作者：旺建伟，赵文静，历凯，赵雪莹，安平
【摘要】 目的 通过观察痛泻要方对小鼠不同机能状态胃肠运动的影响，研讨痛泻要方对胃肠运动的双向调节作用。方法 采用大黄致小鼠腹泻模型、复方地芬诺酯致小鼠便秘模型及正常小鼠，观察不同剂量其对各组排稀便数量、次数、粪便直径及腹泻率、稀便率、稀便级、腹泻指数的影响；并通过对新斯的明致小鼠小肠推进功能亢进、阿托品致小鼠小肠推进功能抑制及正常小鼠小肠推进运动的影响，观察痛泻要方对小鼠小肠推进运动的调节作用。结果 痛泻要方对小鼠腹泻模型、新斯的明致小鼠小肠推进功能亢进均有一定抑制胃肠运动作用；对小鼠便秘模型、阿托品致小鼠小肠推进功能抑制均有一定促进胃肠运动作用；对正常小鼠及其小肠推进运动均无明显作用。结论 痛泻要方对小鼠不同机能状态胃肠运动有不同影响，具有双向调节作用，与中医方证相符、辨证论治相合。
【关键词】 痛泻要方；胃肠运动；双向调节作用；肠易激综合征；小鼠
Experimental Study on Dual-Direction Regulation of Tongxie Yaofang on Gastrointestinal Movement of MiceWANG Jian-wei， ZHAO Wen-jing， LI Kai， et al 1.College of Basic Medical Sciences， Heilongjiang University of TCM， Harbin 150040， China；2.Harbin Food and Drug Administration， Harbin 150028， China Abstract：Objective To investigate the dual-direction regulation of Tongxie Yaofang on gastrointestinal movement by studying its effect on gastrointestinal movement of mice in various functional states. Methods Adopting diarrhea model induced by rhubarb， constipation model by compound diphenoxylate and normal mice， the effect of different doses of Tongxie Yaofang on loose stool quantity， degree， diameter， diarrhea rate， loose stool incidence rate， loose stool grade， diarrhea index of every group were observed. By esta blishing hyperfunction of small intestinal function in mice by neostigimine， inhibition of small intestinal function in mice by atropine sulfate and small intestinal propellant function in normal mice， the effect of Tongxie Yaofang on intestinal movement of mice were studied. Results Tongxie Yaofang could inhibit gastrointestinal movement of diarrhea model and hyperfunction of small intestinal function in mice by neostigimine. It could promote gastrointestinal movement of constipation model and inhibit small intestinal function in mice by atropine sulfate. But it had no obvious action on natural mice and its intestinal movement. Conclusions Tongxie Yaofang has dual-direction regulation on gastrointestinal movement of mice in various functional states， which has a good agreement with formula-syndrome in traditional Chinese medicine， conforms to treatment based on syndrome differentiation.
Key words：Tongxie Yaofang；gastrointestinal movement；dual-direction regulation；IBS；mice
痛泻要方为扶脾抑肝之代表方，是治疗肝旺脾虚证的有效方剂，常用于治疗肠易激综合征(IBS)等胃肠运动功能紊乱之证。IBS临床常见中医病机为肝旺脾虚，然从现代医学角度，IBS又有腹泻型和便秘型。因此，本实验旨在通过观察痛泻要方对小鼠不同机能状态胃肠运动的影响，探讨其对胃肠功能的影响。
1 实验材料
1.1 药物
痛泻要方(炒白术9 g，炒白芍6 g，陈皮4.5 g，防风3 g)。按处方量称取药物，其中白芍用水煎煮2次，第1次加10倍量水煎煮2 h，第2次加8倍量水煎煮1 h，合并2次煎煮液，浓缩至相对密度1.16(70 ℃)；其它药物采用挥发油提取装置，第1次加10倍量水煎煮2 h，第2次加8倍量水煎煮1 h。收集挥发油，水提液用75%乙醇沉淀，回收乙醇并浓缩至相对密度1.16(70 ℃)。将2次提取浓缩液合并，加入挥发油。临用时用蒸馏水配成所需浓度的溶液。大黄加4倍量水浸泡30 min后，加热煮沸，沸后小火继续煎煮10 min，4层纱布过滤，制备成含原药材量为2 g/mL的大黄水煎液。复方地芬诺酯(常州康普药业有限公司)，2.5 mg/片，制成混悬液，浓度为0.1 mg/mL。
1.2 动物
清洁级雄性昆明种小鼠，体重(20±2)g，黑龙江中医药大学实验动物中心提供，合格证号：黑动字第P00101006。
1.3 试剂
甲硫酸新斯的明注射液(山东天福制药厂，批号0703137)；硫酸阿托品注射液(天津金耀氨基酸有限公司，批号0609067)；复方地芬诺酯片(常州康普药业有限公司，批号0701016)；阿拉伯树胶(天津市东丽区丽昌化工有限公司)；活性炭。
2 实验方法
2.1 对小鼠腹泻、便秘模型及正常小鼠胃肠运动的影响
昆明种小鼠90只随机分为腹泻模型组、腹泻给药组(1、2倍给药组)、空白对照组、便秘模型组、便秘给药组(1、2倍给药组)、正常给药组(1、2倍给药组)9组，每组10只。各组动物禁食不禁水8 h后，各给药组先灌服痛泻要方0.1 mL/10 g (含原药材0.293、0.586 g/mL)，空白对照组及模型组灌服同体积生理盐水。灌胃给药40 min后，腹泻模型组及腹泻给药组均以大黄水煎液0.1 mL/10 g灌胃，便秘模型组及便秘给药组均以复方地芬诺酯0.1 mL/10 g灌胃，空白对照组及正常给药组予同体积生理盐水。各组小鼠单只分笼，笼底垫干净滤纸，观察其后5 h内每只小鼠的排便情况(排湿便次数、数量及粪便直径)，并计算腹泻率、稀便级、腹泻指数。
2.2 对小鼠小肠炭末推进运动的影响
昆明种小鼠60只，随机分为空白对照组、新斯的明对照组(新对照组)、阿托品对照组(阿对照组)、新斯的明＋痛泻要方组(新给药组)、阿托品＋痛泻要方组(阿给药组)、正常给药组6组，每组10只。各组动物禁食不禁水18 h后，各给药组先灌服痛泻要方0.1 mL/10 g(含原药材0.293 g/mL)，各对照组灌服同体积生理盐水。30 min后，新对照组及新给药组腹腔注射新斯的明0.013 mL/10 g(含药0.05 mg/mL)，阿对照组及阿给药组注射阿托品0.013 mL/10 g(含药0.05 mg/mL)，空白对照组及正常给药组予同体积生理盐水。15 min后，各组分别灌服5%活性炭混悬液(含5%活性炭末，10%阿拉伯树胶)0.2 mL/10 g。30 min后将小鼠处死，打开腹腔，剪取上端至幽门、下端至回盲部的肠管，置于玻璃板上。观察炭末推进距离，测自幽门括约肌至小肠炭末移动最前端的距离和幽门括约肌至盲肠根部的总距离，二者百分比为小肠推进比，并计算炭末推进率。
2.3 统计学方法
实验数据以x±s表示，数据处理应用SPSS13.0统计软件。组间差异比较采用t检验法。
3 结果
(见表1～表4) 表1 对小鼠腹泻模型胃肠运动的影响(略)注：与腹泻模型组比较，*P&<0.05，**P&<0.01表2 对正常小鼠胃肠运动的影响(略)注：与空白对照组比较，**P&<0.01；与1倍给药组比较，▲▲P&<0.05
表3 对小鼠便秘模型胃肠运动的影响(略)注：与空白对照组比较，*P&<0.05，**P&<0.01；与便秘模型组比较，△P&<0.05表4 对小鼠小肠炭末推进运动的影响(略)注：与空白对照组比较，*P&<0.05，**P&<0.01；与新对照组比较，#P&<0.05；与阿对照组比较，◆P&<0.05，◆◆P&<0.01
4 讨论
IBS属于中医学的“泄泻”、“腹痛”、“便秘”、“腹胀”等范畴，其发病原因尚未明了，有肠道平滑肌障碍学说、内脏痛觉过敏学说、脑-肠轴学说等。IBS患者的腹泻或便秘症状等肠道动力改变以结肠动力紊乱为主[1]，可伴有食管、胃、小肠以及直肠肛门功能紊乱等，全胃肠道均可出现症状，甚至可引起胆囊、膀胱动力异常[2]。IBS患者肠道动力异常表现不仅有腹痛，而且有明显的胀气感，出现胀气感的原因可能由于结肠动力异常，无法排除肠内发酵产生的气体所致[3]。临证常见IBS患者以腹部不适或腹痛伴排便习惯改变，或泄泻或便秘。此因素体脾虚，复因情志等因素刺激，致肝旺乘脾，脾失健运，清浊不分，混杂而下，导致泄泻；亦可因脾虚运化水谷精微功能失司，中气推动无力，胃气通降不达，大肠传导失职，致糟粕积滞不下，引起便秘。故肝旺脾虚，肝木乘土，升降失常，乃二者病机之关键。治当以柔肝补脾，痛泻要方为其首选。方中白术苦甘性温而健脾燥湿，为培土主药；白芍酸寒而缓急止痛，与白术配伍，补脾柔肝；陈皮理气祛湿、醒脾燥湿；防风在白术作用下，鼓舞脾胃清阳，在白芍作用下，散郁以助疏肝，取“风气通于肝”之意，且祛风以助祛湿，而为脾经之引经药。诸药共达补虚土而泻旺木，调和肝脾，复其升降，故而泻能止、秘能通。用痛泻要方统而治之，此为异病同治，缘其病机相同，体现中药复方双向调节作用。
本实验以小鼠胃肠运动变化为指标，反映胃肠的运动状况及药物对其的影响。从实验结果看，痛泻要方能对抗激惹的胃肠运动，促进受抑的胃肠运动，具有双向调节作用。小鼠排便实验结果表明，痛泻要方缓解由大黄所致腹泻，并能促进由复方地芬诺酯所致便秘模型组排便。然而，痛泻要方对正常小鼠排便影响随剂量不同而有所差异，提示痛泻要方剂量变化可致药理作用有所变化。阿托品为M受体阻断药，能明显抑制胃肠运动机能。炭末推进实验表明，本方可明显改善由阿托品引起的胃肠运动机能受抑状态。新斯的明为胆碱酯酶抑制剂，使乙酰胆碱在体内浓度增加，表现乙酰胆碱的M和N样作用，兴奋胃肠道平滑肌，使胃排空加快，肠的推进作用增强。本方则能拮抗由新斯的明引起的胃肠运动机能的亢进，使亢进的胃排空和肠蠕动趋于正常，对正常动物无明显改变，说明痛泻要方主要对受抑或偏亢的机能状态有调节作用，这一双向调节作用与口服阿托品拮抗新斯的明所致的胃肠运动机能亢进作用相类似，提示痛泻要方对胃肠运动机能的双向调节作用可能与胆碱能系统有关。
【参考文献】
1] 项柏康.重视肠易激综合征发病机理的研究及中医药治疗[J].浙江中医学院学报，2000，24(12)：15.
[2] Small PK， Loudon MA， Han CM， et al. Large scale ambulatory study of post prandial jejunal motility in irritable bowel syndrome[J]. Scand J Gastroenterol，1997，32：39.
[3] Di Stefano M， Strocchi A， Malservice S， et al. Non-absorbable antibiotics for managing intestinal gas production and gas related symptoms[J]. Aliment Phamacol Ther，2000，14：1001.