作者：许新梅 杜娟 章建英 周彦 黄海波 王静
【摘要】 目的 探讨血清心肌型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）定量测定对新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿合并心肌损害的临床应用价值。方法 HIE组新生儿35例，正常对照组新生儿15例。正常对照组于生后1天，HIE组分别于生后1天(急性期)及第7天（恢复期）抽股静脉血4 ml，检测H-FABP和心肌型肌酸激酶同工酶（CK-MB)水平。结果 急性期HIE组血清H-FABP和CK-MB水平均明显高于正常对照组（P＜0.01）；恢复期轻、中度HIE患儿血清H-FABP和CK-MB水平均明显下降，与正常对照组差异无显著性（P＞0.05），重度HIE患儿血清CK-MB水平与正常对照组比较差异也无显著性（P＞0.05），而重度HIE患儿血清H-FABP水平明显高于正常对照组（P＜0.01）。且血清H-FABP的浓度可随HIE的病情程度而相应变化。急性期HIE患儿血清H-FABP与CK-MB的阳性率分别为：H-FABP 94.3%，CK-MB 42.9%，差异有显著性（P＜0.01）。急性期HIE患儿检测血清H-FABP的敏感性高于血清CK-MB。结论 H-FABP是一种微小心肌损害高敏感的指标，对筛查HIE患儿有无合并心肌损害、指导治疗及判断HIE的病情严重程度及预后具有重要的应用价值。
【关键词】 缺氧缺血性脑病; 新生儿；心肌损害；心肌型脂肪酸结合蛋白
Abstract:Objective To explore the clinical value of the heart-type fatty acid binding protein （H-FABP）in neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy（HIE）.Methods Peripheral venous blood samples (4 ml each) were obtained from 35 neonates with HIE （HIE group) 1 day (acute period) and 7 days (recovery period) after birth， and from 15 normal neonates (normal control) 1 day after birth. Serum H-FABP and myocardial-specific isoenzyme of creatine kinase (CK-MB) levels were measured.Results During the acute period in HIE group， the levels of serum H-FABP and CK-MB were significantly higher than that in the normal control (P＜0.01). In recovery period， serum H-FABP and CK-MB dropped to normal level in slight/mid HIE neonates compared to normal control (P＞0.05); CK-MB also dropped to normal level in severe HIE neonates compared to normal control (P＞0.05); but in the severe HIE neonates the level of serum H-FABP was significantly higher than that of the normal control (P＜0.01). In addition， the levels of serum H-FABP varied with the severity of HIE. In acute period， the positive rates of H-FABP and CK-MB were 94.3% and 42.9% respectively， with the sensitivity of serum H-FABP being higher than that of serum CK-MB (P＜0.01）. Conclusion H-FABP is a sensitive index of mini myocardial damage. It can be used as a test for screening myocardial damage in HIE neonates， guiding the treatment of HIE and evaluating its severity and prognosis.
Key words: hypoxic-ischemic encephalopathy; neonate； myocardial damage； heart-type fatty acid binding protein
新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy， HIE）是新生儿期常见病之一，病情重，预后差，可同时合并心肌损害。临床上，HIE合并心肌损害有报道达96.2%［1］。血清心肌型脂肪酸结合蛋白（heart-type fatty acid binding protein，H-FABP）是一种重要的细胞内脂肪酸载体蛋白，相对分子质量小（14000～15000），心肌含量最多，为近年发展起来的反映心肌损害的早期生化指标［2］。作者对35例HIE患儿和15例足月新生儿进行了血清H-FABP、心肌型肌酸激酶同工酶（CK-MB）的定量检测，观察其动态变化，将H-FABP、CK-MB进行比较，分析H-FABP对HIE患儿合并心肌损害的诊断价值和判断HIE的病情严重程度及预后的临床意义。
1 资料和方法
1.1 研究对象 35例HIE患儿均为我院儿科病房住院病例，均符合1996年杭州会议修定的《新生儿缺氧缺血性脑病诊断依据和临床分度》标准［3］，男20例，女15例。入院日龄均为生后24 h内，均为足月儿，胎龄37～42周。出生体重（3290±337）g，其中：重度HIE 9例，中度HIE 17例，轻度HIE 9例。对照组15例均为本院产科同期出生1天内的足月健康新生儿（排除其有宫内窘迫、生后窒息、先天性心脏病等缺氧病史），胎龄37～42周。男8例，女7例。出生体重（3487±336）g，母孕期健康，分娩过程无异常。HIE组与对照组在胎龄、体重、日龄、性别、分娩方式等方面，二组相比差异无显著性(P＞0.05)。
1.2 方法
1.2.1 标本采集及处理 对照组分别于生后1天，HIE组分别于生后1天(急性期）及第7天(恢复期）抽股静脉血4 ml，及时分离血清，立即检测CK-MB，剩余血清置-30℃冰箱密封保存待测H-FABP。
1.2.2 试剂及仪器 H-FABP试剂盒为美国原装进口，CK-MB试剂盒为美国Beckman公司生产，奥地利Spectra Ⅲ型酶标仪，芬兰产Wellwash 4MK2洗板机，美国Beckman CX9全自动生化分析仪。
1.2.3 实验方法 血清H-FABP测定采用双抗体夹心酶联免疫一步法定量检测，CK-MB测定采用免疫抑制速率法。操作均严格按试剂盒说明书操作。本研究H-FABP按95%可信限以＞3.30 μg/L为阳性判断值，CK-MB按试剂说明书参考值以＞80 U/L为阳性判断值。
1.3 统计学处理 计量资料以±s表示，组间、组内比较采用t检验，率的检验采用χ2检验。P＜0.05为差异有显著性。
2 结 果
2.1 生后第1天各组新生儿血清H-FABP、CK-MB的比较 由表1可见，急性期即生后第1天，HIE各组血清H-FABP、CK-MB水平均较正常对照组明显增高（P＜0.01)。表1 生后第1天各组新生儿血清H-FABP、 CK-MB的测定值与正常对照组比较: *P＜0.05，**P＜0.01;与重度HIE组比较:Δ P＜0.05，ΔΔ P＜0.01
2.3 血清H-FABP与CK-MB检测的阳性率 急性期（治疗前）HIE患儿血清H-FABP与CK-MB检测的阳性率分别为：H-FABP 94.3%(33/35)，CK-MB 42.9%(15/35)，前者明显高于后者（χ2=9.5，P＜0.01）。因此急性期HIE患儿检测血清H-FABP变化的敏感性显著高于血清CK-MB。
3 讨 论
HIE是围生期窒息后引起的最常见和严重的并发症，是导致儿童神经系统伤残的常见原因之一。据估计2%～4%的胎儿或新生儿在围生期出现窒息，其中15%～20%将发生HIE。因HIE的病因是窒息、缺氧，故心肌同时也受累而缺氧。短时间缺氧时，心肌血流供应靠体内血流重新分布，冠状动脉扩张，使心肌受到保护。长时间缺氧时，虽然冠状动脉扩张，心肌血流灌注量和氧释放量仍不能满足其耗氧需要，心肌呈相对缺血状态，因而产生一系列氧自由基反应，使心肌受损。正常情况下，心肌细胞以有氧代谢为主，故对缺氧非常敏感。心肌缺氧时，无氧酵解过程中的酸性物质堆积，细胞内酸中毒，心肌细胞能量代谢障碍，ATP减少，也导致心肌受损［2］，但大多数病例因心肌损害的临床表现不显著而被忽视。由于新生儿期心肌细胞修复和再生能力均较强，故早期多为一过性心肌缺氧缺血，但可导致心肌收缩力下降，心排血量减少而加重循环障碍［4］。如果予以及时治疗，受损的心肌可恢复正常，从而改善器官血供，因此心肌损害的早期诊断非常重要。H-FABP作为心肌损害的早期生化指标，是当今研究的热点，尤其是在心血管疾病研究领域中应运较多，Tanaka等［5］研究发现急性心肌梗死（AMI）早期，血清H-FABP可在3 h内上升并迅速达到最高峰，而与一些传统的心肌酶学指标如CK-MB等相比较，在时效性上具有较大优势，且CK-MB并非为心肌所特有的酶，正常人骨骼肌中也有少量存在，在非心脏病或骨骼肌损伤患者中，甚至剧烈活动后CK-MB均可以升高，易造成假阳性，也存在灵敏度低、特异性差及升高持续时间较短等不足。由于H-FABP具有更高的敏感性和特异性，越来越受到重视［6-7］。
本研究中，正常对照组血清H-FABP含量极低，明显低于HIE患儿急性期血清H-FABP。文献报道，当心肌稍有缺血、缺氧损伤时，血清H-FABP浓度升高时间比血清CK-MB早。这是因为H-FABP相对分子质量小（仅为14000～15000），而CK-MB为86000，H-FABP最先释放入血中使H-FABP浓度升高，H-FABP可用于HIE合并心肌损害的早期诊断［8］。
本研究发现，HIE患儿急性期即生后第1天血清H-FABP异常有33例，阳性率为94.3%，血清CK-MB异常15例，阳性率为42.9%，前者明显高于后者，且急性期重度HIE患儿血清H-FABP的水平较中度及轻度均显著升高。因此，血清H-FABP定量检测有较高的敏感性。本研究还发现，HIE患儿血清H-FABP的水平与病情严重程度有关。HIE恢复期即治疗后第7天血清CK-MB无一例异常，而血清H-FABP有12例异常，且多为中度及重度HIE患儿，说明HIE患儿病情越重，其血清H-FABP升高持续时间越长。因此，H-FABP定量检测是一种判断微小心肌损害的高敏感指标，对筛查HIE患儿有无合并心肌损害，判断HIE的病情严重程度、预后及指导治疗有重要的的应用价值。
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