关于生脉胶囊对压力超负荷慢性心衰大鼠心室重构的影响

代写论文网： 　　　　　　作者：邓元江， 梁伟雄， 张卫， 郑亚莉， 程淑意， 陈云波， 刘卫英

【摘要】 【目的】观察生脉胶囊对压力超负荷慢性心力衰竭（ＣＨＦ）大鼠心室重构的影响。【方法】ＳＤ大鼠７５只，采用腹主动脉缩窄法复制大鼠慢性心力衰竭模型，设立假手术组、心衰模型组、生脉胶囊组、卡托普利组、生脉胶囊加卡托普利组，分组治疗７周时进行超声心动图检查，以左室舒张末期内径（dLVD）、室间隔舒张末期厚度（pST）、舒张末期容积（VED）、射血分数（pEF）、左室短轴缩短率（pFS）为指标，并计算左室质量指数（Im，LV）。【结果】模型组Im，LV、dLVD、pST、VED值均高于假手术组（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０１），生脉胶囊、卡托普利、生脉胶囊加卡托普利均能使其降低（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０１），且作用相同；模型组pEF、pFS均低于假手术组（Ｐ＜０.０１），生脉胶囊、生脉胶囊加卡托普利均能提高pEF值（Ｐ＜０.０１），且生脉胶囊加卡托普利的作用优于卡托普利（Ｐ＜０.０５）；生脉胶囊、生脉胶囊加卡托普利均能提高pFS值（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０１）。【结论】生脉胶囊可改善慢性心力衰竭大鼠的心脏射血功能和心脏结构，具有抗心室重构的作用。
【关键词】 生脉胶囊／药理学； 心力衰竭，慢性／中药疗法； 心室重构； 超声心动图； 疾病模型，动物； 大鼠

　　慢性心力衰竭（chronic heart failure，ＣＨＦ）是由于心室功能失常及病理重构而导致的渐进性综合征，是各种心脏疾病发展的严重阶段。心室重构是心力衰竭发生和发展的病理生理基础［１］。生脉胶囊是治疗慢性心衰的有效中药制剂，其作用机制尚不明确，本实验采用腹主动脉缩窄法复制大鼠慢性心力衰竭模型，并观察了生脉胶囊对压力超负荷慢性心衰大鼠心室重构的影响，现报道如下。
　　1 材料与方法
　　1.1 动物与分组
　　
　　雌性ＳＤ大鼠７５只，体质量为１９０～２１０g，ＳＰＦ级，由广州中医药大学实验动物中心提供，许可证号：ＳＹＸＫ（粤）２００３-０００１。将大鼠随机分为假手术组、心衰模型组、生脉胶囊组、卡托普利组、生脉胶囊加卡托普组（简称生脉加卡托组），每组１５只。因大鼠在造模后部分死亡，又补做１８只，共用大鼠９３只。大鼠的饲养、造模、治疗均在广州中医药大学实验动物中心ＳＰＦ级实验室完成。
　　1.2 主要仪器
　　
　　ＡＥＧ-１２０型电子天平（日本岛津公司）；PHILIPS5500彩色多普勒超声诊断仪（美国）。
　　1.3 药物与试剂
　　
　　生脉胶囊（正大青春宝药业有限公司提供，0.３g／粒，由人参、麦冬、五味子组成，批号：０５０３００３）；卡托普利片（汕头金石制药总厂，２５mg/片，批号：０５０９０１）；注射用青霉素钠（哈药集团制药总厂，批号：Ｃ０５０５１２１２）；乌拉坦（上海曹杨第二中学化工厂，批号：０５０４０３）；水合氯醛（上海青析化工科技有限公司，批号：２００５０１１７）。
　　1.4 造模方法
　　
　　采用腹主动脉缩窄法复制慢性心力衰竭大鼠模型［２-３］。大鼠以１００g/L乌拉坦（１０mL/kg）麻醉后，仰卧固定，上腹部正中剪毛，络合碘消毒手术野，铺无菌孔巾，从剑突至脐正中作一皮肤切口，钝性分离肌肉，打开腹腔，将胃、肠轻轻牵拉在腹腔外，于双侧肾动脉上方钝性分离腹主动脉，然后在腹主动脉下穿一根４号医用丝线，将一个去掉针尖的直径为０.８０mm的８号注射针头紧贴腹主动脉平行放置，将针头与腹主动脉一起结扎紧后，轻轻抽出针头，使该处腹主动脉横切面积缩窄为原来的４０％～５０％左右，将胃肠等脏器回纳于腹腔内，缝合腹壁。术后腹腔注射青霉素钠（１×104U/只），每天１次，共５d，预防感染，常规饲养，造模时间为７周。假手术组只是在双侧肾动脉上方的腹主动脉下穿线，然后打一较大的松结而不缩窄腹主动脉，其他同模型组。
　　1.5 给药方法
　　
　　生脉胶囊组将生脉胶囊用蒸馏水配成混悬液，按成人２.７g/d的剂量根据贺氏［４］剂量—体表面积换算成大鼠剂量的２倍灌胃。假手术组和心衰模型组均以等容积蒸馏水灌胃。卡托普利组将卡托普利片用蒸馏水配成混悬液，按成人１５０mg/d的剂量根据体表面积换算成大鼠剂量的２倍灌胃。生脉胶囊加卡托普利组按大鼠体表面积换算剂量的２倍以生脉胶囊和卡托普利片混悬液灌胃。各组均于造模后第５０天开始给药，每天上午灌胃１次，连续７周。
　　1.6 大鼠超声心动图检查
　　
　　治疗７周时进行大鼠超声心动图检查。以１００g/L水合氯醛按４mL/kg腹腔注射进行麻醉后，固定于鼠板上，剃净胸毛，采用彩色多普勒超声诊断仪，探头频率为８MHz，鼠板左侧倾斜３０℃，将探头置于胸骨左侧，选取标准左室乳头肌短轴切面和长轴切面结合Ｍ型和多普勒超声进行检查，测量左室舒张末期内径（left ventricular end-diastolic dimension，dLVD）、室间隔舒张末期厚度（interventricular septum end-diastolic thickness，pST），计算舒张末期容积（end-diastolic volume，VED）、射血分数（ejection fraction，pEF）、左室短轴缩短率（left ventricular fraction shortening，pFS），均取连续３个心动周期的平均值，超声检查采用双盲法由专人负责完成［5-6］，以评价大鼠心脏的结构和功能。
　　1.7 左室质量指数的计算［７］
　　
　　治疗７周后，经心脏超声检查后，以１００g/L水合氯醛麻醉后固定，开胸，摘取心脏，以冰冷的生理盐水冲洗去血液，小心剪去连接心脏的血管，用滤纸吸干水，迅速以电子天平称全心质量；沿房室交界处剪去心房，沿两心室间交界处剪去右心室后称质量，即为左心室质量（mLV，包括室间隔）。左室质量指数Im，LV=mLV/mbody。
　　1.８ 统计学处理
　　
　　采用统计分析软件ＳＰＳＳ　１１.５ for Windows 进行统计学处理，多组均数比较用方差分析法。经方差分析，组间总体差异有显著性意义，满足正态性和方差齐性时，两两比较用ＬＳＤ法；方差不齐时，选用DunnettsＴ３法。
　　2 结果
　　2.1 各组大鼠的死亡情况
　　
　　共有７８只大鼠采用了腹主动脉缩窄法造模，手术造模后３～４d死亡数较多，１周内死亡２１只，死亡率为２６.９2％；造模７周时的死亡率为３２.０５％；实验结束时（治疗７周）造模大鼠的总死亡率为４７.４４％。大鼠的死亡是因造模后心衰所致，１周内死亡的是急性心衰所致；心衰后期大鼠气急而喘，体质量锐减。治疗期间生脉胶囊组死亡２只，卡托普利组死亡３只，生脉加卡托组死亡４只。
　　2.2 生脉胶囊对心衰大鼠左室质量指数的影响
　　
　　从表１可知，模型组大鼠的左心室质量（mLV）和左室质量指数（Im，LV）均高于假手术组（Ｐ＜０.０１），生脉胶囊组、卡托普利组、生脉加卡托组2项指标均低于模型组（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０１），但３个治疗组间比较差异均无显著性意义（Ｐ＞０.０５）。提示造模后大鼠左心室肥厚，质量增加，而生脉胶囊、卡托普利、生脉加卡托普利均能有效减轻左心室的肥厚，具有减轻心室重构的作用。
　　2.３ 生脉胶囊对心衰大鼠左室舒张末期内径、舒张末期室间隔厚度、左室舒张末期容积的影响
　　
　　由表２可知，模型组的dLVD、pST、VED均大于假手术组（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０１），生脉胶囊组、卡托普利组、生脉加卡托组的３项指标均小于模型组（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０１），而３组间各指标的两两比较差异均无显著性意义（Ｐ＞０.０５）。表明生脉胶囊能减轻压力负荷增大所致慢性心衰大鼠左心室的肥厚、减少心衰大鼠舒张末期容积，有抗心室重构的作用。
　　2.４ 生脉胶囊对心衰大鼠射血分数、左室短轴缩短率的影响
　　
　　由表３可知，模型组pEF值显著低于假手术组（Ｐ＜０.０１），生脉胶囊组、生脉加卡托组pEF值均高于模型组（Ｐ＜０.０１）；生脉加卡托组则高于卡托普利组（Ｐ＜０.０５）。模型组pFS显著低于假手术组（Ｐ＜０.０１），生脉胶囊组、生脉加卡托组pEF值均高于模型组（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０１）；卡托普利组也有高于模型组的趋势（Ｐ＞０.０５）。以上结果提示生脉胶囊可提高慢性心衰大鼠左室射血分数及左室短轴缩短率，增强左室射血功能。
　　表1 各组大鼠左室质量指数变化比较（略）
　　Table 1 Comparison of left ventricular mass index in various groups
　　①Ｐ＜０.０１，与假手术组比较；②Ｐ＜０.０５，③Ｐ＜０.０１，与心衰模型组比较
　　表2 各组大鼠超声心动图指标变化比较（略）
　　Table 2 Comparison of echocardiographic parameters in various groups
　　①Ｐ＜０.０５，②Ｐ＜０.０１，与假手术组比较；③Ｐ＜０.０５，④Ｐ＜０.０１，与心衰模型组比较
　　表3 各组大鼠射血分数、左室短轴缩短率的变化比较（略）
　　Table 3 Comparison of EF and FS in various groups
　　①Ｐ＜０.０１，与假手术组比较；②Ｐ＜０.０５，③Ｐ＜０.０１，与心衰模型组比较；④Ｐ＜０.０５，与卡托普利组比较
　　3 讨论
　　
　　生脉散是中医传统名方，又称生脉饮，由人参、麦冬及五味子组成。生脉胶囊是生脉散的新剂型，具有益气复脉、养阴生津的功能，用于气阴两亏之心悸气短、脉微自汗，是临床常用治疗心力衰竭的中药制剂。
　　
　　心室具有随着心脏血液动力学负荷的长期变化而改变其大小和结构的能力。不管外部形态还是内部结构，心室腔的质量和容量与所需的外在做功保持密切的关系。在长期压力和容量负荷过重的病理状态下，心腔的重构与施加于它的血液动力学负荷有关。心脏质量的增加归因于纤维增生，这些附属收缩组织的重组方式导致离心性心室生长或向心性的生长方式。20世纪90年代中期以后，已认识到导致CHF发生发展的基本机制是心室重构［8］。心室重构是在原发性心脏损害、心脏负荷过重的基础上，由一系列复杂的分子和细胞机制导致心脏结构、功能、表型的变化，临床表现为心脏大小、形状和功能变化［9］。
　　
　　心力衰竭是心肌病变和心室重构不断进展的过程，为多种原因所致心肌损害，可引起心肌质和量的变化，心室腔扩大，心腔几何形状改变，心肌细胞肥大、细胞凋亡及不断衰竭的泵功能。心室重构是心衰形成和进展的重要原因，是心衰患者发病率及病死率的决定因素，造成心肌收缩力的降低和心肌僵硬度的增加。基于这种理论，心衰治疗的重点就是减轻并逆转心室的重构。近20年来，血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）已经被证实可以降低左室收缩功能障碍心衰患者的发病率和死亡率，实验室和临床数据都支持ACEI能有效限制心室重构，特别对于心肌梗死后的心衰患者［10］。 转贴于 　　本实验结果表明，心衰模型组大鼠的左心室质量（mLV）及左室质量指数（Im，LV）均高于假手术组（Ｐ＜０.０１），提示大鼠在压力超负荷的作用下心肌发生了适应性的变化，产生肥厚，导致mLV增加和Im，LV的增高；生脉胶囊能明显降低Im，LV，减轻心肌组织的肥厚和心室的重构，其作用与卡托普利相当。
　　
　　超声多普勒检查可以全面无创地定量估测或定性分析心脏功能，根据流量指标每搏量 （SV）和心输出量（CO）、泵功能指标射血分数（pEF）和左室短轴缩短率（pEF）检验左心室收缩功能，根据速度指标E／A比值有效评价左心室舒张功能［11］。慢性心功能不全导致心脏收缩、舒张功能障碍，心脏收缩功能不全以pEF、pFS、SV、CO降低为特征，心脏舒张功能不全以E／ A比值下降，心室充盈障碍为特征［12］。本实验结果表明，心衰模型组pEF、pFS值均低于假手术组，心脏射血功能降低，而生脉胶囊、生脉胶囊加卡托普利治疗后均能提高pEF与pFS值，并提示生脉胶囊加卡托普利提高pEF值的作用要优于单用卡托普利，由此可知生脉胶囊可提高慢性心衰大鼠左室射血分数及左室短轴缩短率，增强左室射血功能。
　　
　　大鼠超声心动图检查结果提示，心衰模型组舒张末期左室内径、室间隔厚度及左室舒张末期容积均增加，表明心衰模型组大鼠心肌肥厚、且左心室腔扩大，发生了形状和容积的改变，产生了明显的心室重构现象。而生脉胶囊可以缩小dLVD 与VED， 减少pST ，具有明显的抗左心室重构的作用，其作用与公认的抗心室重构药卡托普利［13-14］相仿。
　　
　　沈亚梅等［15］用二维及多普勒超声技术探讨了生脉胶囊对充血性心力衰竭患者左室重构及心功能的影响，结果表明常规西药对照组VED及左室收缩末期容积（VES）仅在治疗后6个月时较治疗前缩小，生脉胶囊治疗组VED和VES治疗后3个月较治疗前及治疗后6个月较治疗后3个月均明显减小，且与对照组比较有显著性意义。两组收缩和舒张功能指标治疗后各有不同程度的改善，但以生脉胶囊组为甚，认为生脉胶囊可抑制充血性心力衰竭患者的左室重构，改善左室收缩和舒张功能，与本实验研究结果相符。
　　
　　近年来的研究表明，有些中药具有一定的抗心室重构的作用。马路等［16］的研究表明，参芪扶心口服液能改善心梗后心衰大鼠左室舒缩功能，有一定的抑制左室重塑作用。蔡辉等［17］的实验结果表明补肾为主的中药复方鹿角方具有逆转充血性心力衰竭心肌纤维化的作用及逆转左心室重构的作用。心肌康（黄芪、丹参、瓜蒌、法半夏、牛膝）可逆转高血压左室肥厚，减小室间隔厚度（pST）和左室后壁厚度（dPWT）［18］。灯盏细辛也可逆转高血压大鼠的左心室肥厚，明显降低左心室质量/体质量（mLV/mB），改善心肌细胞肥大、变性等镜下结构，且作用优于依那普利和福辛普利［19］。
　　
　　生脉类制剂辅助治疗慢性心力衰竭的临床报道较多，主要为有关临床疗效、心功能、血液流变学、血流动力学等方面，尚少见到其抗慢性心衰心室重构作用研究的报道。本实验证实了生脉胶囊对慢性心力衰竭大鼠有减轻心室重构的作用，有益于推动生脉胶囊更好地应用于慢性心衰的治疗，改善其临床症状和阻止心衰的发展。
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