【摘要】 目的 观察仙灵癃闭通胶囊对实验动物前列腺增生模型的影响。方法 给前列腺增生的老年犬和丙酸睾丸酮所致前列腺增生鼠不同剂量的仙灵癃闭通胶囊，测定犬前列腺体积、血清睾丸酮和雌二醇的含量。结果 老年犬以5.76，2.88，1.44 g生药/kg剂量口服给药，能够使老年犬前列腺体积缩小，但对血清睾丸酮和雌二醇含量无明显影响。小鼠以28.08，14.04，7.02 g生药/kg剂量灌胃给药，对丙酸睾丸酮所致小鼠前列腺增生模型有较好的预防和治疗作用。结论 仙灵癃闭通胶囊有较好的抑制实验动物前列腺增生的作用。
【关键词】 仙灵癃闭通胶囊;前列腺增生
前列腺增生症属中医“癃闭”范畴，为男性老年人的常见病，其发病率高并给患者带来很大的痛苦。本课题组依据中医药研究理论，研制出仙灵癃闭通胶囊，拟用于治疗前列腺增生症，本研究即是对该药进行的临床前药理作用研究。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药物：仙灵癃闭通胶囊(由淫羊霍、补骨脂、丹参、穿心莲、扁蓄等五味中药组成，每粒胶囊含生药1.80 g)，4.76 g生药/g粉，由吉林天药科技股份有限公司提供，批号：20030823。实验时取未装胶囊的药粉，以水配成所需浓度的药液。阳性对照药：癃闭舒胶囊，含量0.3 g药粉/粒(此药无生药量标示，实验中所用药量为药粉用量)，由石家庄科迪药业有限公司生产，批号：030706084。丙酸睾丸酮注射液(山东博山制药有限公司，批号：020412)。
1.1.2 动物 昆明种小鼠，雄性，18～22 g、26～35 g。 Wistar种大鼠165～195 g，雄性，购自长春高新医学动物实验研究中心，动物质量合格证号：SCXK(吉)2003004。杂种犬，雄性，体重(15±2)kg，自购。
1.1.3 仪器 752紫外光栅分光光度计(上海);JNB型精密扭力天平(上海);惠普尖端影像(美国);GC2010&放射免疫计数器(科大创新股份有限公司中佳分公司)。
1.1.4 试剂 睾酮放射免疫分析药盒、雌二醇放射免疫分析药盒(北京北方生物技术研究所)。
1.2 方法
1.2.1 对老年犬前列腺增生的影响〔1〕 取雄性老年杂种犬，首先经美国惠普尖端影像检查测定前列腺体积，证实为前列腺明显增大者供实验用。实验前先饲养观察2 w，使适应环境，之后随机分为5组，每组6只，即对照组、癃闭舒胶囊组、仙灵癃闭通胶囊高、中、低3个剂量组，按表1所示剂量口服给药，每日1次，连续1个月。于末次给药后，杂种犬依次于前肢皮下头静脉注射3%戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉，再经导尿管向膀胱内注入200 ml灭菌生理盐水，用美国惠普尖端影像进行检查，探头置于耻骨上，经仔细扫查显示前列腺横断面及纵断面声像图后全部进行图像“冻结”固定并摄片，分别用电子尺仔细测量前列腺的最大横径、纵径和厚径，三径相乘得腺体体积的近似值(cm3)，比较服药前后前列腺的体积变化。之后采血，1 500 r/min离心，分离血清，采用放免试剂盒，测定血清睾丸酮和雌二醇含量。剖取前列腺作病理组织学切片镜检。
1.2.2 对实验性小鼠前列腺增生的治疗作用〔2〕 取雄性小鼠70只，留下15只作正常对照，其余小鼠每天依次皮下注射丙酸睾丸酮5 mg/kg。注射21 d，处死其中5只小鼠，正常对照小鼠亦同样处死5只，称取体重和前列腺重并作病理组织学切片镜检，证实前列腺有增生后，将余下小鼠均分为5组，每组10只，按表2所示剂量灌胃给药。每日1次，对照组和模型对照组给予等体积水，连续1个月。末次给药后称量小鼠体重，将动物处死，剖取前列腺称重，并作病理组织切片镜检。
1.2.3 对实验性小鼠前列腺增生的预防作用〔2〕 取雄性大鼠60只，均分为6组，每组10只。除对照组外，其余各组大鼠每日皮下注射丙酸睾丸酮5 mg/kg，对照组及模型对照组灌服等体积水。其余组按表3所示剂量灌胃给药，每日1次，给药第24天称量小鼠体重，将动物处死，剖取前列腺称重，并作病理组织学切片镜检。
1.2.4 对大鼠棉球肉芽肿的影响 取雄性大鼠50只，在乙醚浅麻醉无菌条件下，将灭菌棉球(10 mg)植入各鼠腋窝双侧皮下，手术后次日，随机分为5组，每组10只。按表4所示剂量灌胃给药，每日1次，连续7 d，末次给药后1 h，将大鼠断头处死，剥离并取出棉球肉芽组织，称重、并减去棉球重量即为肉芽组织湿重。
1.2.5 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响〔3〕 取雄性小鼠50只，随机分为5组，每组10只，按表5所示剂量灌胃给药，每日1次，连续7 d。于末次给药后30 min，小鼠依次尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液(0.1 ml/10g)，随即依次腹腔注射0.6%醋酸(0.2 ml/只)，20 min后脱臼处死，腹腔注射生理盐水6 ml，轻按小鼠腹部，抽取腹腔液3 ml，3 000 r/min离心10 min，取上清液置752紫外光栅分光光度计上，590 nm处测OD值。
1.2.6 对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响〔4〕 取小鼠50只，随机分为5组，每组10只，按表6所示剂量灌胃给药，每日1次，连续15 d，对照组给予等体积水。末次给药后30 min，各鼠尾静脉注射墨汁(墨汁∶生理盐水=1∶5)0.05 ml/10 g体重，于注射后2、15 min从小鼠眼眶后静脉丛采血50 μl，溶于2 ml 1%Na2CO3溶液中摇匀后，置752紫外光栅分光光度计上，在680 nm波长下比色，测定OD值，立即脱臼处死小鼠，剖取肝、脾脏器称重，计算吞噬指数K、吞噬活性α。
1.3 统计学处理 实验数据除特殊说明外均经t检验处理。
2 结 果
2.1 对老年犬前列腺增生的影响 仙灵癃闭通胶囊可使老年犬前列腺体积缩小，只有高剂量组与对照组比较有显著性差异(P<0.05)，对老年犬血清睾酮和雌二醇无明显影响。见表1。
2.2 对实验性小鼠前列腺增生的治疗作用 注射丙酸睾丸酮21 d后小鼠的前列腺重明显增大(P<0.01)，前列腺腺体明显增生(P<0.01)。具有前列腺增生的小鼠服用仙灵癃闭通胶囊治疗1月后，其前列腺重量与模型组比较明显减轻(P<0.01)，近乎正常。对小鼠的体重无明显差异。见表2。
2.3 对实验性大鼠前列腺增生的预防作用 注射丙酸睾丸酮的同时服用仙灵癃闭通胶囊，对大鼠的前列腺增生有明显的抑制作用。给药组与模型组比较差异显著(P<0.05)，前列腺指数与模型组比较显著偏小(P<0.05)。见表2。
2.4 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响 仙灵癃闭通胶囊对醋酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性增加有明显抑制作用。与对照组比较差异显著(P<0.05)。见表3。
2.5 对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响 仙灵癃闭通胶囊各剂量组能明显提高小鼠巨噬细胞的吞噬指数及吞噬活性(P<0.05)。见表3。
2.6 对大鼠棉球肉芽肿的影响 仙灵癃闭通胶囊可明显抑制肉芽肿组织的增生，使肉芽棉球重量减轻，与对照组比较差异显著(P<0.05)。见表4。表1 仙灵癃闭通胶囊对老年犬前列腺体积及激素水平的影响表2 仙灵癃闭通胶囊对实验鼠前列腺增生的治疗及预防作用表3 仙灵癃闭通胶囊对实验鼠毛细血管通透性、巨噬细胞吞噬功能的影响表4 仙灵癃闭通胶囊对大鼠棉球肉芽肿湿重的影响
3 讨 论
综合上述实验结果表明，仙灵癃闭通胶囊能够使老年犬前列腺体积缩小，明显改善老年犬前列腺的组织形态，但对老年犬血清睾酮和雌二醇含量无明显影响;对丙酸睾丸酮所致鼠前列腺增生有较好的预防和治疗作用;能够减轻棉球肉芽肿的肉芽重量;对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加有明显抑制作用;能够提高正常小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能。说明本品具有抑制前列腺增生、抗炎、提高机体免疫力等作用。
参考文献
1 苗明三.实验动物和动物实验技术〔M〕.北京：中国中医药出版社，1997：239.
2 万阜昌，张韶英，邓筱安，等.祛癃对实验性小鼠前列腺增生等的影响 〔J〕.中成药研究，1985;3：25.
3 陈 奇，主编.中药药理研究方法学〔M〕.北京：人民卫生出版社，1993：356.
4 李仪奎，主编.中药药理实验方法学〔M〕.上海：上海科学技术出版社，1991：157.