【关键词】 非小细胞肺癌
关键词: 热休克蛋白;非小细胞肺癌;免疫组织化学
摘 要:目的 探讨热休克蛋白70（HSP70）在非小细胞肺癌（NSCLC）的表达及意义. 方法 采用SABC免疫组织化学方法检测了ⅢA 期NSCLC56例、转移灶及其癌旁组织中HSP70的表达. 结果 HSP70在癌组织中的表达阳性率为87.5%（49/56，腺癌21/27，鳞癌28/29），HSP70在转移癌组织中的表达阳性率为91.1%（51/56），而在癌旁的肺组织HSP70的表达阳性率为10.7%（6/56），癌组织的表达阳性率明显高于癌旁组织（P&<0.01）;癌组织与转移灶的表达阳性率比较无显著性差异（P&>0.05）. 结论 HSP70在NSCLC高表达可能通过细胞的生长调控在肿瘤的发生过程中具有重要作用.
Keywords:heat shock protein;non-small cell lung cancer;immunohistochemistry
Abstract:AIM To study the expression and significance of HSP70in non-small cell lung cancer.METHODS The ex-pression of HSP70among lung cancer，metastasis and para-carcinoma tissues in56patients with non-small cell lung can-cer was examined and compared by using immunohis-tochemical SABC method.RESULTS The positive-staining rates of HSP70in the carcinoma，metastasis and para-carci-noma tissues were87.5%（49/56，adenocarcinoma21/27，squamous carcinoma28/29），91.1%（51/56）and10.7%（6/56），respectively.There was statistical significance between the positive-staining rate in carcinoma and para-carcinoma tis-sues（P&<0.01）;however，no significance was found be-tween that in carcinoma and metastasis tissues（P&>0.05）.CONCLUSION The over-expression of HSP70in non-small cell lung cancer tissues might play an important role in the process of oncogenesis by influencing the cellular growth con-trol.
0 引言
热休克蛋白（heat shock proteins，HSPs）是一类在生物进化过程中极为保守的蛋白质，其广泛存在于原核和真核生物细胞中，当机体受到有害因素（如炎症、紫外线、应急、肿瘤发生等）刺激时，细胞内HSPs合成增加.已有文献报道，在一些恶性肿瘤中热休克蛋白70（HSP70）表达增高，并认为HSP70的表达水平可以作为肿瘤分化程度、临床转归、抗药性［1-3］ 等的判断指标.我们采用SABC免疫组织化学技术检测了56例ⅢA 期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）组织、转移灶及癌旁组织中HSP70的表达，并就其意义进行了初步探讨.
1 材料和方法
1.1 材料 NSCLC患者56（男41，女15）例，来自于2001-01/2001-10唐都医院胸腔外科住院手术ⅢA 期病例;年龄40～75（平均57.4）岁;所有NSCLC、转移灶及癌旁组织（距癌组织至少5cm）的组织标本无溃烂、坏死，均经组织学检查确诊;其中腺癌27例，鳞癌29例;所有病例手术前均未行放疗、化疗.标本经40mL・L-1 甲醛固定，常规石蜡包埋，5μm连续切片.鼠抗人HSP70mAb为美国Santa Cruz公司产品，生物素化羊抗鼠IgG及SABC试剂盒购自华美生物工程公司.
1.2 方法 HSP70免疫组织化学染色程序严格参照SABC试剂盒说明书进行;鼠抗人HSP70mAb、生物素化羊抗鼠IgG及SABC复合物的工作浓度均为1∶100，以正常小鼠血清代替一抗为阴性对照. 1.3 阳性结果判定 染色的切片在光镜下观察HSP70的蛋白表达及分布情况，以出现棕黄色颗粒者为阳性细胞，无可见颗粒或可疑者为阴性.对每张有阳性细胞的切片，在高倍镜下（×400）选择含瘤细胞或癌旁组织细胞的5个视野记数，计算阳性细胞总数的百分率，以阳性率&<10.0%为（+），10.0%～25.0%为（），&>25.0%为（）.
统计学处理:用Stata4.0统计软件包，采用Fisher或精确Fisher分析，P&<0.05表示有显著性差异. 转贴于 2 结果
肺组织经HSP70免疫组织化学染色后，阳性颗粒呈浅棕色到深褐色，HSP70阳性表达产物位于胞质和胞核.在肺癌及转移灶组织中，阳性信号可弥漫分布于癌细胞中，阳性率分别为87.5%（49/56，其中腺癌的阳性率为21/27，鳞癌的阳性率为28/29），91.1%（51/56），两者阳性率比较无显著性差异（P&>0.05）.在癌旁的肺组织中，HSP70阳性信号主要位于肺泡上皮细胞胞质和胞核内，多呈浅棕色，且阳性细胞呈散在分布，其阳性率为10.7%（6/56），与肺癌组织中HSP70表达阳性率比较有显著性差异（P&<0.01，Tab1）.
表1 HSP70在非小细胞肺癌、癌旁组织及转移灶中的表达 略
3 讨论
HSPs与细胞的转化和恶变过程密切相关.HSP70具有“分子伴侣”功能，通常与具有不同功能的多种蛋白质在细胞内形成复合体，并通过复合体的形成或解离参与相关蛋白质的折叠、亚基的形成、细胞内运输及蛋白降解等过程，以调节靶蛋白的组成，但不参与靶蛋白的组成［4］ .本研究发现HSP70在NSCLC组织中的表达明显高于其癌旁的正常肺组 织，与文献有关HSP70在乳腺癌［5］ 、胰腺癌［6］ 、喉癌［7］ 、胃癌［8］ 等组织高表达的报道相一致.NSCLC中HSP70呈高表达，可能与肿瘤细胞生长活跃，蛋白质合成增加，需要HSP70作为“分子伴侣”来调节和稳定这一增殖过程有关.魏于全等［9］ 等利用反义技术特异地抑制了HSP70基因表达，发现肿瘤细胞不但出现增殖抑制，同时出现凋亡，说明HSP70在肿瘤细胞生长过程中发挥重要作用.
有关HSP70在肿瘤的发生、发展过程中的确切作用机制尚不清楚，有报道HSP70可与p53，prb110［10，11］ 抑癌基因结合，并影响其调控细胞增生的重要功能.HSP70还可调节一些原癌基因、转化生长因子β基因的表达，抑制细胞生长调控相关基因的转录，从而影响细胞的生长、分化及癌变过程.另一方面，作为一种细胞保护机制，HSP70在癌细胞中的高表达还可能有利于细胞抵抗抗癌细胞因子如TNF-α，IL-1等的攻击，使之免于机体免疫功能的杀伤.
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