类风湿关节炎患者血清结缔组织生长因子水平及与间质性肺疾病的关系

【摘要】 目的: 研究类风湿关节炎(RA)患者血清中结缔组织生长因子（CTGF)的水平与间质性肺疾病(ILD)的关系， 探讨RA发病机制及RA继发性ILD相关因素。方法: 选择我院2007-05/2007-09风湿免疫科收治的RA患者53例， 其中RA伴ILD患者 19例， 单纯RA患者34例; 正常人健康对照20例， RA诊断标准按照1987年美国风湿病学会（ARA）提出的RA分类标准， ILD诊断标准按照2002年中华医学会呼吸病学分会制定的特发性肺纤维化（IPF）非外科肺活检诊断标准。用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测3组血清中CTGF水平， 应用SPSS13.0统计软件分析检测结果。结果: RA伴ILD的患者血清中CTGF水平明显升高， 与单纯RA组比较差异有统计学意义(P&<0.05); 两组分别与健康对照组比较血清中CTGF水平明显升高， 差异均有统计学意义（P&<0.05）。结论: CTGF可能参与了RA发病， 同时与RA继发ILD密切相关。

【关键词】 类风湿关节炎; 间质肺疾病; 结缔组织生长因子

　　类风湿关节炎(rheumatoid arthritis， RA)是一种累及周围关节为主的多系统性炎症性的自身免疫病。病因、 发病机制尚不清楚， 但目前研究表明多种细胞因子参与了RA的发病。结缔组织生长因子(connective tissue growth factor， CTGF)是新近发现的一种早期即刻基因家族成员， 可促进细胞增殖及细胞外基质（extracellullar matrix， ECM）沉积， 参与多种纤维化疾病的发生与发展［1］。间质性肺疾病（interstitial lung disease， ILD）是RA最常见关节外表现之一， 且随着RA病程延长肺受累的机会增大［2］。我们通过检测RA患者血清中CTGF的表达水平， 探讨CTGF在RA发病中的作用， 同时研究RA继发性ILD与CTGF的关系， 阐明RA发病机制及RA继发 ILD的相关因素。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料 ELISA试剂盒购自美国ADL (Adlitteram Diagnostic Laboratories)公司， 患者均来自我院2007-05/2007-09风湿免疫科收治的RA患者53例， 其中男10例， 女43例， 年龄25～65岁， 平均年龄(51±10)岁。同时按是否存在ILD， 将患者分为2组， 单纯RA组34例， 其中男6例， 女28例， 年龄26～64岁， 平均年龄（50±10）岁; RA继发ILD组19例， 其中男4例， 女15例， 年龄25～65岁， 平均年龄（52±10）岁; 健康对照组， 来自于健康自愿者， 男5例， 女15例， 年龄26～59岁， 平均年龄（47±6）岁。RA诊断标准按照1987年美国风湿病学会（ARA）提出的类风湿关节炎分类标准［3］， ILD诊断标准按照2002年中华医学会呼吸病学分会制定的特发性肺纤维化（idipathic pulmonary fibrosis， IPF）非外科肺活检诊断标准［4］， 同时所有患者均排除糖尿病、 高血压、 脂肪肝等疾病。

　　1.2 方法

　　1.2.1 标本采集 清晨空腹抽肘正中静脉血3 mL， 在4℃下离心（15 000 r/min）10 min后， 分离血清， 于-70℃保存待测。人CTGF测定按照ELISA试剂盒使用说明书操作方法， 根据吸光度A值及标准曲线得出相应的CTGF含量（mg/L）。

　　1.2.2 统计学分析 应用SPSS13.0统计软件， 采用t检验方法分别对各组CTGF值进行分析。

　　2 结果

　　2.1 CTGF在RA患者血清中的水平 CTGF在RA患者血清中的水平为（2.22±0.32）μg/L， 健康对照组为（1.16±0.42）μg/L， RA组较对照组CTGF的表达水平明显升高， 差异有统计学意义（P&<0.01）。

　　2.2 RA+ILD组和RA组患者血清中CT GF水平比较 RA+ILD组患者血清中CT GF水平为（2.74±0.54）μg/L， 单纯RA组患者血清中CTGF水平为（1.93±0.42）μg/L， 健康对照组为（1.16±0.42）μg/L， RA继发ILD组患者血清中CTGF表达水平较单纯RA组明显升高（P&<0.05）。单纯RA组患者血清中CTGF表达水平较对照组也有升高（P&<0.05）。RA继发ILD组患者血清中的CTGF表达水平较对照组升高更明显（P&<0.01）。

　　2.3 RA＋ILD组与单纯RA组免疫学指标比较 RA+ILD组IgG (19.88±3.79) g/L、 IgA(4.46±0.82) g/L、 IgM(1.60±0.33) g/L、 α2球蛋白（11.69±1.25）％、 γ球蛋白（32.5±3.16）％， RA组IgG (17.63±3.73) g/L、 IgA(3.62±0.54) g/L、 IgM(1.59±0.34) g/L、 α2球蛋白（11.84±0.92％、 γ球蛋白（25.78±2.63）％。RA+ILD组IgG， IgA， IgM值与RA组比较均有明显升高， 但差异无统计学意义（P&>0.05）; RA+ILD组γ球蛋白水平明显高于单纯RA组（P&<0.01）; 两组α2球蛋白水平比较， 差异无统计学意义。

　　2.4 RA＋ILD组与RA组类风湿因子、 血沉及关节肿痛数的比较 RA+ILD组类风湿因子、 血沉及关节肿痛数分别为（231.94±116.04）U/mL、 （68.00±20.58）mm、 (5.43±1.52)个， 单纯RA组类风湿因子、 血沉及关节肿痛数分别为（298.77±35.63）U/mL、 （58.96±32.57）mm、 (5.01±1.32)个。RA＋ILD组与单纯RA组比较血沉明显升高， 差异有统计学意义（P&<0.01）， 并且两组的血沉均高于正常; 两组关节肿痛数的比较， 差异无统计学意义; 两组类风湿因子水平的比较， 差异无统计学意义。

　　3 讨论

　　CTGF是一种新发现的促成纤维细胞分裂和胶原沉积的生长因子， 是即刻早期基因CCN（CTGF， Cyr61， nov）家族成员之一［5］。是Bradham等在1991年首次在人的脐静脉内皮细胞条件培养基中发现的细胞因子。CTGF与纤维化疾病密切相关［6， 7］。在ILD中无论在肺泡灌洗液中还是在血清中或在试验动物肺组织中CTGFmRNA的表达都均有升高［8， 9］。RA是最常见的结缔组织病之一， 它是一种原因不明的以关节滑膜炎为特征的慢性全身性免疫性疾病， 该病在我国人口的患病率高达0.36%左右， 是造成我国人群丧失劳动力的主要疾病之一［10］。RA也是最常见累及肺的结缔组织病， 根据胸部X线和肺功能等检查， 肺部受累的发生率为50%。有文献报道， 5%～40%的ILD与RA有关， ILD是RA患者死亡的主要原因之一［11］。CTGF在RA的表达如何？与RA继发ILD有何关系尚无报道。在我们实验中分析了单纯RA与RA继发ILD组血清CTGF表达水平， 发现单纯RA与RA继发ILD组的CTGF表达水平明显高于正常对照组， 差异有统计学意义(P&<0.05)， 并且RA+ILD组患者血清中CTGF表达水平较单纯RA组明显升高， 差异有统计学意义（P&<0.05）。说明CTGF可能与RA的发病及与RA继发ILD密切相关。

　　本实验还发现， RA继发ILD组γ球蛋白的表达水平较高， 与单纯RA组比较差异有统计学意义（P&<0.01）; α2球蛋白水平比较， 两组差异无统计学意义; RA继发ILD组IgG、 IgA、 IgM均值较RA组均有升高， 但差异没有统计学意义。α2球蛋白水平与疾病活动有关， 在RA早期升高， 缓解期恢复正常; γ球蛋白主要含有IgG及少量的IgM、 IgA等， 是由于RA自身抗体产生过多所致， γ球蛋白增高与RA临床症状及X线、 病理变化相平行。 ILD 是RA最常见关节外表现之一， 且随着RA病程延长肺受累的机会增大［2］， 这与我们实验结果是一致的， 提示ILD发生很可能是因为免疫系统异常， 通过免疫球蛋白介导完成的。本实验还分析了关节肿痛数与ILD的关系， 发现RA继发ILD组关节肿痛数较单纯RA组有增加， 但差异没有统计学意义， RA继发ILD组血沉较单纯RA组明显升高， 差异有统计学意义（P&<0.01）， 提示ILD的发生可能与RA的病情严重程度、 疾病活动度相关， 具体机制有待进一步研究。

　　虽然人们对RA已进行了长期深入的研究， 但其病因和发病机制仍未明了， 目前除抗炎及改善病情治疗外还没有有效的治疗方法， 针对RA发病机制设计的免疫和生物治疗的研究是国内外学者普遍关注的问题。有研究表明［12］CTGF反义寡核苷酸可以起到对人肺成纤维细胞的抗增殖作用， 说明拮抗CTGF可以用于治疗ILD， 拮抗CTGF可能会对RA和RA继发ILD的治疗有所帮助， 为研究RA继发ILD的治疗和预防提供一条新的途径。

参考文献

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