关键词: 急性肺损伤;乙酰半胱氨酸
摘 要:目的 观察乙酰半胱氨酸对急性肺损伤的防治作用. 方法 大耳白兔24只，随机分为对照组（n=8），致伤组（n=8），乙酰半胱氨酸治疗组（n=8）.致伤组经颈静脉注入脂多糖（LPS，1mL・kg-1 ）;对照组经颈静脉注入生理盐水（1mL・kg-1 ）;治疗组经颈静脉在注入脂多糖（LPS，1mL・kg-1 ）前2min，经颈静脉注入乙酰半胱氨酸（300mg・kg-1 ）.测定各组肺动脉压、动脉血氧分压、外周血白细胞计数、肺泡灌洗液NO2- 浓度、肺系数（肺湿质量/体质量）及肺湿/干比. 结果 治疗组肺动脉压及NO2- 浓度与致伤组有显著差别（P&<0.01），氧分压较致伤组明显改善（P&<0.01），肺系数和肺湿/干比显著低于致伤组（P&<0.01），外周血白细胞高于致伤组（P&<0.01）. 结论 乙酰半胱氨酸对急性肺损伤有一定的防治作用.
Keywords:acute lung injury;N-acetyl-L-cysteine
Abstract:AIM To observe the preventive effect of N-acetyl-L-cysteine against acute lung injury.METHODS 24New Zealand rabbits were randomly pided into three groups:control group（n=8），injury group（n=8），treat-ment group（n=8）.The injury group were endotoxin（1mL・kg-1 ）;the control group were given injection of normal saline（1mL・kg-1 ），and the treatment group were given N-acetyl-L-cysteine（300mg・kg-1 ）2minutes before the injec-tion of endotoxin（1mL・kg-1 ）.Arterial oxygen pressure（PaO2 ），pulmonary arterial pressure，the count of peripher-al-blood leukocytes，the NO2- concentration in the BALF，lung index（wet weight/body weight），lung’s wet/dry weight ratio（W/D）were observed.RESULTS The pul-monary arterial pressure and NO2- concentration of the treat-ment group had significant difference with the injury group（P&<0.01），PaO2 of the treatment group significantly im-proved（P&<0.01）.The lung index and W/D ratio of the treatment group were significantly lower than those of the in-jury group（P&<0.01），and the count of peripheral-blood leukocytes of the treatment group was higher than that of the injury group（P&<0.01）.CONCLUSION N-acetyl-L-cys-teine has preventive effect against acute lung injury.
0 引言
急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）发病机制错综复杂，急性肺损伤是其基础病变，迄今对其发病机制尚未完全阐明.研究表明炎症反应起关键作用，许多炎症介质如IL-8［1］ ，NF-Kβ［2，3］ 等参与其中.目前认为氧自由基［4］ 及氧化-抗氧化失衡［5］ 在ARDS发病中起重要作用.乙酰半胱氨酸是一种有效的抗氧化剂，能对抗氧自由基造成的肺微血管通透性增加.我们采用内毒素致兔急性肺损伤模型，观察乙酰半胱氨酸对急性肺损伤的影响.
1 材料和方法
1.1 材料 大耳白兔24只（购自第四军医大学实验动物中心），雌雄不拘，体质量2～3kg.LPS O5 B55 （脂多糖，购于Sigma公司，配成1g・L-1 等渗液）XD-30C多道生理记录仪，752C紫外可见分光光度计（均由本校病理生理学教研室提供），GRIESS试剂盒（购于北京东亚试剂公司），乙酰半胱氨酸（购于上海博奥生化公司，配成300g・L-1 等渗液）.
1.2 方法
1.2.1 动物模型 将动物随机分为对照组（n=8），致伤组（n=8）和乙酰半胱氨酸治疗组（n=8）.对照组兔颈静脉插管注入生理盐水（1mL・kg-1 ），致伤组兔颈静脉插管注入脂多糖（LPS O5 B55 1mL・kg-1 ）.治疗组兔颈静脉插管注入乙酰半胱氨酸（1mL・kg-1 ），2min后经颈静脉注入LPS O5 B55 ，1mL・kg-1 .
1.2.2 检测方法 ①肺动脉压的测定:参照Sun等［6］ 方法，实验动物用乌拉坦（1.0g・kg-1 ）耳缘静脉注入麻醉后固定于手术台，作颈正中切开，在多导生理记录仪监视下，经右颈外静脉作肺动脉插管，记录肺动脉压.②血样收集:经左颈外静脉插管，分别在对照组注入生理盐水，致伤组及治疗组注入脂多糖后于0，30，60，90和120min5个时间点经左颈动脉抽动脉血进行血气及外周血白细胞计数.③支气管肺泡灌洗:动物于130min时间点放血活杀，取肺称全肺湿质量，取左肺称湿质量，之后经支气管注入生理盐水9mL・kg-1 ，反复灌洗3次，每次冲洗3遍.灌洗液于4000r・min-1 离心5min，取上清液，采用GRIESS法测灌洗液中NO2- 浓度.左湿肺于60℃下烘烤72h后称干质量［7］ .分别计算湿/干比，肺系数（肺湿质量/体质量）.
统计学处理:数据用x ±s表示，组间比较采用t检验，以P&<0.05为差异显著.
2 结果
2.1 肺动脉压变化 致伤组脂多糖注入后30min，兔的肺动脉压明显升高，于致伤后60～120min间保持在较高水平，与正常对照组差别显著，治疗组肺动脉压高于正常对照组，但仍显著低与致伤组，与致伤组差别显著（Tab1）.
2.2 外周血白细胞计数 致伤组外周血白细胞显著降低，与正常对照组差别显著，治疗组外周血白细胞较致伤组高，但较正常对照组低，组间存在显著差别（Tab1）.
表1 不同时间点各组肺动脉压值、外周血白细胞计数值 略
2.3 动脉血氧分压 致伤组于注入脂多糖30min后PaO2 明显下降，致伤后30～120min间保持在较低水平与正常对照组差别显著，治疗组氧分压随时间推移而降低，但总体保持较高水平（Tab2）.
表2 不同时间点各组动脉血氧分压 略
2.4 NO2- 浓度 正常对照组NO2- 浓度低于致伤组，有显著差别.治疗组与致伤组亦有差别（Tab3）. 2.5 肺系数及湿/干变化 致伤组肺系数及湿/干比较对照组显著升高，治疗组肺系数及湿/干比较致伤组降低，差别显著（Tab3）. 3 讨论
ARDS发病机制错综复杂，迄今尚未完全阐明.研究证明ARDS是由多种致病因子启动，各种炎症细胞和细胞因子参与相互作用，促进病程发展，最终导致以肺为主要靶器官伴有多脏器损伤的炎症性疾病.炎症细胞中多核白细胞（PMN）是参与机体反应的主要细胞［8］ .PMN在肺微血管内聚集，继之与血管内皮细胞黏附，释放炎症介质，包括氧自由基，损伤肺泡毛细血管膜，导致通透性肺水肿，是急性肺损伤发病的重要因素.Tagan等［9］ 报道多种氧自由基均在ARDS病理过程中起重要作用.
表3 BALF中NO2- 浓度、肺系数及湿/干比 略
在诸多的抗氧化剂中，N-乙酰半胱氨酸是一种较为有效的药物.Ruffmann等［10］ 认为N-乙酰半胱氨酸可以补充还原性谷苷胱肽的数量，对抗氧自由基的损伤.Marui等［11］ 研究发现N-乙酰半胱氨酸可以抑制活性氧引起的ICAM-I及VCAM-I过度表达，减轻肺损伤.本实验中，治疗组动物动脉血氧分压较损伤组明显改善，治疗组兔的肺系数、湿/干比降低，均与致伤组差别显著，证明乙酰半胱氨酸能有效降低肺组织血管通透性，对急性肺损伤有一定的防治作用.已经证实NO为内皮源性舒张因子的主要活性成分.具有舒张血管作用.致伤组中NO2- 浓度较正常对照组显著增高，可能为机体在急性肺损伤的致病过程中调节保护作用.治疗组的NO2- 浓度较损伤组明显降低，表明乙酰半胱氨酸可能通过还原作用而使NO生成减少.致伤组中兔肺动脉压较正常对照组明显升高，乙酰半胱氨酸治疗组肺动脉压虽有增高但与致伤组差别显著，表明乙酰半胱氨酸在急性肺损伤的治疗中可以降低肺动脉压.致伤组动物外周血白细胞计数明显降低，治疗组外周血白细胞计数下降较致伤组轻但与正常对照组差别不显著，表明乙酰半胱 氨酸对外周血白细胞还有一定影响.
参考文献
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