作者：孟晶，戴体俊，段世明，许爱军，郭忠民
【关键词】 依托咪酯
摘要 :目的 观察静脉麻醉药依托咪酯对小鼠电惊厥、药物性惊厥的作用，为临床应用提供依据，同时探讨依托咪酯的作用机制。 方法 以电刺激或致惊剂〔士的宁、N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）、利多卡因〕建立不同类型的小鼠惊厥模型，观察腹腔注射3种剂量的依托咪酯对小鼠强直性惊厥潜伏期、持续期、惊厥发生率、小鼠死亡率以及小鼠存活时间的影响。 结果 依托咪酯剂量依赖性地缩短电惊厥小鼠强直性惊厥的持续时间，延长士的宁惊厥小鼠的存活时间（P&<0.01），较大剂量可完全拮抗NMDA和利多卡因引起的强直性惊厥（P&<0.01）。 结论 依托咪酯对小鼠电惊厥、士的宁、NMDA及利多卡因惊厥均有拮抗作用。依托咪酯的作用机制复杂，可能与NMDA受体、甘氨酸受体、γ-氨基丁酸A（GABAA）受体等有关。
关键词 :依托咪酯;药物惊厥;电惊厥;士的宁;N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）;利多卡因
Abstract:Objective To investigate the effect and mechanism of intravenous anesthetic etomidate on the convulsion in-duced by electrical stimulation and drugs in mice to provide a theoretical rationale for its clinical application.Methods Three doses of etomidate were administered intraperitoneally.Five minutcs later，convulsion was induced by electricity or drugs ［strychnine.N-methyl-D-aspartate（NMDA）.lidocanine］.The convulsant latency，duration of tonic state，incidence of con-vulsion，mortality and survival time were noted.Results Etomidate could dose-dependently shorten the duration of tonic state induced by electricity，prolonged the survival time of strychnine-convulsion（P&<0.01）.The convulsion induced by NMDA and lidocanine could be completely antagonized by big-dose etomidate（P&<0.01）.Conclusions The anticonvulsive effect of etomidate varies in degree in the four experimental models of convulsion.The mechanism of this action may be related to NMDA receptor，glycine receptor and gamma-aminobutyric acid A（GABAA）receptor.
Key words:etomidate;convulsion，drug-induced;electric convulsion;strychnine;NMDA;lidocanine
惊厥是临床常见症状且后果严重。许多疾病（如高热、破伤风、子疒 间 、中枢神经系统疾病等）可伴有惊厥症状，不少药物过量也可引起惊厥。目前临床上常用的抗惊厥药物有巴比妥类、苯二氮艹卓类、水合氯醛、硫酸镁等。这些药物多有较强的呼吸、循环抑制作用，或作用时间较长，常与惊厥后期的“抑制相”叠加而加重抑制。故这些传统的抗惊厥药使用时顾虑较多，急需寻找抗惊厥作用快而强、维持时间短，且对呼吸、循环抑制轻的抗惊厥药。目前临床上常用的某些静脉全麻药恰好具有这些特点，尤其是作用短暂，可避免与惊厥的“抑制相”叠加，极有可能成为更为理想的新型抗惊厥药。国内外对全麻药抗惊厥作用的研究都少而零散，且仅限于临床个案报道［1-2］ 而多缺乏系统实验研究。我们对常用的静脉麻醉药依托咪酯（etomidate）的抗惊厥作用进行了观察，现报道如下。
1 材料和方法
1.1 仪器与药品 YSD-4药理、生理实验多用仪（蚌埠第二仪器厂生产，简称“多用仪”）;依托咪酯由徐州恩华制药厂生产，用生理盐水稀释成所需浓度;硝酸士的宁由上海天丰制药厂生产;N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）由Sigma公司提供，用人工脑脊液［3］ （artificial cerebral spinal fluid，ACSF）稀释成所需浓度。盐酸利多卡因由上海复星朝辉制药厂生产。
1.2 动物 昆明种小鼠，雌雄不拘，体重20～25g，由徐州医学院实验动物中心提供。
1.3 方法 根据引起小鼠惊厥的模型不同，将实验分成4部分。每一部分均按分层随机区组设计，使各组小鼠的平均体重和性别比例相似，每组10只。各小鼠分别腹腔注射生理盐水（NS组）、依托咪酯10mg・kg -1 （E 10 组）、5mg・kg -1 （E 5 组）及2.5mg・kg -1 （E 2.5 组），注射容积均为0.1ml・10g -1 ，5min后给予相应的惊厥刺激（电刺激、致惊剂），观察小鼠强直性惊厥的潜伏期、持续期、惊厥发生率、小鼠死亡率以及存活时间等指标。
1.3.1 电惊厥实验［4］ 将两鳄鱼夹头端沾生理盐水后，分别夹在小鼠的下唇和两耳之间的皮肤处，启动1次单刺激（频率1Hz、波宽3ms、电压35V）可引起小鼠1次强直型惊厥发作。小鼠腹腔注射依托咪酯或生理盐水5min后启动1次单刺激。
1.3.2 药物性惊厥 分组同前，小鼠分别腹腔注射等容的生理盐水、依托咪酯2.5、5、10mg・kg -1 ，5min后腹腔注射硝酸士的宁1.5mg・kg -1 、利多卡因100mg・kg -1 或侧脑室注射［5］ （icv）NMDA0.4μg（容积10μl，30s内注射完）。观察30min。
1.4 统计学处理 惊厥潜伏期和持续期均以ˉx±s表示，用SPSS软件进行统计分析;惊厥发生率和死亡率用直接概率法检验。P&<0.05认为有显著意义。
2 结果
2.1 依托咪酯的抗电惊厥作用 依托咪酯可剂量依赖性地缩短电惊厥小鼠强直型惊厥持续期（P&<0.01），但对惊厥死亡率、惊厥潜伏期无明显影响。E10组虽有6只小鼠电刺激后出现跑跳，但均未见强直型惊厥。见表1。
表1 依托咪酯对小鼠电惊厥作用的影响（略）
与生理盐水组比较:**P&<0.01
2.2 依托咪酯的抗药物性惊厥作用 见表2。
2.2.1 对士的宁惊厥的影响 依托咪酯可剂量依赖性地延长小鼠存活时间。E10 组小鼠无强直性惊厥出现，仅表现为阵挛型。但依托咪酯对惊厥潜伏期无明显影响，也不能降低死亡率。
2.2.2 对NMDA惊厥的影响 依托咪酯降低NMDA诱发的强直型惊厥发生率（P&<0.05，P&<0.01），缩短惊厥持续期，且用药各组均未见小鼠死亡。但与NS组相比死亡率的差别无显著性（P&>0.05）。
2.2.3 对利多卡因惊厥的影响 依托咪酯3个剂量组均可完全拮抗利多卡因引起的强直型惊厥，但与NS组相比，两组死亡率的差异无显著性（P&>0.05）。
与NS组比较:*P&<0.05，**P&<0.01
3 讨论
电刺激可使动物中枢神经元去极化和超极化交替出现，且其出现的去极化伴有阵发性簇状放电，可能与电刺激影响了细胞膜的稳定性、加强了神经元的兴奋性或降低其抑制有关［6］ 。电刺激避免了药物直接对神经组织的影响，更能反映惊厥发作的过程。
本实验中，依托咪酯能剂量依赖性地对抗电惊厥作用，提示依托咪酯在大脑皮质作用范围比较广泛，其作用机制可能并非针对单一受体或递质。
士的宁是选择性的甘氨酸受体拮抗剂，可使以甘氨酸为主要抑制性神经递质的脊髓内突触传递易化，导致惊厥，故属于脊髓型惊厥。依托咪酯可延长士的宁致惊厥小鼠的存活时间，大剂量可避免强直型惊厥的发生，提示依托咪酯具有一定的抗士的宁惊厥作用，其作用机制可能与脊髓的甘氨酸受体有关［7］ 。NMDA是NMDA受体的选择性激动剂，NMDA受体活性增高可导致中枢过度兴奋，与动物癫痫的产生、发展和维持有关。另外，NMDA受体过度兴奋所介导的Ca 2+ 内流还可引起神经细胞迟发性损伤，促使神经元程序性死亡［8］ 。侧脑室注射NMDA，一方面使惊厥发作，易感性增加，另一方面增强兴奋性突触传递，加重惊厥所致的迟发性神经元损伤。因此，对临床上反复发作的惊厥患者给予NMDA受体拮抗药不仅可制止惊厥发作，还可以减轻脑损伤。本实验E 5 、E 10 组完全避免了NMDA诱发的惊厥，E 2.5 组仅有2只小鼠出现惊厥，提示依托咪酯抗惊厥作用可能与NMDA受体有关。依托咪酯各组小鼠死亡率均为零，但与NS组相比无统计学差异，可能与选择例数过少有关。
利多卡因是临床常用的局麻药，局麻药低浓度可逆性地与钠通道结合且阻滞钠通道，从而阻滞神经的兴奋和传导，出现麻醉作用。局麻药血药浓度过高时，由于中枢抑制性神经元比中枢抑制性神经元对局麻药更敏感，而首先被抑制，导致中枢兴奋性神经元占优势，表现为惊厥发作［9］ 。有实验表明利多卡因以竞争性方式抑制海马锥体神经元γ氨基丁酸A受体（GABA A ）-Cl-电流［10］ ，提示依托咪酯抗利多卡因惊厥的机制可能与GABA A 受体有关。
由于依托咪酯可拮抗士的宁、NMDA和利多卡因惊厥，提示依托咪酯抗惊厥作用的机制可能与甘氨酸、NMDA、GABA A 受体有关。
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