幽门螺杆菌感染对十二指肠球部溃疡患者血清IL6、IL8及NO的影响

　　　　 作者：王光余 ，黄晓辉 ，吴国平

【摘要】 目的：探讨幽门螺杆菌(Hp)感染对十二指肠球部溃疡患者血清白细胞介素6、8(IL6、IL8)及一氧化氮(NO)的影响。方法：分别采用双抗体夹心ELISA法和硝酸还原酶法检测40例Hp感染的十二指肠球部溃疡患者(根除Hp组和未根除Hp组)治疗前、后和10例正常对照组血清中IL6、IL8及NO水平的变化，并进行比较。结果：治疗2周后根除Hp组血清IL6、IL8 及NO水平高于正常对照组，但差异无统计学意义(P&>0.05)，未根除Hp组血清IL6、IL8 及NO水平明显高于正常对照组，差异有统计学意义(P&<0.01);根除Hp组治疗后IL6、IL8 及NO水平较治疗前均有显著下降(P&<0.01)， 而未根除Hp组治疗后IL6、IL8 及NO水平较治疗前也均有下降，但差异无统计学意义(P&>0.05);与未根除Hp组比较，根除Hp组治疗后IL6、IL8 及NO均有显著下降(P&<0.01)。结论：Hp感染的十二指肠球部溃疡存在不同程度炎症，而且Hp对炎症起促进作用，根除Hp对其炎症反应起到明显抑制作用。

【关键词】 幽门螺杆菌 ; 十二指肠球部溃疡 ;白细胞介素6 ; 白细胞介素8 ; 一氧化氮

　　 [ABSTRACT] Objective: To investigate the influence of Helicobacter pylori (HP) infection on serum IL6， IL8 and NO in duodenal ulcer patients. Methods: Forty patients with duodenal ulcer with HP infection were pided randomly into two groups (group A and B)， HP in patients of group A and B was eradicated and was not eradicated after treatment respectively， 10 health subjects without HP infection and DU were enrolled as group C (control group); doubleantibody sandwich ELISA and nitrate reductase assay were employed to determine levels of serum IL6， IL8 and NO in patients of group A and B before and after treatment， and those in patients of group C， and comparison was done among them. Results: After treatment of 2 weeks， levels of IL6， IL8 and NO in group A were higher than those in group C， but the difference was not significant (P&>0.05); levels of IL6， IL8 and NO in group B were markedly higher than those in group C， and the difference was significant (P&<0.01); levels of IL6， IL8 and NO in group A decreased compared those with before treatment， and the difference was significant (P&<0.01); levels of IL6， IL8 and NO in group B decreased compared those with before treatment， and the difference was not significant (P&>0.05); compared levels of IL6， IL8 and NO after treatment between group A and B， which decreased significantly in group A (P&<0.01). Conclusion: Patients with DU and HP have inflammation by variou degrees， and HP may deteriorate inflammation， and eradication of HP can inhibit the inflammatory reactions apparently.

　　[KEY WORDS] Helicobacter pylori(HP); Duodenal ulcer(DU); Interleukin6(IL6); Interleukin8(IL8); Nitric oxide(NO)

　　十二指肠球部溃疡(DU) 为临床上常见疾患， 且大多数十二指肠球部溃疡伴有幽门螺杆菌(Hp) 感染，根除Hp可促进溃疡愈合， 降低溃疡复发。近年来关于细胞因子在溃疡病中的作用引起了人们的关注[1]。 我科检测了40例伴有Hp感染的十二指肠球部溃疡患者治疗前、后血白细胞介素6、8(IL6、IL8) 及一氧化氮(NO)的浓度，从而探讨十二指肠球部溃疡发病过程中的炎症反应及Hp对炎症的促进作用。

　　1 资料与方法

　　1.1 病例选择

　　本组40例十二指肠球部溃疡患者， 男性24例， 女性16例， 年龄24～66岁，平均49.5 岁。 40例经胃镜确诊为活动期溃疡患者，于胃窦大弯侧距幽门2～3cm 处钳取粘膜3块，分别采用快速尿素酶试验、涂片镜检(Gram's 染色)、PCR法检测Hp，凡是进行上述方法检测Hp 均为阳性者，为入选病例。另选取10例健康体检者作为正常对照组。

　　1.2 方法

　　40例十二指肠球部溃疡患者应用洛赛克20 mg+克拉霉素500 mg+替硝唑500 mg进行治疗， 2次/d， 治疗2周， 停药4周后进行胃镜检查， 每例患者2次胃镜检查均在球部溃疡边缘或愈合后溃疡疤痕处活检粘膜组织3块(溃疡愈合指胃镜复查肉眼见溃疡消失或瘢痕形成者，溃疡较治疗前缩小或增大均为未愈合)，Hp复查快速尿素酶试验、涂片镜检(Gram's 染色) 、PCR 3项检测均为阴性者判为根除(根除Hp组)，凡是其中1项仍为阳性者，为Hp未根除(未根除Hp组)。正常对照组不予任何治疗。采用双抗体夹心ELISA 法检测血清IL6、IL8水平(IL6、IL8检测试剂盒购自深圳晶美生物工程有限公司)，采用硝酸还原酶法测定血清NO水平(NO试剂盒由南京建成生物工程研究所提供)，具体步骤严格按试剂盒说明书进行操作。

　　1.3 统计学处理

　　采用SPSS 10. 0 统计软件包进行统计学处理，计量资料用均数±标准差(±s)表示，数据的比较采用t检验，检验水准a=0.05。

　　2 结果

　　治疗2周后根除Hp组血清IL6、IL8 及NO水平高于正常对照组，但差异无统计学意义(P&>0.05)，未根除Hp组血清IL6、IL8 及NO水平明显高于正常对照组，差异有统计学意义(P&<0.01);根除Hp组治疗后IL6、IL8 及NO水平较治疗前均有显著下降(P&<0.01)， 而未根除Hp组治疗后IL6、IL8 及NO水平较治疗前也均有下降，但差异无统计学意义(P&>0.05);与未根除Hp组比较，根除Hp组治疗后IL 6、IL8 及NO均有显著下降(P&<0.01)，见表1。表1 各组治疗前、后血清IL6、IL8 及NO水平的比较注：同组间与治疗前相比，*P&<0.01;与未根除Hp组相比，△P&<0.01;与正常对照组比较，﹟P&<0.01。

　　 3 讨论

　　Hp是定居在胃粘膜的一种革兰氏阴性弯曲菌，是导致消化性溃疡的主要原因之一。介质冲洗学说[2]被认为是主要的机制，该学说认为，Hp通过产生的炎症介质在胃排空时倾倒入十二指肠而导致溃疡的发生。Hp感染胃粘膜上皮后本身不具备侵袭性， 但可诱导胃上皮细胞产生明显的炎症反应，形成的炎症细胞尤其是中性粒细胞浸润为特征的慢性活动性胃炎[3]。IL6是由单核巨噬细胞、T细胞、B细胞、内皮细胞、成纤维细胞等多种细胞产生的细胞因子， 除具有免疫增强作用和造血促进作用外， 还可参与炎症反应，对于提高炎症对机体的非特异性免疫功能有一定的作用。IL8主要由单核巨噬细胞、血管内皮细胞受到脂多糖(LPS) 或肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素1(IL1) 等细胞因子的刺激而产生]其主要生物学作用是趋化并激活中性粒细胞，促进中性粒细胞的溶酶降酶活性和吞噬作用，对嗜碱性粒细胞和T细胞也有一定的趋化作用。通过刺激先天防御机制和促进Th l细胞介导的免疫反应，在抵抗病原体(如Hp等) 过程中发挥重要作用[4]。这些生物学活性与炎症反应密切相关， 故IL8及相关的趋化因子在炎症反应中起更直接的介导作用。

　　NO的生成主要由L精氨酸中的胍基被羟化，系受一氧化氮合酶(NOS)的触酶反应而生成NO与瓜氨酸，后者又可以加入NH3生成L 精氨酸，完成再循环[5]。NO不但是一种新型的信使分子，而且也是一种自由基和细胞毒性物质，因具有病理、生理双重作用，从而引起人们广泛的关注和深入的研究。NO在消化系统的产生机制： 在生理状态下， 结构型一氧化氮合酶(eNOS)在胃内主要存在于内皮细胞[6]，诱导型一氧化氮合酶(iNOS)不表达或很少表达， NO主要来源于eNOS， 产生量少， 可调节胃肠粘膜局部血循环， 维持微循环的完整性，抑制血小板、白细胞在内皮细胞表面的粘附、积聚和胃酸分泌， 清除氧自由基团， 改善胃肠蠕动， 保护胃肠粘膜;而在感染炎症等病理刺激时，NO主要由中性粒细胞、巨噬细胞等中的iNOS在细胞因子IL1、IL2及细菌脂多糖等激活下产生， 该机制在提高机体抵抗外来微生物能力的同时， 又可对机体正常组织造成损伤。本研究提示NO参与了Hp相关的十二指肠球部溃疡的发病。Lamarque等[7]报道Hp感染可能通过激活核转录因子(NFκB)进而促进COX2及iNOS的表达，NO 的含量与Hp的感染程度呈正相关， Hp可通过NO途径引起鼠十二指肠粘膜上皮细胞损伤， 认为过量生成的NO可直接引起细胞毒作用或通过与氧自由基氧化，生成毒性更大的过氧硝基阴离子和羟自由基， 导致组织细胞氧化损伤和坏死， 形成溃疡。

　　本组十二指肠球部溃疡患者存在不同程度的炎症反应，但伴Hp感染的十二指肠球部溃疡患者IL6、IL8 水平明显高于无Hp感染者，说明Hp在十二指肠球部溃疡致病过程中对炎症反应起促进作用，从而进一步证实了介质冲洗学说。本组结果显示Hp治疗后IL6、IL8水平仍高于正常对照组，这可能是损伤的粘膜在修复过程中炎症反应未完全消失的原因。总之，本研究表明了十二指肠球部溃疡存在不同程度的炎症，而且Hp对炎症起促进作用，根除Hp对其炎症反应起到明显抑制作用。

参考文献

1 余跃， 贺降福， 吴素芬，等.十二指肠溃疡患者球部粘膜IL10和IL12和IFNγ水平的变化[J].胃肠病学，2002，7(5):283285.

　　2 Rokert A ， Kozol VA， Nayana D. Helicobacter pylori and the pathogenesis of duodenal ulcer[J]. J Lab Clin Med ，1994，124:623.

　　3 Crabtree JE. Immune and inflammatory responses to Helicobacter pylori infection[J]. Scand J Gastroenterol， 1996，31(suppl 215):310.

　　4 Akira S. The role of IL8 in innate immunity[J]. Curr Op in Immunol， 2000，12:5963.

　　5 Hecker M，Sessa WC，Harris HJ，et al.The metabolism of Larginine for the synbiosis of EDRF: recycling of Lcitrulline to Larginine[J].Proc Natl Acad Sci，1990，89:8612.

　　6 Fisher H，Becker JC，Boknik P，et al.Expression of constitutive nitric oxide synthase in rat and human gastrointestinal tract[J].Biochim Biophy Acta，1999，1450:414422.

　　7 Lamarque D，Kiss J，Tankovic J，et al.Induction of nitric oxide synthase in vivo and cell injury in rat duodenal epithelium by a water soluble extract of Helicobacter pylori[J].Br J Pharmacol，1998，123:10731078