作者：王彩云，莫志贤，朱国鸿
【关键词】 青风藤
【Abstract】 AIM: To investigate the effects of Sinomenium acutum on the morphine（Mor）withdrawal response and acetylchline (Ach)induced contracture in the isolated guinea pig ileum. METHODS: The contracture was elicited by the addition of 1 μmol・L-1 naloxone (Nal) to the tube which contained the isolated ileum incubated with Mor (3μmol・L-1) at 37.5 ℃ for 4 h. RESULTS: When Sinomenium acutum (0.04， 0.2， 1.0 g・L-1) was added 1 min before and after Nal in the Mordependent ilea bathed in Krebs solution containing Mor， or was added in the naive ilea bathed in Krebs solution before and after adding Ach， the Nalprecitated withdrawal contracture or Achinduced contracture was significantly decreased in a dosedependent manner.. The comparison of Sinomenium acutum (0.04， 0.2， 1.0 g・L-1) and Mordependent group or Ach group revealed some significant differences（P&<0.05）. CONCLUSION: Sinomenium acutum can inhibit Mordependent withdrawal syndromes.
【Keywords】 Sinomenium acutum; morphine; naloxone; ileum; nimodipine; acetylchline
【摘要】 目的： 观察青风藤(QFT)对吗啡在离体豚鼠回肠中戒断反应的影响，以及对乙酰胆碱(Ach)引起豚鼠回肠收缩的影响，评价青风藤对吗啡依赖豚鼠回肠的作用. 方法： 戒断性收缩由1 μmol・L-1纳络酮（Nal）加入已在含3 μmol・L-1吗啡（Mor）的37.5℃ Krebs液中孵育4 h的离体豚鼠回肠引起. 结果： 当QFT (0.04， 0.2， 1.0 g・L-1)在加入Nal 1 min前后给药，Nal催促的戒断性收缩被抑制，与Mor依赖对照组相比较有显著性差异（P&< 0.05）； QFT (0.04， 0.2， 1.0 g・L-1)对Ach引起的正常豚鼠回肠收缩也有抑制作用，与Ach对照组相比较均有显著性差异（P&< 0.05）；QFT的作用呈剂量依赖趋势. 结论： 青风藤能够抑制Mor依赖的戒断症状.
【关键词】 青风藤；吗啡；纳络酮；回肠；尼莫地平；乙酰胆碱
0引言
中药青风藤(QFT)是防己科植物青藤Sinomenium acutum (Thunb.) et Wils. 及毛青藤S. acutum (Thunb.) Rehd. et Wils ， Var. cinereum（Diels）Rehd. et Wils. 的干燥藤茎，具有祛风通络，除湿止痛之功效. 临床上主要用于治疗风湿痹痛、关节肿胀，麻痹搔痒等病症. 中药戒毒复方中使用QFT已收到较好的临床效果［1］. 目前为止，国内外文献资料尚未见有关研究QFT抗阿片类戒断反应的实验报道. 为探讨QFT在戒毒方面的应用价值，通过建立有效的豚鼠离体回肠模型［2］，观察QFT对纳络酮(Nal)催促的吗啡(Mor)依赖豚鼠回肠戒断性收缩的影响以及对Ach引起正常回肠收缩的影响.
1材料和方法
1.1材料青风藤（省药材站提供，经本校中药鉴定室鉴定为正品青风藤 ，水煎醇沉法制备1.0 kg・L-1的水提液，稀释成不同浓度） ，Mor（ 解放军总后勤部药品供应站），Nal（北京四环药厂），尼莫地平(Nim)（山东新华制药股份有限公司）. 豚鼠（n= 20），♂ ，体质量（310±33） g（由第四军医大学实验动物中心提供），实验前禁食12 h. PCLAB生物信号采集系统和JZ100型张力换能器（北京微信斯达科技发展有限责任公司）， DW5A自供液式恒温平滑肌槽（广东汕头教育医学仪器厂）.
1.2方法取豚鼠（n=20），击头处死，立即剪开腹腔取出回肠，弃去近盲肠部约10 cm回肠后，置于冰冷的Krebs液中，用Krebs液冲去肠腔内容物，每只分别剪取3～4 cm的回肠段. 其中10只豚鼠回肠分别剪取6段，随机分到6个组中，观察药物对回肠催促戒断收缩的影响分组为: 正常回肠组、Mor依赖对照组、QFT（0.04，0.2，1.0 g・L-1）系列剂量治疗组及Nim对照组； 另10只豚鼠分别剪取5段，随机分到5个组中，观察药物对Ach引起收缩影响：Ach对照组、QFT（0.04，0.2，1.0 g・L-1）系列剂量组和阿托品(Atr)对照组. Mor依赖回肠标本的制备方法为：各回肠段悬挂于30 mL含3 μmol・L-1 Mor的Krebs液中，通入O2及CO2（φ：950 mL・L-1 vs 50 mL・L-1），37 ℃ 孵育4 h，15 min更换Krebs液，形成Mor依赖回肠标本. 将各回肠段悬挂于恒温平滑肌槽内含30 mL Krebs液的麦氏浴管中，通入O2及CO2（φ：950 mL・L-1 vs 50 mL・L-1 ），将回肠段下端固定于麦氏浴管底部钩上，上端轻轻地挂在张力换能器的金属片上，通过张力换能器与计算机连接，采用PCLAB生物信号采集系统记录回肠段张力的变化. 水浴温度37.5℃ ，每15 min更换一次Krebs液. 实验开始前，先使回肠标本在1 g静止张力下平衡15 min. 在含Mor依赖回肠标本的浴管中， 加入Nal 1 μmol・L-1， 即引起催促收缩反应. 在加入Nal前、后1 min分别加入剂量0.04，0.2，1.0 g・L-1 QFT或0.3 μmol・L-1 Nim，观察药物对回肠催促戒断收缩的影响；在含正常豚鼠回肠标本的浴管中，加入10 μg・L-1 Ach引起收缩反应，在其加入前、后1 min分别加入剂量0.04，0.2，1.0 g・L-1的QFT或100 mg・L-1的Atr，观察药物对正常回肠Ach引起收缩的影响.
统计学处理： 以PCLAB生物信号采集系统中回肠收缩曲线张力的峰值作为观察指标，实验数据以Ach x±s 表示，应用SPSS 9.0统计软件进行单因素设计的方差分析.
2结果
2.1Mor依赖豚鼠回肠模型的戒断性收缩正常回肠组加入Nal不引起收缩，而Mor依赖回肠组加入Nal催促后，20 s内，即引起戒断性收缩，肠管张力明显增加，该收缩可维持5 min以上，与正常回肠组相比较P&< 0.01，表明模型制作成功（Tab 1）. QFT系列治疗组均抑制Nal的戒断性收缩，使Nal引起的收缩张力降低，0.2，1.0 g ・L-1的剂量组与Mor依赖组比较P&< 0.01， 0.04 g・L-1的剂量组亦有显著性差异（P&<0.05），说明药物作用呈剂量依赖趋势（Tab 1）；Nim组亦抑制Mor依赖豚鼠回肠的戒断性收缩，与Mor依赖组比较P&<0.01，与文献报道一致［2］.
2.2对Ach引起的正常豚鼠回肠收缩的影响正常回肠组加入Ach即引起收缩，肠管张力明显增加；0.2， 1.0 g・L-1的QFT剂量组及Atr对照组均抑制Ach引起的收缩，与Ach回肠组相比较P&< 0.01， 0.04 g・L-1的剂量组与其比较亦有显著性差异（P&<0.05），说明QTF的作用呈剂量依赖趋势（Tab 2）.
Tab 1Effect of QFT on Nalprecipitated ileum of morphine dependent guinea pig(略)
表2青风藤对乙酸胆碱引起的豚鼠回肠收缩的作用（略）
Tab 2Effect of QFT on Achinduced contracture in isolated guinea pig ileum(略)
3讨论
实验结果表明，QFT和Nim一样，能够对Mor依赖离体豚鼠回肠的催促戒断收缩产生明显的抑制和阻断效应，其剂量越大，抑制效果越明显；QFT能够降低Ach引起回肠收缩幅度，且呈剂量依赖关系. QFT对脑啡呔受体的抑制活性在75%以上，提示QFT可能通过阿片受体治疗Mor戒断症状 . QFT的主要有效成分青藤碱具有抗心律失常的作用，其机制是作用于跨膜离子转运，对Na+，K+，Ca2+的转运均有抑制作用 ，而Ca2+离子在阿片类依赖中的作用受到日益广泛的注意，在钙通道阻滞剂对阿片类戒断症状群的研究中，许多实验证明，钙通道阻滞剂通过中枢和外周两种机制调节外Ca2+ 内流，缓解阿片类依赖戒断症状， 国内外许多学者在离体豚鼠回肠标本上已证实Nim、异博定等钙通道阻滞剂可以阻断Mor戒断所引起的戒断性收缩［2］ ，近年来应用钙拮抗剂治疗阿片类依赖的药理研究报道日益增多［3-6］. 本实验中，QFT对Mor依赖豚鼠回肠戒断收缩的抑制作用，可能与其Ca2+阻滞作用有关. Ach能系统兴奋在Nor戒断反应中所起的作用与去甲肾上腺素能神经元相似，胆碱能受体阻断剂能减轻戒断症状 ，非选择性M受体拮抗剂能阻断Nor依赖大鼠Nai激发的戒断症状［7］. 本实验中，QFT阻断Ach引起的肠管收缩，表明QFT可作用于M胆碱受体，提示该作用可能是QFT治疗Mor戒断的另一作用机制，也为治疗阿片依赖的腹泻症状提供了依据. 总之，中医药戒毒是一种具有中国特色的戒毒方法，具有广泛的发展前景，对戒毒中药单味药的研究，可以帮助寻找快速、低毒、无瘾的中药单体和活性成分，是中医药向现代化发展的要求.
参考文献
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