【关键词】 健中愈疡片 药理学 胃粘膜损伤 中药疗法 前列腺素 疾病模型 动物 大鼠
前列腺素（prostaglandin，PG)是二十碳不饱和脂肪酸，以花生四烯酸为前体，主要在精、肾髓质和胃肠道中合成。胃组织的PG含量很多，而胃粘膜的含量又远高于粘膜下层和肌层，胃粘膜内还存在生成和降解PG的酶。胃粘膜合成的内源性前列腺素，既有细胞保护作用，又有抑制胃酸分泌的作用［1］，在胃粘膜的屏障功能中发挥重要作用。本研究观察了健中愈疡片对胃粘膜内源性前列腺素含量的影响。现报道如下。
1 材料与方法
1.1 实验动物 雄性Sprague Dawley大鼠（SPF级）107只，体质量160～200g，购自广州中医药大学动物实验中心［许可证号SCXK（粤）2003-0001］，动物饲养于广州中医药大学实验动物中心SPF级实验室（环境设施合格证书号0005012）。动物观察室采用自然光，温度、湿度恒定，分笼饲养，自由饮食。饲料由该实验动物中心提供标准颗粒饲料。
1.2 药品 健中愈疡片由广州中医药大学第一附属医院制剂室制备，组成为党参、白术、黄芪、莪术、救必应、延胡索、蒲公英、白芨、乌贼骨、珠珍末等（批号040921）；法莫替丁由广东彼迪药业有限公司生产（批号20040801）；党参中药配方颗粒由广东一方制药有限公司生产（批号0409163）；消炎痛片由广东华南药业有限公司生产（批号040801）。
1.3 主要仪器及试剂 SHANGPING JA2003电子天平（上海天平仪器厂）；Biocell ht2酶标仪（奥地利Biocell公司）；Biocell-02酶标仪测器和质量控制管理系统（奥地利Biocell公司）；SIGMA1-15离心机（德国SIGMA公司）；PYX-250S-B生化培养箱（广东韶关科力实验仪器有限公司）；Prostaglandin E2 HS Immunoassay DE2100试剂（R&&D systems公司）。
1.4 分组与给药 将大鼠随机分为7组，每组16只。①空白对照组：灌胃生理盐水2mL/d；②模型组：灌胃生理盐水2mL/d；③法莫替丁组：灌胃给予法莫替丁，剂量为7.14mg·kg-1·d-1；④党参1组：灌胃给予党参颗粒，剂量为0.71g·kg-1·d-1；⑤党参颗粒2组：灌胃给予党参颗粒，剂量为2.84g·kg-1·d-1；⑥健中愈疡片1组：灌胃给予健中愈疡片，剂量为0.27g·kg-1·d-1；⑦健中愈疡片2组：灌胃给予健中愈疡片，剂量为1.08g·kg-1·d-1。共灌胃给药7d。
1.5 消炎痛胃粘膜损伤造模［2］ 将消炎痛溶于50g/L NaHCO3溶液中，用蒸馏水稀释成2mg/mL混悬液；造模前动物禁食24h，自由饮水，常规喂药。大鼠末次灌胃给药3h后除后空白对照组外均皮下注射消炎痛20mg/kg；每组隋随机取8只在造模7h后乙醚麻醉，处死动物，部腹取胃；各组余下8只继续给药7d后依法处死，部腹取胃。
1.6 前列腺素的测定 快速取胃，用冷生理盐水冲洗，沿大弯侧将胃剪开，磷酸盐缓冲液（PBS）洗净，滤纸吸干，展开置于冰面平板上，冰面上用载玻片刮取胃粘膜，置于冻存管内，液氮速冻，转-70℃保存，用于检测胃粘膜前列腺素E2（PGE2 ）含量。测定方法：取出冻存的胃粘膜组织，称质量后加入500μL4℃Krebs液［3］（添加吲哚美辛以防止操作过程新生成前列腺素）；4℃离心（20kr/min×20min），取上清；PGE2 测定方法按试剂盒说明书操作。
1.7 统计方法 结果采用完全随机设计资料的方差分析方法（OneWay ANOVA）进行分析，应用SPSS13.0统计软件协助统计。当各组方差齐时用LSD法进行均数间的两两比较，当各组方差不齐时用Dunnetts C 法进行均数间的两两比较。
2 结果
2.1 健中愈疡片对消炎痛胃粘膜损伤模型大鼠胃粘膜中PGE2 含量的影响 结果见表1。
3 讨论
PG由一个五碳环结构和两条侧链组成，根据五碳环结构分成若干型，分别为PGA、PGB、PGC、PGD、PGE、PGF、PGG、PGH、PHI。胃肠内的PG主要为PGE、PGF以及PG12。内源性前列腺素的胃粘膜保护作用表现为：①加强胃粘膜的屏障作用，减少H+逆向弥散，还可显著影响电位差及Na+移动；②增强胃及十二指肠上皮细胞分泌粘液，从而增强粘膜表现粘液厚度，增强对损伤性刺激的防御作用；③增强胃粘膜血流量；④刺激胃十二指肠粘膜基底细胞向表面移行，促进粘膜修复等［3-4］。研究证实甾体类抗炎药（nonsteroidal antiinflmmatory drugs，ASAIDs）通过抑制环氧化酶（COX）活性干扰花生四烯酸的代谢，使保护性前列腺素减少导致胃粘膜损伤。口服ASAIDs其全身的PG被抑制可达90%［5］。消炎痛是最强的PG合成酶抑制药之一，其对内源性前列腺素合成所必需的环氧化酶有显示抑制作用。内源性前列腺素合成受阻，胃粘膜中的前列腺素减少，从而削弱前列腺素对胃粘膜的保护作用，造成胃粘膜损害发生糜烂、出血、溃疡、穿孔等并发症［6］。本实验结果显示，皮下注射消炎痛的各组大鼠胃粘膜均出现明显损伤，其胃粘膜PGE2含量均低于空白对照组，其中模型组大鼠胃粘膜PGE2含量减少一半以上。 既往的研究证实，党参提取物能明显提高正常大鼠胃组织内PGE2含量［7］，而复方黄芪汤可阻止消炎痛诱导的大鼠胃粘膜PGE2的下降来发挥胃粘膜保护作用［8］。健中愈疡片具有健脾养胃、敛疮愈伤、清热解毒、行气活血止痛之功效前期研究发现［9-12］：健中愈疡片可通过增加胃溃疡部位粘膜细胞增殖、减少细胞凋亡、增加粘膜粘液分泌、促进肉芽组织胶原合成和血管再生、减少炎症细胞因子含量和炎症细胞浸润等作用机理而促进乙酸诱发大鼠胃溃疡的愈合速度和改善胃溃疡合质量，有良好的胃粘膜保护作用。
本次实验发现，造模7d后空白对照组、模型 表1 健中愈疡片对消炎痛大鼠胃粘膜组织PGE2的影响b①:P＜0.01，与空白对照组比较（vs the blank cotrol group)；②:P＜0.01，与模型组比较（vs the model group)；③:P＜0.01，与造模7h组比较(vs that after modeling for 7hours in the same group)组的胃粘膜组织PGE2的含量分别与各自造模7h后比较均无显著性意义（P＞0.05）。各给药组分别与模型组及造模7h后比较均有显著性提高（P＜0.01），说明预防性给予健中愈疡片能减少消炎痛对大鼠胃粘膜PGE2合成的抑制作用，继续给药能增加PGE2合成，与中药党参颗粒的作用相同。提示健中愈疡片可能是通过增加胃粘膜PGE2的合成来防治NSAIDs所引起的胃肠道损伤。
参考文献
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