作者：甘洪全 熊晓云 梅其炳 贾秋玲
【关键词】 苯并二氢吡喃腙
关键词: 苯并二氢吡喃腙;主动脉;大鼠
摘 要:目的 观察苯并二氢吡喃腙衍生物对离体大鼠主动脉环的作用. 方法 取SD大鼠胸主动脉环，采用离体血管张力实验法，用高钾引起血管收缩，药物孵育在前，溶剂对照在后，观察上述化合物对血管环张力的影响. 结果 以溶剂对照在K+ 为80mmol・L-1 时的最大收缩幅度为100%，其余取其收缩幅度相对值.XY9902（1μmol・L-1 ）在K+ 为65mmol・L-1 时收缩幅度相对值明显低于对照（47.9±13.2vs76.4±15.3，P&<0.01），有拮抗作用;XY9905（1μmol・L-1 ）在K+ 为65mmol・L-1 时收缩幅度相对值明显低于对照（37.8±19.4vs66.8±19.9，P&<0.01），有拮抗作用，XY9901没有拮抗作用. 结论 苯并二氢吡喃腙衍生物XY9902、XY9905对离体大鼠主动脉环有舒张作用.
Keywords:2，3-2H-7-methoxy-4H-1-benzopyran-4-hydrazone（MBH）;aorta;rats
Abstract:AIM To study the effect of2，3-2H-7-methoxy-4H-1-benzopyran-4-hydrazone（MBH）derivatives on rat tho-racic aorta rings in vitro.METHODS By isolated vascular methods，rings of thoracic aorta from SD rats with contrac-tion by high-K+ were used to study the dilating effect of MBH derivatives，whose rings were incubated with the com-pound and then contrasted with DMSO solvent.RESULTS Data were expressed as100%contraction of rings induce by K+ （80mmol・L-1 ）exposed to DMSO solvent（mean±SEM）.The difference in contraction in rings exposed to XY9902（1μmol・L-1 ）and DMSO solvent was significant（47.9±13.2vs76.4±15.3，P&<0.01）for rings contracted by K+ （65mmol・L-1 ），which indicated antagonism of the compound XY9902.The same was true to the rings exposed to XY9905（1μmol・L-1 ）（37.8±19.4vs66.8±19.9，P&<0.01），which indicated antagonism of the compound XY9905.XY9901did not show antagonism.CONCLUSION These data demonstrated that MBH derivatives XY9902and XY9905had vascular relaxation effect on rat aorta rings in vitro.
0 引言
目前临床上治疗绝经后骨质疏松症的主要手段是雌激素替代疗法（hormone replacement therapy，HRT），但长期应用会增加发生子宫内膜癌和乳腺癌的危险性［1，2］ .20世纪90年代上市的抗骨质疏松药异丙氧基异黄酮（ipriflvone）和雷诺昔芬（raloxifene），在一定程度上降低了雌性激素样活性和致癌危险性［3］ .雷洛昔芬对绝经后骨质疏松症具有很强的防治效应，但能否降低绝经后心血管疾病（如冠心病）的发病率尚无定论，而异丙氧基异黄酮具有很强的心血管保护作用［4，5］ .我们分析异丙氧基异黄酮和雷诺昔芬的药物结构，注意到具有很强的血管扩张作用的苯并吡喃类钾通道开放剂（如cro-makalim）［6］ ，认为苯并杂环可能是异黄酮类化合物对心血管系统有保护作用的基团，故合成一系列苯并二氢吡喃腙衍生物，希望能保留异丙氧基异黄酮和雷诺昔芬的优点，副作用更少.本文旨在考察此类化合物的血管松弛作用.
1 材料和方法
1.1 材料 SD大鼠36只，体质量（300±50）g.雌雄兼用，由第四军医大学实验动物中心提供.药物为XY9901，XY9902，XY9905，本室自行合成，结构均经波谱鉴定（Fig1）.实验时称取适量溶于50μL二甲亚砜中，加蒸馏水至2mL，配制成1.5mmol・L-1 ，稀释至0.15mmol・L-1 .浓KCl液为4.5mol・L-1 .Krebs-Henseleit（KH）液组成:NaCl114.3，KCl4.6，CaCl2 2.4，NaHCO3 12.5，MgSO4 1.2，Gs5.6（mmol・L-1 ）.盐类和二甲亚砜系市售分析纯.
图1 略
1.2 方法 处死大鼠，迅速摘取胸主动脉，在冰冷的饱和氧KH氏液中，小心制备2～3mm宽血管环，悬挂于盛有15mLKH液的离体器官浴槽中，持续通入950mL・L-1 O2 +5mL・L-1 CO2 ，pH7.2～7.3，37℃，静息负荷1g，平衡2h，中途换液3次.血管环收缩通过换能器记录于XWT-464型台式自动平衡记录仪.在KCl收缩实验中，随KCl的增加相应减少NaCl的含量，用累积浓度法制作KCl的量效曲线［7］ .给药组先于KH液中分别加入不同浓度的XY9901，XY9902，XY9905孵育1h，再进行实验，同时进行溶剂对照.
统计学处理:所有数据均以x ±sx 表示，以溶剂对照在K+ 为80mmol・L-1 时的最大收缩幅度为100%，其余取其收缩幅度的相对值.结果进行析因分析，与对应的溶剂对照比较，组间P≤0.05为有显著差异.
2 结果
对KCl诱发的动脉环收缩，XY9902，XY9905浓度为1μmol・L-1 时，动脉环的收缩幅度相对值明显低于对照，XY9901则相反;3药浓度为10μmol・L-1 时，XY9901，XY9902与对照无显著差异，XY9905有显著差异（Tab1-3）.
表2 XY9902对KCl诱发主动脉收缩的影响 略
3 讨论
实验结果显示，在1μmol・L-1 水平上，XY9902，XY9905对KCl诱发的动脉环收缩有拮抗作用，XY9901没有拮抗作用.从结构方面分析，这是因为药物侧链结构不同.文献报道苯并杂环连接的碱性侧链为活性必需基团［8］ ，观察这3种药物我们可以看到，XY9902侧链的碱性最强、XY9905侧链的碱性次之，XY9901侧链的碱性最弱，这与实验结果一致.其他实验结果证实，XY9902促内皮细胞增殖，也促成骨细胞增殖［9］ ，且其中间体能增加骨密度［10，11］ ，初步证明我们的设计思想是可行的，化合物抗骨质疏松和防治心血管疾病的前景良好.在浓度为10μmol・L-1 时，3种药对KCl诱发的动脉环收缩没有拮抗作用，可能因浓度过高，作用发生了变化.实验观察，药物为1μmol・L-1 时，促内皮细胞增殖，10μmol・L-1 时则抑制细胞内皮增殖.XY9905为10μmol・L-1 与溶剂对照组有统计学差异，但受个体差异影响难以肯定它此时有收缩血管的作用.
表3 XY9905对KCl诱发主动脉收缩的影响 略
雷诺昔芬的舒血管作用通过两种途径:①通过内皮，其机制是与ER结合，NO合成和释放增加，舒张平滑肌，起作用较慢，数十分钟至数小时，维持时间较长;②不通过内皮，可能是直接产生钙拮抗剂样作用，起效很快［9］ .XY9902，XY9905起效时间和维持时间、对内皮细胞和成骨细胞的作用，提示可能与激动ER有关，这有待进一步的研究.
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