作者：肖烈钢，朱成全，张玉亮，洪加津
【摘要】 目的 观察舒痛安汤对吗啡依赖大鼠镇痛及生殖功能的影响，探讨其作用机理。方法 建立吗啡依赖模型大鼠，采用放免法观察舒痛安汤对吗啡依赖大鼠下丘脑和血浆β-内啡肽(β-EP)、结状神经节和孤束核P物质(SP)以及血清内分泌激素的变化。结果 吗啡依赖大鼠下丘脑β-EP的含量均较正常大鼠降低，舒痛安汤高剂量组可增高下丘脑β-EP含量(P&<0.01)，舒痛安汤中、高剂量组可增高血浆β-EP含量(P&<0.01，P&<0.05)；吗啡依赖大鼠结状神经节和孤束核SP含量升高，舒痛安汤高剂量组可降低结状神经节和孤束核SP的含量(P&<0.01，P&<0.05)。吗啡依赖雌性大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、泌乳素(PRL)均低于正常对照组，舒痛安汤中、高剂量组均可增高血清FSH、E2、PRL含量(P&<0.01，P&<0.05)；吗啡依赖大鼠睾丸酮(T)含量显著降低(P&<0.01)，舒痛安汤中、高剂量组均可增高雄性大鼠血清T含量(P&<0.01)，而对大鼠血清黄体生成素、PRL含量无显著影响。结论 舒痛安汤可能通过改善吗啡依赖大鼠下丘脑-垂体-肾上腺的变化，消除戒断症状，从而达到治疗目的。
【关键词】 舒痛安汤；吗啡依赖；β-内啡肽；P物质；性激素；大鼠
Key words：Shutongan Decoction；morphine dependence；β-endorphin；substance P；sex hormone；rat
舒痛安汤临床主要用于戒毒治疗[1]。为了进一步探讨其治疗阿片类依赖的机理，了解该方对吗啡依赖大鼠镇痛及生殖功能的影响，我们检测了SD大鼠吗啡依赖模型下丘脑、血浆β-内啡肽(β-endorphin，β-EP)、P物质(Substance P，SP)以及血清内分泌激素的变化。现报道如下。
1 实验材料
1.1 药物
盐酸吗啡注射液(Mor)，为沈阳第一制药厂产品；盐酸可乐
定(Clonidine，CND)片，为江苏常州制药厂产品；舒痛安汤，广州海军疗养院提供，由黄芪、钩藤、党参、延胡索、细辛、栀子、鸡血藤、黄连、黄柏、生地黄、山药、茯苓、牡丹皮、当归、川芎等16味药材组成，用时煎成浓缩液，原药材含量为2.0 g/mL。
1.2 试剂与仪器
β-EP试剂盒、SP试剂盒、睾丸酮(T)试剂盒、泌乳素(PRL)试剂盒、雌二醇(E2)试剂盒、卵泡刺激素(FSH)试剂盒及黄体生成素(LH)试剂盒均由美国Sigma公司提供。检测仪器为γ-计数仪(上海核福光电仪器有限公司生产)。
1.3 动物
SD大鼠，雌雄各半，体重180～220 g，广州中医药大学实验动物中心提供，动物合格证号：2000A019。
2 实验方法
2.1 分组
将实验动物随机分成6组：生理盐水组(A组)、吗啡＋生理盐水组(B组)、吗啡＋舒痛安汤低剂量组(C组)、吗啡＋舒痛安汤中剂量组(D组)、吗啡＋舒痛安汤高剂量组(E组)和吗啡＋可乐定组(F组)，每组10只，雌雄各半。
2.2 造模
参照文献[2]方法，B、C、D、E、F组大鼠皮下注射Mor，首日10 mg/kg (bid)；隔日每次增加10 mg/kg，至第6日末次注射50 mg/kg，建立吗啡依赖模型。而A组则以生理盐水代替吗啡同法注射。
2.3 给药及检测
C、D、E组分别以舒痛安汤浓缩液灌胃，剂量为50、100、200 mg/kg；F组灌胃CND 0.2 mg/kg，A、B组灌胃等容量生理盐水，每日给药2次，共给药2 d。于末次皮下注射Mor或生理盐水1 h后，各组大鼠经10%水合氯醛麻醉后，颈动脉取血，4%Na2EDTA抗凝，3 000 r/min离心15 min，取上清置-70 ℃冰箱保存。各组动物取血后，断头处死，迅速取出下丘脑组织、双侧结状神经节和双侧孤束核区。下丘脑组织称重后，置入加有0.06 mol/L DHBA(二羟苄胺)20 μL及0.1 mol/L HClO4 380 μL的Eppendorf管中，置于-70 ℃冰箱中保存，待测。迷走神经结状神经节和孤束核区称重后，切成2 mm×2 mm碎块，置于0.5 mol/L的乙酸中95 ℃水溶10 min，用Ultra-Turrax匀浆机做成匀浆，离心20 min (4 ℃，7 400/g)，上清液分装冻干，密封贮存于-70 ℃冰箱备用。参照文献[3-4]方法进行测定。
2.4 统计学方法
数据以x±s表示，各组数据用SPSS10.0软件进行分析，2组比较采用t检验，多组比较采用单因素方差分析，P&<0.05为差异有显著性意义。
3 结果
(见表1～表3)表1 舒痛安汤对吗啡依赖大鼠β-EP和SP的影响(略)注：与B组比较，*P&<0.05，**P&<0.01；与A组比较，△△P&<0.01(下同) 表2 舒痛安汤对雌性吗啡依赖大鼠血清FSH、E2和PRL的影响（略） 表3 舒痛安汤对雄性吗啡依赖大鼠血清T、LH和PRL的影响（略）
4 讨论
脑内存在内源性阿片样物质，β-EP是内源性阿片肽的一种，为强力阿片肽受体激动剂，能抑制儿茶酚胺对心血管的效应，具有调节心血管和内分泌的活动[5]。吗啡有类似于内源性阿片样物质的功能，可竞争性地与β-EP受体结合，使促性腺素释放激素和促黄体生成素分泌减少，降低性腺功能；SP则广泛分布在神经系统中，能直接作用于组织引起疼痛，强而持久，阿片类依赖者往往引起SP的增加。
本研究证实，吗啡依赖大鼠下丘脑和血浆β-EP的含量明显减少，SP则与此刚好相反，而舒痛安汤和可乐定对上述2种物质可以进行双向调节。可乐定属于α2激动药，其中枢活性产生强效镇痛作用，但其作用的神经元部位和机理仍在争论之中。有资料认为，α2肾上腺素能激动药的作用机理与阿片机理相符合[6]，α2受体拮抗药Yohimbine减弱阿片全身用药和高位脊髓用药的抗伤害作用[7]，但纳络酮不能减弱可乐定鞘内用药的抗伤害作用。吗啡与可乐定虽有交叉耐受，但并不完全。舒痛安汤是纯中药制剂，它含有多种生物活性成分，可能有类似α2受体拮抗药作用。
阿片类依赖者存在性机能障碍及内分泌激素水平明显降低，并认为是由于海洛因对下丘脑-垂体-性腺轴抑制所致[8-9]。生理情况下，多巴胺促进PRL的分泌，阿片肽则抑制PRL分泌，二者相互作用，互相影响。对于阿片类依赖者来说，反复用药已使性激素分泌受到抑制，脱毒时应用阿片类物质替代疗法，虽能有效地抑制戒断症状，但在一定程度上加重了性机能障碍(可能增加了阿片类物质对性激素分泌的抑制作用)。
本研究显示，吗啡依赖雌性和雄性大鼠内分泌激素的变化是有差异的，雌性吗啡大鼠血清FSH、E2和PRL均有所降低，而雄性大鼠仅T降低，LH和PRL变化不显著。可乐定(除雌性大鼠PRL外)和舒痛安汤对上述低水平的性激素均有一定的升高作用。
中医学认为，阿片类物质最易耗气伤阴，损精耗液，依赖后可出现气虚、精亏、血瘀、火旺等症状，严重时元气耗竭，脏腑阴阳俱损。我们根据上述病机拟定戒毒脱瘾汤[10]，以黄连、黄柏、栀子清热解毒，排除毒邪；生地黄、牡丹皮凉血清营；川乌、细辛既可温肾壮阳以逐内寒，又可合延胡索、钩藤舒筋通络而止痛；当归补血汤加生地黄、鸡血藤，可益气养阴生血；另酌加山药、茯苓补脾益气而辅助后天之本，使气血生化之源得以补益。
综上，舒痛安汤对吗啡依赖大鼠下丘脑-垂体-性腺轴紊乱的激素有一定的调节作用，但其具体作用机制尚需进行深一步研究。
【参考文献】
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