作者：张鹏，朱运龙，王跃民，李明哲，毕辉，裴建明
【关键词】 心肌再灌注
【Abstract】 AIM: To investigate the effects of U50488H (a selective кopioid receptor agonist) on ventricular arrhythmias induced by myocardial ischemia and reperfusion in rats. METHODS: Rats were randomly pided into four groups， i.e.， control group， ischemia/reperfusion group (Ⅰ/R)， U50488H group and U50488H+Ⅰ/R group respectively. Heart rate (HR)， arterial blood pressure (ABP)， left ventricular pressure (LVP)， contractive function (+dp/dtmax) and diastolic function (-dp/dtmax) were examined in rats. The incidence of ventricular arrhythmias and arrhythmia score were also determined. RESULTS: ① HR， ABP， LVP and ±dp/dtmax in rats decreased with the administration of U50488H; ② intravenous injection of U50488H before Ⅰ/R lowered the incidence of ventricular arrhythmias and arrhythmia score (P&<0.05). The effect of U50488H was abolished in the presence of NorBNI， a selective κopioid receptor antagonist. CONCLUSION: κopioid receptor stimulation by U50488H alters the cardiac rhythm and reduces the occurrence of ventricular arrhythmia induced by myocardial ischemia and reperfusion.
【Keywords】 U50488H; receptors， opioid， kappa; myocardial reperfusion; arrhythmia
【摘要】 目的： 研究选择性к阿片受体激动剂U50488H对大鼠心肌缺血再灌注室性心律失常的影响. 方法： 将实验大鼠按随机原则分为4组，即对照组（Control）、缺血再灌注组（Ⅰ/R）、U50488H组和U50488H+Ⅰ/R组，监测大鼠心率（HR）、动脉压（ABP）、左心室内压（LVP）及收缩（+dp/dtmax）和舒张功能（-dp/dtmax）等血流动力学指标，并观察室性心律失常的发生情况. 结果： ① U50488H可显著降低大鼠HR，ABP，LVP及±dp/dtmax；② 在心肌缺血前预先给予U50488H，可明显降低大鼠心肌缺血再灌注室性心律失常的发生率以及室性心律失常评分，该作用可被选择性к阿片受体阻断剂NorBNI阻断. 结论： U50488H可改变心脏节律，并通过激动心脏к阿片受体减少大鼠心肌缺血再灌注室性心律失常的发生.
【关键词】 U50488H；受体，阿片样，к；心肌再灌注；心律失常
0引言
既往研究表明激活阿片受体具有致心律失常作用，然而近年来的研究结果提示激活阿片受体的致心律失常作用系大剂量应用阿片肽所产生的药物副反应，而不是由阿片受体介导的. 现已证实激活阿片受体对心脏功能具有明显的调节作用，而且在心肌缺血时内源性阿片肽的释放明显增多，提示心脏可通过阿片受体以自分泌或旁分泌阿片肽的方式调节心脏自身功能. 与心脏功能密切相关的阿片受体可分为к， μ， δ3种亚型，其中占主导地位的是к阿片受体［1，2］. μ， δ阿片受体在心肌缺血再灌注过程中发挥着十分重要的作用，在心肌缺血前预先给予μ， δ阿片受体激动剂可以减少缺血再灌注心肌梗死的面积，或减少缺血再灌注室性心律失常的发生［2-4］ ，然而对к阿片受体在心肌缺血再灌注过程中的作用却报道较少. 我们采用选择性к阿片受体激动剂U50488H对在体大鼠进行了研究，以观察к阿片受体在心肌缺血再灌注室性心律失常发生过程中的作用.
1材料和方法
1.1材料
RM6280智能多道生理记录仪及分析处理软件（成都仪器厂），微型动物呼吸机（第二军医大学仪器厂）. 试剂： U50488H（trans3，4dichloroN［2(1 pyrrolidinyl) cyclohexyl］ benzeacetamidel）和NorBNI（Norbinaltorphimine）购自Sigma公司. 实验动物： 健康雄性SD大鼠32只，体质量250～350 g，第四军医大学实验动物中心提供.
1.2方法
1.2.1模型建立用30 g/L戊巴比妥钠麻醉大鼠（1.5 mL/kg， ip），常规记录肢体Ⅱ导联心电图，气管插管，微型动物呼吸机给予正压人工呼吸. 分离大鼠右侧股动脉，行股动脉插管，记录股动脉压. 分离左侧颈静脉及右侧颈动脉，经左侧颈静脉插管，建立给药途径；经颈动脉行左心室插管，记录大鼠左心室内压（LVP）及收缩、舒张功能，以上压力信号均输入多道生理记录仪进行同步连续记录. 而后于大鼠胸骨左缘第4～5肋间开胸，暴露心脏，剪开心包膜，在冠状动脉左前降支（LAD）距左心耳下缘约2 mm处穿线（5/0丝线），以备结扎，再用直径约0.2 cm细塑料管穿过结扎线，稳定15 min后再进行下一步实验. 心肌缺血时用止血钳夹紧结扎线，再灌注时只需将结扎线松开即可. 以心电图ST段明显抬高、结扎线以下心肌颜色变苍白、左心室内压迅速下降作为心肌缺血标志［5，6］.
1.2.2动物分组将所有大鼠编号，随机分成4组，每组8只. ① 对照组（Control），未结扎LAD，仅在观察时间内记录上述指标；② 缺血再灌注组（Ⅰ/R），结扎LAD，给予心肌缺血15 min，并再灌注15 min，余同①； ③ U50488H组，操作完毕后立即给予U50488H (1.5 mg/kg)，未结扎LAD，余同①；④ U50488H+Ⅰ/R组，在给予U50488H，15 min后结扎LAD，心肌缺血15 min，再灌注15 min，余同①.
1.2.3心律失常评分标准按照Lambeth会议标准，评分参考文献［7］. ① 0分，无心律失常；② 1分，偶发性室性早搏（1 min内发生3次以下的室性早搏）；③ 2分，频发性室性早搏（1 min内发生3次或3次以上的室性早搏）；④ 3分，偶发性室性心动过速（1 min内发生3次以下的室性心动过速）；⑤ 4分，频发性室性心动过速（1 min内发生3次或3次以上的室性心动过速）或偶发性室颤（1 min内发生3次以下的室颤）；⑥ 5分，频发性室颤（1 min内发生3次或3次以上的室颤）或死亡.
统计学处理： 采用SPSS统计软件包，实验数据以 x±s表示，组间均数比较采用方差分析，两组间比较采用Dunnettt检验，P&<0.05表示统计学上有显著性差异.
2结果
2.1U50488H对大鼠血流动力学指标的影响与对照组相比，Ⅰ/R组大鼠在心肌缺血时心率无明显变化，动脉压、左心室内压以及收缩、舒张功能明显下降(P&<0.01)；在再灌注期间，上述指标可逐渐恢复，但仍未能达到心脏缺血前水平. U50488H组大鼠在给予U50488H后，出现心率（HR）减慢，动脉压（ABP）、左心室内压（LVP）及收缩和舒张功能下降(P&<0.01). U50488H+Ⅰ/R组大鼠在给予U50488H后，出现心率变慢，动脉压、左心室内压及收缩和舒张功能下降(P&<0.01)，15 min后心肌缺血时，大鼠动脉压、左心室内压以及心脏收缩和舒张功能虽继续下降，但较缺血前差异不显著 (P&>0.05)，再灌注时大鼠动脉压、左心室内压以及心脏收缩和舒张功能无明显回升(Tab 1). 表1不同组别大鼠血流动力学指标的变化（略）
2.2心律失常的发生情况及评分对照组和U50488H组大鼠在观察期间内仅偶尔出现室性早搏，未发生室性心动过速和室颤. Ⅰ/R组大鼠在心肌缺血时，心电图ST段明显抬高，可出现室性早搏、室性心动过速和室颤等心律失常；在再灌注即刻，又出现较为严重的室性心动过速和室颤，此后随着再灌注时间的延长，大鼠心电图ST段明显恢复，心肌缺血改善，心律失常的发生减少. U50488H+Ⅰ/R组大鼠在心肌缺血再灌注期间，也可出现室性早搏、室性心动过速和室颤等心律失常，不过其持续时间明显缩短，发生率亦有所降低(Fig 1， Tab 2). 表2不同组别大鼠室性心律失常的发生情况及评分（略）
3讨论
我们观察到选择性к阿片受体激动剂U50488H可显著降低大鼠心率、动脉压、左心室内压及收缩、舒张功能，具有明显的负性肌力作用. 我们既往在离体大鼠心脏实验中也已报道过к阿片受体对心脏的负性肌力作用［7，8］，本次在体实验研究结果和既往离体实验结果相一致，从而说明无论在在体还是在离体情况下，激活к阿片受体均可对心脏产生负性肌力作用.
由于激活к阿片受体，导致大鼠心率减慢，心脏收缩、舒张功能降低，心肌耗氧量亦有所降低，因此我们推测激活к阿片受体可能会对心肌缺血再灌注室性心律失常的发生产生影响.
既往研究表明在心肌缺血再灌注时，由于氧自由基生成增加、酸中毒以及钙超载等因素导致心肌细胞超微结构明显破坏、心功能受损，可以发生心律失常，严重时还可以造成心肌梗死；提前给予心肌缺血预处理则可以产生心脏保护作用，能够降低心律失常的发生率，并可减少心肌梗死的面积［9，10］. 其中μ， δ阿片受体在心肌缺血再灌注过程中发挥着十分重要的作用，在心肌缺血前预先给予μ， δ阿片受体激动剂可以减少缺血再灌注心肌梗死的面积，或可以减少缺血再灌注室性心律失常的发生. 本研究发现к阿片受体在心肌缺血再灌注过程中亦起着十分重要的作用，预先给予U50488H激活к阿片受体具有明显的心脏保护作用，能够减少室性心律失常的发生，主要表现为缺血再灌注室性心动过速和室颤的持续时间缩短和发生率降低，而且该作用可被选择性к阿片受体阻断剂NorBNI所抑制，从而证实U50488H的抗心律失常作用的确是由к阿片受体所介导的，这同国外的最新研究结果相一致［11，12］. U50488H的作用机制可能通过负性调节β肾上腺素能受体，下调cAMP，使细胞内Ca2+降低，来发挥抗心律失常作用的，至于U50488H直接具有抗心律失常作用还是通过类似于心肌缺血预处理的方式发挥作用尚有待于进一步研究. U50488H较吗啡等其他阿片肽类药物具有极低的成瘾性，若能将其作用机制研究清楚，并进一步降低其药物依赖性，无疑将具有较为广阔的临床应用前景.
总之，本研究初步表明激活к阿片受体对心脏具有明显的负性肌力作用；而预先给予U50488H，对缺血再灌注心律失常的发生可产生明显的拮抗作用，其作用机制尚有待于进一步研究.
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