【摘要】 目的 研究妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）患者胎盘组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达情况。方法 采用免疫组织化学染色技术， 检测37例ICP患者（ICP组）及33例正常妊娠妇女（正常妊娠组）胎盘组织中TNF-α的表达情况。结果 ICP组胎盘组织TNF-α的表达显著高于正常妊娠组（P&<0.05）。结论 TNF-α的表达与ICP的发生、发展有关。
【关键词】 妊娠期肝内胆汁淤积症 肿瘤坏死因子-α 免疫组织化学
Abstract: Objective To study the significance of TNF-α expression in the placenta in patients with intrahepatic cholestasis of pregnancy （ICP）. Methods The expression of TNF-α in placenta was investigated in 37 patients with ICP and 33 normal pregnant women by immunohistochemical method. Results The level of TNF-α expressed in ICP patients was higher than that in normal pregnant women （P&<0.05）. Conclusion The expression of TNF-α in placenta is related to the development of ICP， with its pathogenetic mechanism to be explored.
Key words: intrahepatic cholestasis of pregnancy； tumor necrosis factor-alpha; immunohistochemistry
妊娠期肝内胆汁淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy， ICP） 是好发于妊娠中、晚期的妊娠并发症，表现为孕妇肝内胆汁淤积、血胆汁酸增高、皮肤瘙痒和（或）黄疸， 在分娩后迅速消失，通常被认为是产科高危因素。细胞因子在ICP的研究中越来越受到人们的重视。肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor， TNF） 系统，特别是TNF-α是近年来被认识的一种重要的细胞因子，参与多种生理与免疫过程。为进一步了解TNF-α在ICP中的作用，本实验采用免疫组织化学（免疫组化）染色技术进行了胎盘组织中TNF-α表达的研究， 现将结果报道如下。
1 资料和方法
1.1 病例及分组 ICP组共37例，纳入标准参照
参考文献
［1］:①妊娠中、晚期出现局部或全身皮肤瘙痒，排除皮肤病;②血清甘胆酸水平升高，转氨酶轻、中度升高;③妊娠是引起皮肤疾病及生化异常的惟一原因;④排除乙肝、丙肝等造成的转氨酶升高;⑤症状、体征及生化异常在产后迅速消失或恢复正常。对照组为33例正常孕妇。2组孕妇均在我院就诊，其年龄、分娩孕周无显著性差异，排除了感染、血液病、肿瘤及肝肾疾病等。1.2 方法
1.2.1 胎盘标本的采集 胎盘娩出后立即在直视下剪取胎盘中央母体面、血管少的一小块组织（约30 mm×30 mm），生理盐水冲洗干净后，切成约15 mm×15 mm 组织块，常规固定。
1.2.2 制片 将固定的标本石蜡包埋，制成5 μm厚的切片，TNF-α免疫组化试剂盒由上海天呈生物技术有限公司提供，严格按说明书操作进行免疫组化染色。TNF-α在细胞质中表达，染色后呈现棕黄色颗粒。
1.2.3 TNF-α的阳性判断及分级标准 阴性对照用PBS代替一抗进行对照。TNF-α表达阴性和阳性根据细胞染色强度和染色细胞所占面积，即两者积分之和来判断。染色强度分为:不染色= 0，轻度染色=1，中度染色=2，强染色=3。染色面积分为:无细胞染色=0，&<25%细胞染色=1，25%～50%细胞染色=2，&>50%细胞染色=3。若积分之和=0，则表达为（-）；积分之和=1、2 则为（+）；积分之和=3、4，则为（++）；积分之和=5、6，则为（+++）。
1.3 统计学处理 应用SPSS软件包进行统计学检验，临床资料进行配对t检验，TNF-α免疫组化数据进行Wilcoxon秩和检验，P&<0.05为差异有显著性。
2 结 果
正常妊娠组及ICP组胎盘组织TNF-α的免疫组化检测结果见表1和图1、2。表1 2组胎盘组织TNF-α的免疫组化检测结果 3 讨 论
ICP是妊娠期特有并发症， 因其可导致早产、胎儿宫内窘迫增加围生儿死亡率，而备受关注［2］。ICP的发生、发展及临床过程较为复杂，至今其母婴死亡率仍较高。国外许多学者从不同方面对其发病机制进行探讨，目前仍无明确的结果［3］。妊娠时胎盘作为内分泌器官产生大量重要的细胞因子，这些细胞因子进入母体及胎儿血液循环，对代谢、免疫、血管等系统发挥多种作用。在整个妊娠期，这些细胞因子进行着复杂的平衡调节，维持了正常妊娠的过程。近年来研究表明，细胞因子作为参与免疫反应的重要介质，在ICP的发生、发展过程中起重要的作用［4-5］。TNF-α主要是由单核-巨噬细胞分泌，其他类型的细胞，如淋巴细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞等在一定条件下也具有产生和释放TNF-α的能力，其主要通过受体发挥作用，参与多种生理与免疫过程。妊娠期TNF-α主要由胎盘和脂肪组织合成和分泌［6］。
本实验结果提示，TNF-α在ICP胎盘中的表达较正常胎盘组织明显增强，TNF-α在ICP胎盘中表达上调。是何种原因导致TNF-α在ICP胎盘中表达升高尚不清楚。推测，TNF-α可能引起胎盘滋养细胞凋亡增加，使螺旋动脉受损，导致胎盘缺血缺氧，进而引起胎盘代谢障碍；ICP患者胎盘合成和分泌TNF-α功能失调， 可能是ICP的发病原因之一。
【参考文献】
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