【关键词】柔红霉素;脂质体;冰冻熔融法
1材料和方法
1.1材料ZFQ85A旋转蒸发仪（上海医械专机厂）；SHZ型循环水真空泵（河南巩义英峪仪器厂）；电热恒温水浴锅（江苏东台电器厂）；752C型可见紫外分光光度计（上海第三分析仪器厂）；AE240电子天平（瑞士METTLER）；SB3200水浴式超声仪（上海必能信超声有限公司）；柔红霉素（daunorubicine， DNR 意大利爱宝药厂）；注射用蛋黄卵磷脂（Phosphatidylcholine， PC 上海太伟药业有限公司）；胆固醇（Cholesterol， CH美国Sigma公司）；SephadexG50（瑞典）；其余试剂均为分析纯.
1．2方法脂质体的制备：DNR用2 mmol/L磷酸盐缓冲液（PBS pH 7.4）溶解. 应用改良冻融法［1］制备柔红霉素脂质体（liposome encapsulated daunorubicine， LDNR）： 取适量PC及CH溶于三氯甲烷后通过氮气冷风吹干成膜，加入所需浓度的DNR溶液，浸泡数小时后用超声粉碎机超声震荡5 min，得到初制脂质体混悬液，将上述混悬液分装于5 mL试管中置于-15℃低温冰箱快速冷冻并维持24 h，取出后室温下快速冻融并用螺旋混合器震荡20 min，得最终所需脂质体混悬液. 用SephadexG50葡聚糖凝胶层析分离游离药物. 测定DNR浓度，用标准溶液制定标准曲线. 计算包封率按公式：包封率＝（1-Cf/Ct）×100％（注： Cf为游离药物浓度，Ct为脂质体包裹的总药物浓度）.
2结果
DNR曲线吸收峰在波长481 nm为最高，测定此波长A值，并将结果回归. 药物在此波长处的A值与药物浓度C（mg/L）的回归方程： A＝0.036＋0.049C （r＝0.9996），线性范围：2.52～15.17 mg/L. 经前期单因素实验预试，确定了正交实验的因素和水平数： 按L9（34）正交实验表进行正交实验［2-3］，以药物的包封率为评价指标.
影响药物包封率的各影响因素的重要性依次递减为：水合介质的种类（因素D）&>冷冻温度（因素C）&>PC与药物的比例（因素A）&>PC与CH的比例（因素B），各因素的组合以A3B2C1D3为最佳，即PC与药物的质量比为30∶1，PC与CH的质量比为5∶1，冷冻温度为-15℃，水合介质为pH 7.4 PBS，可制得具有高包封率的脂质体. 按优选处方，制备3批脂质体，DNR包封率分别为78.84%， 76.31%和75.22%.
3讨论
本实验采用高纯度PC和CH为包封材料，采用冰冻熔融法制得LDNR，方法简单、可行［1-3］. 通过预试验和正交试验，确定冰冻熔融法制备LDNR制备的最优组合PC与药物的质量比为30∶1，PC与CH的质量比为5∶1，冷冻温度为-15℃，水合介质为pH 7.4 PBS，所得LDNR的包封率&>70%.
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参考文献
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［2］ 吴骏，朱家壁. 阿昔洛韦脂质体的制备和稳定性的初步考察［J］. 药学学报，2003，38(7):552-554.
［3］ 陈荣义，张新申，谢 君. 茶多酚脂质体制备的研究［J］. 中草药，2005，36(6):856-857.