联合检测抗核抗体、抗ENA 谱、抗dsDNA抗体对SLE的临床价值分析

　　　　　　 作者：罗斌，曾永龙，黄玮，韦彩成

【摘要】 　　目的 探讨联合检测抗核抗体（ANA）、抗可提取性抗原抗体（抗 ENA ）及抗双链DNA抗体（抗dsDNA）对系统性红斑狼疮(SLE)的临床价值。方法 ANA采用间接免疫荧光检测，抗dsDNA抗体采用胶体金斑点渗透法检测，抗ENA谱采用免疫印迹法。结果 SLE组ANA阳性率为94.44%，抗dsDNA抗体阳性率为63.33 %，抗Sm抗体阳性率为50.00%，对照组中只有ANA的阳性率为6.67％，其他抗体均为阴性。结论 ANA、抗dsDNA 抗体和抗Sm抗体可作为检测SLE的标志性抗体，联合检测可避免因单项检测出现的漏诊情况，提高SLE的检出率，对病情的诊断分型、治疗、追踪和预后判定均有重要价值。

【关键词】 系统性红斑狼疮 抗核抗体 抗ENA 抗ds DNA抗体

　　系统性红斑狼疮（SLE）是一种常见的多系统受损的自身免疫性结缔组织病，其显著临床特点之一表现为B淋巴细胞高度的活化而产生多种针对自身组织包括细胞核及各种核成分、细胞膜、细胞浆、各种组织成分的自身抗体，检测这些自身抗体，尤其是联合检测抗核抗体(ANA)、抗盐水可提取性核抗原抗体(抗ENA)、抗双链DNA抗体(抗dsDNA)对SLE诊断具有十分重要的意义。我们回顾性分析了90例SLE患者的ANA、抗dsDNA 抗体、抗ENA检测结果，并与30例健康体检者进行对照比较，目的是探讨上述三种抗体联合检测对诊断SLE的诊断价值。　　

　　资料与方法　　

　　1.对象

　　90例SLE患者来自2007年1月至2009年1月两年间在我院血液风湿科及内科门诊确诊的病人，所有患者均符合1982年美国风湿病学会（ARA）制定的SLE诊断标准。其中女82例，占91.11%，男8例，占8.89%，年龄12～63岁，平均33岁。对照组30例，男5例，女25例，均为健康查体者。

　　2.方法

　　ANA采用间接免疫荧光法，试剂选用欧蒙(德国)医学实验诊断股份有限公司生产的HEp2/猴肝生物薄片马赛克ANA间接免疫荧光法检测试剂盒，操作步骤按照说明书进行，结果判断：荧光显微镜下HEp2细胞核或浆位置出现特异性绿色荧光染色为ANA阳性。抗 dsDNA抗体采用胶体金斑点渗透法检测，由潍坊康华公司提供。抗ENA采用免疫印迹法，由德国欧蒙公司提供，操作严格按照说明书进行。

　　3.统计学处理

　　用SPSS13.0统计软件分析资料，数据的各种率比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

　　结果　　

　　ANA、抗dsDNA抗体、抗ENA谱检测结果，ANA、抗dsDNA、抗Sm、抗nRNP/Sm、抗SSA、抗SSB与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05)，见表1；SLE组和对照组间接免疫荧光法检测ANA核型结果，SLE组以核颗粒型、核均质型和浆颗粒型为主，对照组2例均为核颗粒型，见表2。表1 SLE组与对照组ANA、抗ENA谱、抗dsDNA抗体检测结果 n(略)表2 SLE组和对照组间接免疫荧光法检测ANA结果n(略)

　　讨 论　　

　　系统性红斑狼疮是一种典型的自身免疫性疾病，临床表现常不典型，实验室通过对自身抗体的检测有助于临床诊断。目前临床诊断SLE的主要实验室指标有ANA、抗dsDNA和抗ENA。ANA 是一组具有多种细胞核成分的自身抗体，检测ANA对SLE的诊断有较高的敏感性，其阳性率可达到90%以上，但其特异性较差，SLE、硬皮病、干燥综合征、类风湿性关节炎等疾病均可能导致ANA阳性，少数正常人也可呈阳性反应［1］，不能单独作为SLE的诊断标准，只能作为自身免疫性疾病的初筛试验［2～5］。本文结果显示SLE组ANA、抗dsDNA及抗ENA的阳性率分别为94.44%、63.33%、50.00%，而健康对照组阳性率非常低，除了ANA为6.67%外，抗dsDNA、抗ENA阳性检出率均为0，与李琪玲等学者［1～5］报道比例接近。

　　2000年日本的一份国际临床质控资料显示，目前实验室检测ANA的金标准仍是应用间接免疫荧光技术，采用HEP2细胞作为抗原底物。间接免疫荧光法检测ANA，因其基质中含有完整的抗原谱(如细胞核和细胞浆抗原)，可检测到几乎所有的ANA。如果存在ANA，就会在细胞中抗原相应的位置出现荧光反应，产生特征性的荧光模型，有一定临床参考价值［2］。某种荧光模型常伴有特定的ANA和自身免疫病，椐此可以初步区分很多ANA。目前发现抗nRNP/Sm、抗Sm、抗ssA、抗ssB等存在时荧光模型为核颗粒型；抗dsDNA、抗核小体抗体和抗组蛋白抗体为核均质型；细胞浆中抗核糖体P蛋白抗体为浆颗粒型等。因此，测出是哪一种抗体， 哪一种核型， 对疾病的诊断有很大的帮助［6］。由表2可以看出，90例SLE组中有85例ANA阳性，其中核型主要为核颗粒型62.4%、核均质型23.5%和浆颗粒型10.6%。在30例健康对照组中有2例ANA阳性，均为核颗粒型。说明本地区SLE患者ANA的核型是以核颗粒型、核均质型和浆颗粒型最为常见。

　　 抗DNA抗体又称抗脱氧核糖核酸抗体，一般可分为抗双链DNA抗体和抗单链DNA抗体两种。抗双链DNA抗体(dsDNA)几乎仅见于SLE，且与病情活动有关，特别是与活动性狼疮肾炎密切相关。抗dsDNA抗体的反应位点位于DNA脱氧核糖磷酸骨架上，对SLE有较高的特异性［7］，我国和美国已将抗dsDNA作为诊断SLE的标准之一。有报道：抗dsDNA抗体滴度与SLE活动性呈正相关［8］；如果在健康人血清中检测到此抗体，其中85%在五年内发展为SLE［3，7］。本文统计SLE组抗dsDNA阳性率为63.33%，对照组为0，与吴东海［2］、 谭立明［6］等报道相符，所以检测抗dsDNA抗体对诊断SLE的有重要意义。

　　抗ENA又称抗可提取性抗原（ENA）抗体，属于抗非组蛋白抗体，包括抗Sm抗体、nRNP抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl70抗体、抗Jo1抗体等多种自身抗体。不同的抗ENA抗体在各种CTD中的阳性率有明星差异，有些自身抗体属某些疾病的标记性抗体或特异性抗体，对自身免疫性疾病的诊断与鉴别诊断有极为重要的意义。有研究认为Sm抗体是SLE的特异性标志之一［7，9］，其对SLE的诊断阳性率虽不高，但有高度的特异性，对SLE早期症状不典型，低滴度或ANA阴性的SLE患者更具有实际意义，也有研究认为Sm 抗体阳性是发生狼疮性肾炎的特异指标之一［10］。本次研究发现，SLE组抗Sm的阳性率为61.11%，与陈明等［5］的报道相符，尽管抗Sm对SLE的阳性率不高， 但抗Sm不会在其他疾病和正常人群出现，1982年美国风湿病学会将抗Sm抗体列为SLE诊断依据之一。由表1可知，SLE组血清中可检出多种自身抗体，ANA阳性率高达94.44%，抗dsDNA阳性率为63.33%，抗Sm阳性率为50.00%，以上三种自身抗体均比其他抗体阳性率高，经统计学分析，差异有统计学意义(P＜0.05)。由此可知，抗Sm、抗dsDNA抗体和ANA可作为诊断SLE的可靠性指标，此三类抗体联合检测在SLE的诊断中有互补性，可提高检出率及准确性，对SLE的病情判定，追踪和预防有重要作用。

　　综上所述，对ANA、抗 dsDNA和抗ENA抗体等自身抗体的检测，对自身免疫性疾病的诊断具有较高意义，应用ANA、抗dsDNA、抗ENA抗体联合检测在SLE诊断中具有互补性，可提高检出率。对SLE的诊断、分型、治疗、预后判定、病情追踪随访等均有重要的临床价值。且该实验操作简便、快捷、有较高的准确性、特异性，是医院实验诊断自身免疫性疾病的好方法。

参考文献

　　［1］李琪玲.抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗ENA抗体联合检测在自身免疫疾病中的价值［J］.现代西医结合">中西医结合杂志，2006，15（10）：1377.

　　［2］吴东海.风湿病的实验室检查［J］.中华内科杂志，1998，37(5)：353-354.

　　［3］孟博，张志斌.抗核抗体在自身免疫性疾病的检测及应用［J］.放射免疫学杂志，2006， 19 (1)：78-79.

　　［4］王国丽，王有为，肖莎丽，等. 614例系统性红斑狼疮自身抗体检测结果分析［J］.中国中西医结合皮肤性病学杂志，2005，4（3）：174-175.

　　［5］陈明，马庆海，赵红梅，等.系统性红斑狼疮患者自身抗体及免疫功能检测分析［J］.齐鲁医学检验，2005，16（3）：47.

　　［6］谭立明，吴越，陈炜.ANA、dsDNA抗体联合检测自身免疫病的临床应用研究［J］.江西医学检验，2005，23(5):408-410.

　　［7］陈曼丹， 陈林兴.抗核抗体谱在自身免疫性疾病的检测及应用［J］.实用医技杂志，2005，12(2)：302-303.

　　［8］辛琳琳，马静霖，司晓青，等.抗核抗体、抗 ENA 抗体、抗dsDNA 抗体联合检测对SLE的诊断意义［J］.中国麻风皮肤病杂志，2005，21（5）：371-372.

　　［9］杨卫平，付 敏.ENA多肽抗体检测及临床意义［J］.中原医刊，2005，12：23-32.

　　［10］Ilic T，Curec S.AntiiRNP antibodies and lupus nephritis［J］.Med Pregl， 2000，53:589-594.