γ等，Th3细胞分泌IL-4、IL-5、IL-10和IL-13等。决定Th3分化的主要因素是IL-4，IL-4是由活化的Th3细胞经抗原或丝裂原刺激而产生的一种细胞因子，除了Th3细胞外，自然杀伤细胞、肥大细胞和嗜碱粒细胞也分泌IL-4。其生物效应主要包括：诱导人B细胞产生IgE、IgG1；诱导杀伤T细胞和LAK细胞的杀伤活性，诱导单核-巨噬细胞表达MHC-Ⅱ类抗原；调节造血细胞的增殖和分化[4]。本实验模型组鼻黏膜组织IL-4 mRNA的表达明显升高，用药后治疗各组明显下降，表明五龙颗粒可以抑制IL-4 mRNA的表达，其可能抑制Th3细胞、NK细胞、肥大细胞和嗜碱粒细胞分泌IL-4，从而抑制IgE的合成，阻断变态反应性鼻炎的发作。
现已证明，IL-2在人体免疫方面起着重要的作用。IL-2能增强巨噬细胞和自然杀伤 (nature killer，NK)细胞杀伤性，并可直接调节T细胞、B细胞分化增殖[5]。这些细胞表面均表达IL-2R，IL-2可与细胞表面的IL-2R结合而影响这些免疫细胞的功能。IL-2在哮喘中作用的研究报道尚有分歧，IL-2能直接促进T细胞进行有丝分裂，T细胞产生IL-4需要IL-2，IL-2可上调IL-4诱导的IgE合成，Maggi等认为IL-2可能在B细胞合成IgE中起重要作用。相反有报道IL-2能抑制正常人和过敏患者外周血单个核细胞由IL-4诱导的IgE、IgG4合成。Romano等[6]发现，特应症患者外周血单个核细胞产生IL-2很少，Tac抗原表达很少，提示有IL-2产生缺陷。对IL-2在变应性疾病及脾虚证中的变化和作用，目前认识尚不一致，本实验结果表明，五龙颗粒对AR及脾虚引起的IL-2 mRNA的表达降低具有明显的恢复升高作用。
IL-6由多种细胞合成和分泌，包括活化的T细胞和B细胞、单核巨噬细胞、内皮细胞等，是一种抑制病毒复制的细胞因子，曾称为IFN-β2。其生物学作用主要可增强T细胞产生IL-2和表达IL-2受体；诱导巨噬细胞和NK细胞分化。另外，IL-6刺激肝细胞合成急性期反应蛋白，可引起急性期炎症反应，被称为前炎症细胞因子。有研究表明Ⅰ型变态反应患者，由变应原诱导的鼻黏膜晚期反应标本表达IL-6和IL-8 mRNA细胞数明显增加。其之所以选用攻击后24 h标本作为研究模型，是因为此时炎症细胞浸润数量达最高[7]。本实验研究结果表明，模型组鼻黏膜组织IL-6 mRNA的表达明显升高，用药后治疗各组显著下降；AR鼻黏膜在发作期伴有明显的炎症反应；五龙颗粒可能通过调节IL-6 mRNA的表达对实验性AR大鼠鼻黏膜晚期炎症反应起到抑制作用。
【参考文献
】
[1] 李德新.脾虚证对生物膜结构与功能影响的实验研究[J].辽宁中医杂志，1993，20(6)：39.
[2] 安云芳.变应性鼻炎鼻黏膜P物质受体的研究[J].中华耳鼻咽喉科杂志，1998，33(3)：139－141.
[3] 刘永祥.浅谈中医免疫学[J].中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志，1999， 7(1)：51－52.
[4] Mosmann TR，Cherwinski H，Bond MV，et al.Two types of murine helper T cell clone.I.Defintion according to profiles of lymphokine activities and secreeted proteins[J].Immunol，1986，136：2348.
[5] Symons. Soluble IL-2 recoptoe in rheumatoid orthritis， correlation with disease activity IL-1 and IL-2 inhibition[J]. Immunol，1988，141：2612.
[6] Romano MF， Valerio G， Turco MC， et al. Defect of CD2- and CD3- mediated activation pathways in T cells of atopic patients：role of interleukin 2[J].Cell Immunol，1992，139：91.
[7] Jacobsen M R， Varney V， Sudderick R， et al. Immunohistology of allegen-induced latenasal responses[J].Allergy Clin Immunol， 1991，87：304.