关于原发性肾病综合征患者sIL┐2R，T细胞亚群及红细胞免疫功能的意义

【关键词】 肾病综合征
　　关键词: 肾病综合征;受体，白细胞介素2;T淋巴细胞;免疫，细胞
　　
　　摘 要:目的 观察原发性肾病综合征（PNS）患者细胞免疫功能变化. 方法 采用双抗体夹心ELISA法检测血清可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R），流式细胞仪测定外周血T细胞亚群（CD3+ ，CD4+ ，CD8+ ）及红细胞C3b受体花环（RBC-C3b RR）和红细胞免疫复合物花环（RBC-ICR）试验. 结果 原发性肾病综合征组sIL-2R明显高于对照组［（398±122）vs（202±84）pmol・L-1 ，P&<0.01］，T细胞亚群CD3+ ，CD4
+ ，CD8+ 较对照组明显降低（0.50±0.08）vs（0.71±0.07），（0.26±0.07）vs（0.36±0.07），（0.22±0.05）vs（0.31±0.06），P&<0.01，CD4+ /CD8+ 较对照组明显降低［（1.12±0.22）vs（1.32±0.30），P&<0.05］，RBC-C3b RR较对照组明显降低［（14.5%±3.7%）vs（21.4%±2.3%），P&<0.01］，RBC-ICR与对照组比较明显增高［（17.8%±5.2%）vs（8.8%±2.1%），P&<0.01］. 结论 原发性肾病综合征患者存在细胞免疫功能异常并参与发病.
　　
　　Keywords:nephrotic syndrome;receptors，interleukin-2;T-lymphocytes;immunity，cellular
　　
　　Abstract:AIM To investigate cellular immune function and　erythrocyte immune function in patients with primary nephrotic syndrome（PNS）.METHODS Soluble interleukin2receptors（sIL-2R）were detected by ELISA.T-lympho-cyte subsets（CD3+ ，CD4+ and CD8+ ）were also evaluated by flow cytometry（FCM）.The red blood cell C3b receptor rosette（RBC-C3b RR）and the red blood cell immune com-plexs rosette（RBC-ICR）were measured.RESULTS Serum sIL-2R levels were significantly higher in PNS than in normal controls ［（398±122）vs（202±84）pmol・L-1 ，P&<0.01）］，CD3+ ，CD4+ ，CD8+ were markedly decreased ［（0.50±0.08）vs（0.71±0.07），（0.26±0.07）vs（0.36±0.07），（0.22±0.05）vs（0.31±0.06）］respectively，（P&<0.01）.CD4+ /CD8+ ratios were lower than that in normal controls ［（1.12±0.22）vs（1.32±0.30），P&<0.05）］.RBC-C3b RR were significantly decreased ［（14.5%±3.7%）vs（21.4%±2.3%），P&<0.01）］.RBC-ICR were significantly increased ［（17.8%±5.2%）vs（8.8%±2.1%），P&<0.01）］.CONCLUSION Abnormal immune function may be important in the pathogenesis of PNS.
　　
　　0 引言
　　
　　研究发现，机体免疫功能的异常或紊乱是引起肾脏疾病的基础［1，2］ ，它在肾脏疾病的免疫发病机制中的作用日益受到重视［3，4］ .我们通过检测原发性肾病综合征（PNS）患者血清可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R），T细胞亚群及红细胞免疫功能，旨在探讨PNS患者细胞免疫功能变化的意义.
　　
　　1 对象和方法
　　
　　1.1 对象 PNS患者40（男22，女18）例，年龄16～64（平均40）岁，均为住院患者，通过实验检查及临床确诊.对照组20（男13，女7）例，年龄20～40（平均30）岁，血、尿常规及肝肾功能正常.
　　1.2 方法
　　
　　1.2.1 血清SIL-2R的测定 采用双抗体夹心ELISA法，试剂盒由第四军医大学免疫学教研室提供，具体操作步骤按说明书进行. 1.2.2 T细胞亚群的测定 取抗凝全血100μL，分别加10μL FITC标记抗CD3、抗CD4、抗CD8和IgG鼠单抗混匀，室温放置15min后，用QPREP自动细胞制备仪（Bekmn-coulter公司产品），加ABC液溶解红细胞和稳定淋巴细胞，轻轻摇荡10min立即用ProfileⅡ型流式细胞仪（美国Coullter公司产品）分析，所用激光光源为15mW氢离子激光，波长为A488nm ，检测1000个以上细胞.
　　
　　1.2.3 红细胞免疫功能的测定 采用C3b 受体花环（RBC-C3b RR）和红细胞免疫复合物花环（RBC-ICR）试验（第四军医大学免疫学教研室提供）.预备试验:将补体致敏的酵母和未致敏的酵母冻干试剂，按说明书要求溶解、洗涤，配制成1×1011 个・L-1 的密度;另取患者末梢血或肝素125kU・L-1 抗凝血1滴，加入2mL生理盐水，每次经2000r・min-1 离心3min后，配制成1.25×1010 个・L-1 密度的红细胞悬液.
　　
　　吸取致敏酵母菌悬液与未致敏酵母菌悬液各50μL，分别加入试管中，混匀，置37℃水浴中30min后取出涂片，加2.5g・L-1 戊二醛1滴，轻轻混匀，自然干燥，进行姬姆萨染色，用油镜（Olympus，日本产）观察.1个红细胞上结合两个或两个以上酵母菌者为1个阳性花环细胞，共计数200个红细胞，计算出RBC-C3b RR和RBC-ICR的百分率（%）.
　　
　　统计学处理:实验数据以x ±s表示，两组间比较采用t检验，用SPLM统计软件包进行统计分析.
　　
　　2 结果
　　
　　2.1 sIL┐2R及T淋巴细胞亚群的变化 PNS患者外周血sIL-2R水平较对照组明显增高，有显著差异（P&<0.01）.而T淋巴细胞亚群CD3+ ，CD4
+ ，CD8+ 较对照组明显降低，有显著差异（P&<0.01），CD4+ /CD8+ 较对照组明显降低，有显著差异（P&<0.05），说明细胞免疫异常（Tab1）.
　　
　　表1 sIL-2R及T淋巴细胞亚群的变化　略
　　
　　2.2 红细胞免疫功能的变化 PNS患者RBC-C3bRR明显低于对照组，有显著差异（P&<0.01）;RBC-ICR明显高于对照组，有显著差异（P&<0.01），说明红细胞免疫异常（Tab2）. 　　表2 红细胞免疫功能的变化　略
　　
　　3 讨论
　　
　　PNS是由原发性肾脏病引起，并非是细菌等致病因子直接侵犯肾脏引起，而是与免疫反应相关，当致病的抗原进入人体后，被吞噬细胞摄取，淋巴细胞对这些抗原进行识别引起免疫反应，造成肾小球损伤.目前已证实是一组免疫介导性疾病［5］ .T淋巴细胞亚群是构成机体免疫系统的重要因素，体内免疫平衡是通过辅助性T细胞CD4+ 和抑制性T细胞CD8+ 形成的T细胞网络来维持调节免疫功能的平衡［6］ ，二者的升高与降低，均可使两者的比例失调，导致机体免疫功能的异常或紊乱［7］ .免疫学研究证实，红细胞具有抗原提呈细胞作用，能促进T细胞的免疫功能，扩大细胞免疫效应，参与细胞免疫调控［8］ ，并能清除体内的免疫复合物，促进吞噬细胞的吞噬功能，调节体液免疫和细胞免疫，粘附自身的T细胞，增强T细胞免疫功能，更有效地清除免疫复合物［9］ .本资料显示PNS患者血清sIL-2R水平明显高于对照组（P&<0.01），CD3+ ，CD4+ 和CD8+ 与对照组比较明显降低（P&<0.01），CD4+ /CD8+ 与对照组比较降低（P&<0.05），表明在发病过程中，不仅周围血T淋巴细胞数量或功能异常，淋巴细胞亚群间比例失调，而且sIL-2R明显增高，均证明患者存在细胞免疫功能异常［10-12］ .PNS患者RBC-C3b RR与对照组比较明显降低（P&<0.01），RBC-ICR与对照组比较明显增高（P&<0.01），表明患者存在红细胞免疫功能异常.实验结果均证明PNS患者存在细胞免疫功能异常，引起免疫反应，造成肾小球免疫损伤.
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