敦煌石室大宝胶囊对衰老大鼠脑组织单胺类神经递质的影响

　　　　 作者：程容 段永强 成映霞 梁玉杰 王道坤

【摘要】 目的 观察敦煌石室大宝胶囊(DHDB)对衰老模型大鼠脑组织单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA) 和5羟色胺(5HT)含量的影响。方法 采用D半乳糖建立大鼠衰老模型，测定大脑皮层内的NE、DA和5HT含量。结果 模型组大鼠脑组织内NE、DA、5HT含量与空白组比较均有明显降低(P<0.05)，应用DHDB治疗后，治疗组大鼠脑组织内NE、DA、5HT含量均显著增高(P<0.05)。结论 DHDB可提高衰老模型动物脑组织单胺类神经递质的含量，对改善大脑功能有一定的作用。

【关键词】 单胺类神经递质;衰老模型;大鼠;敦煌石室大宝胶囊

　　【Abstract】 Objective To explore the effect of Dunhuangdabao (DHDB) on monoamine neurotransmitter 〔norepinephrine (NE) ， dopamine (DA) and 5hydroxytryptamine (5HT)〕 levels in the brain tissue of aging model rats. Methods The subacutely aging model rats were made by injecting Dgal into abdominal cavity continually， and cerebral cortex NE， DA， and 5HT levels were evaluated. Results The NE， DA and 5HT levels in model group were significantly downregulated compared with those in normal group (P<0.05，P<0.05，P<0.05). After treated with DHDB， NE， DA and 5HT levels were significantly upregulated (P<0.05，P<0.05，P<0.05). Conclusions DHDB can upregulate monoamine neurotransmitter levels in the brain tissue of aging model rats and plays an important role in improving cerebral function.

　　【Key words】 Monoamine neurotransmitter; Aging model; Rats; Dunhuang Shishi Dabao Capsule (DHDB)

　　 敦煌石室大宝胶囊(Dunhuang ShishiDabao Capsule，DHDB)是由熟地、黄芪、当归、茯苓、大黄等药物组成，具有强肾填精、健脾益气、涤痰祛瘀、安和五脏的功效。DHDB能降低脑组织单胺氧化酶B(MAOB)活性，提高谷胱甘肽过氧化酶(GSHPx)，Na+K+ATP 酶活性，具有调节脑细胞能量代谢、保护脑细胞的功能〔1，2〕。而神经递质含量变化是神经系统衰老的主要指标之一〔3〕，本研究观察了DHDB对衰老模型大鼠脑组织单胺类神经递质变化的影响。

　　1 材料与方法

　　1.1 动物与分组 SPF级Wistar大鼠，雌雄各半，3月龄，体重180±20 g，由甘肃中医学院医学实验中心提供〔SPF级动物合格证号：SCXK(甘)200400060000201;SPF级实验设施合格证：SYXK(甘)2004006000092〕。受试动物按体重编号，用随机数字表法〔4〕分为空白对照组、模型组、DHDB大、中、小剂量组、桂附地黄丸组(表示为“阳性对照组Ⅰ”)，每组8只，雌雄各半分笼饲养。

　　1.2 造模方法 亚急性衰老模型造模方法〔5〕：空白对照组每日皮下注射等量生理盐水外，其余各组受试动物颈部皮下注射D半乳糖(0.125 g/kg)，每日1次，连续40 d。灌胃给药:空白对照组、衰老模型组给予同体积蒸馏水灌胃;DHDB大、中、小剂量组分别予0.8，0.4和0.16 g·kg-1·d-1 DHDB药剂灌胃，等效剂量按人与动物体型系数折算〔6〕 (相当于成人剂量的10倍、5倍和2倍);给予阳性对照组Ⅰ 0.4 g·kg-1·d-1桂附地黄丸药剂灌胃(相当于成人剂量的5倍)。各组均以蒸馏水、标准饲料喂养。连续灌胃40 d。

　　1.3 试剂与仪器 DHDB(院内制剂);桂附地黄丸(兰州佛慈制药厂生产，批号20040925);去甲肾上腺素测试盒(NE，批号：RT110371);多巴胺测试盒(DA，批号：RT110371);5羟色胺测

　　试盒(5HT，批号：RT110371);酶联免疫检测仪(Benchmarkpuls，美国Biorad);快速混匀器(XK96A); 数显恒温水浴锅(HH4，郑州杜甫仪器厂)。

　　1.4 标本制备 各组动物最后1次灌胃，禁食不禁水24 h后全部杀检。脑组织匀浆制备：采血后断头处死，低温条件下快速取脑组织，以冰冷的生理盐水冲洗，滤纸吸干，称重后置于匀浆器中用9倍生理盐水匀浆(匀浆器的末端置于放冰块的冷水中)，后以3 500 r/min离心10 min，取上清液4℃保存，待测。

　　1.5 统计学处理 采用SPSS13.0统计软件，实验数据以x±s表示，多组间比较用单因素方差分析，组间两两比较用LSD分析，方差不齐时用Dunnett方法分析。

　　2 结 果

　　2.1 DHDB对衰老模型大鼠脑组织NE含量的影响 与空白对照组比较，模型组大鼠脑组织NE计数水平显著降低(P<0.05);与模型组比较，DHDB各组大鼠脑组织NA计数水平显著升高，且以DHDB大剂量组作用为优(P<0.05)，见表1。

　　2.2 DHDB对衰老模型大鼠脑组织DA含量的影响 与空白对照组比较，模型组大鼠脑组织DA计数水平显著降低(P<0.05);与模型组比较，DHDB大剂量组大鼠脑组织DA计数水平显著升高(P<0.05)，见表1。

　　2.3 DHDB对衰老模型大鼠脑组织5HT含量的影响 与空白对照组比较，模型组大鼠脑组织5HT计数水平显著降低(P<0.05);与模型组比较，DHDB小剂量组大鼠脑组织5HT计数水平显著升高(P<0.05)，见表1。表1 DHDB对衰老模型大鼠脑组织NE、DA及5HT含量的影响(与空白对照组相比较：1)P<0.05;与模型组比较：2)P<0.05

　　3 讨 论

　　中枢神经系统是人体功能的主要调节者。机体衰老的发生与神经系统内部的变化相关，神经系统发生老化后必将影响其他系统功能的正常发挥，从而出现相应的老化及衰老现象。由于增龄性神经元树突、轴突、突触的退变，神经细胞的丢失，必然引起作为介质发挥生物学效应的神经递质的增龄性改变〔7〕。中枢单胺能神经系统作为最重要的中枢递质系统，其增龄性改变在老化过程中的重要性日益受到重视。单胺类神经递质包括DA、NE和5HT等，具有广泛的生物学效应。研究表明〔8〕脑内DA系统与躯体运动、行为、觉醒、情感等的调节有关，表现为整体行为兴奋作用，并参与记忆痕的再现。NE能神经元参与调整整个大脑皮层兴奋状态，对觉醒、感觉、情绪和高级认知功能产生广泛的影响。中枢5HT对睡眠调节起主导作用，并与精神活动、感觉体温调节、高级认知功能有关。但随着年龄的增加，中枢神经递质含量发生明显变化，DA、NE、5HT等神经递质的活性和转换率有不同程度的降低，出现学习、记忆、运动、感觉、情绪、睡眠等障碍。单胺类神经递质的含量及活性降低，特别是NE活性降低能引起与年龄相关的记忆力减退。

　　现代药理学证明熟地黄、黄芪、当归均对神经系统功能具有调节作用〔9～11〕。本实验结果提示大鼠脑内单胺类递质水平存在明显的增龄衰老性变化，其递质含量以下降为主;DHDB能提高衰老模型大鼠大脑皮质单胺类神经递质含量，使作为神经元之间信息传递媒介的神经递质含量趋于正常，改善大脑皮层兴奋性，发挥其正常生物学效应，调节各组织器官功能，适应内外环境变化，从而保护大脑功能。

参考文献

　1 段永强，程 容，成映霞，等.敦煌石室大宝胶囊对衰老大鼠血清MDA含量、SOD，脑组织GSHPx活性的影响〔J〕.兰州大学学报(医学版)，2005;31(2)：202.

　　2 段永强，成映霞，雷作汉，等.敦煌石室大宝胶囊对衰老大鼠脑组织MAOB、Na+K+ATP酶活性的影响〔J〕.甘肃中医学院学报，2005;22(3)：269.

　　3 陈 勤.抗衰老研究实验方法〔M〕.北京：中国医药科技出版社，1996：6185.

　　4 苗明三.实验动物和动物实验技术〔M〕.北京：中国中医药出版社，1997：142.

　　5 曲长江，林庶如，夏淑杰，等.苦寒泻下两种脾虚模型的免疫学比较研究〔J〕.辽宁中医杂志，1999;26(3)：133.

　　6 陈 奇.中药药理研究方法学〔M〕.北京：人民卫生出版社，1993：334.

　　7 傅晓晴，蔡宗苇，杨显荣.人参延缓中枢神经系统衰老的生理调节治疗作用的研究〔J〕.中医药学刊，2003;21(7)：10447.

　　8 隋洪玉，赵晓莲，齐淑芳，等.蒲公英对衰老模型小鼠脑组织单胺氧化酶及单胺类神经递质含量的影响〔J〕.中成药，2007;29(8)：12234.

　　9 蔡 晶.地黄的药理作用实验研究进展〔J〕.国际中医中药杂志，2007;29(3)：1645.

　　10 吴发宝，陈希元.黄芪药理作用研究综述〔J〕.中药材，2004;27(3)：2324.

　　11 钟小明，陈旭东，余 鸿.当归药理作用的研究进展〔J〕.四川解剖学杂志，2007;15(1)：446.