【摘要】 目的 探讨复方鹿茸口服液的抗衰老作用。方法 观察口服复方鹿茸口服液对老年小鼠衰老相关酶，小鼠RNA和蛋白质含量及合成的影响。结果 复方鹿茸口服液对老年小鼠B型单胺氧化酶(MAOB)活性抑制、超氧化物歧化酶(SOD)活性增强、丙二醛(MDA)含量降低、脑单胺类递质含量的增加有明显作用。可明显增加老年小鼠肝RNA和蛋白质含量，及〔3H〕尿嘧啶核苷(Uridine)和〔3H〕亮氨酸(Leucine)掺入RNA和蛋白质。结论 复方鹿茸口服液对老年小鼠具有抗衰老作用。
【关键词】 复方鹿茸口服液;单胺氧化酶;单胺类递质;超氧化物歧化酶;丙二醛
复方鹿茸口服液由鹿茸、人参、五味子等25味中药组成，具有补肾养心、健脑益智、延年益寿等功效。本课题组曾证明鹿茸、五味子对老年小鼠具有抗衰老作用〔1，2〕，鹿茸水提取物能促进老年小鼠RNA和蛋白质的合成〔3，4〕。本文研究复方鹿茸口服液对老年小鼠衰老相关酶及小鼠RNA和蛋白质含量及合成的影响，并探讨其抗衰老的作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料 昆明种青年(1月龄)和老年(24月龄)小鼠，雌雄兼用，均由吉林省中医中药研究院动物室供给。复方鹿茸口服液由吉林省中医中药研究院制备提供，在4℃保存，临用前以蒸馏水配制至含生药2.0 g/ml。苄胺盐酸盐为日本东京化成工业株式会社产品;5羟色胺肌酐硫酸盐(5HT)为美国Aldrich Chemical Company Inc产品;盐酸多巴胺(DA)、5羟吲哚乙酸、重酒石酸去甲肾上腺素(NE)、超氧化物歧化酶(SOD)(3 000 U/mg)、黄嘌呤氧化酶(10 U/ml)和黄嘌呤均为Sigma公司产品;四甲氧基丙烷为日本和光纯药工业株式会社产品;硝基四氮唑蓝为日本半井化学药品株式会社产品，〔3H〕尿嘧啶核苷(Uridine)和〔3H〕亮氨酸(Leucine)为中国原子能所产品，其他试剂均为国产分析纯。
1.2 方法 取青年小鼠10只及老年小鼠50只，分为：青年对照组、老年对照组、阳性药组(人参蜂王浆10 ml/kg)、复方鹿茸口服液高剂量(4.0 g/kg)、中剂量组(2.0 g/kg)、低剂量组(1.0 g/kg)，每组雌雄各半，各对照组灌胃蒸馏水10 ml/kg。于10 d内每天灌胃1次，末次给药1 h后，处死动物，取肝和脑组织，按文献方法测定B型单胺氧化酶(MAOB)活性〔3〕、SOD活性〔1〕、MDA〔1〕、单胺类递质〔3〕，DNA〔5〕、RNA含量〔5〕、〔3H〕Uridine和〔3H〕Leucine掺入RNA和蛋白量〔5〕，蛋白质含量测定按Lowry法〔4〕。
1.3 统计学处理 计量资料用x±s表示，采用t检验。
2 结 果
2.1 复方鹿茸口服液对老年小鼠MAOB活性、单胺类递质含量、MDA含量及SOD活性的影响 见表1。老年小鼠脑和肝MAOB活性较青年小鼠显著升高，复方鹿茸口服液(4.0 g/kg)对老年小鼠脑和肝MAOB活性具有明显抑制作用，并且抑制作用强于阳性药人参蜂王浆。老年小鼠脑单胺类递质含量较青年小鼠有降低趋势，复方鹿茸口服液(4.0 g/kg)可明显增加老年小鼠脑单胺类递质含量。老年小鼠脑和肝SOD活性较青年小鼠显著降低，复方鹿茸口服液(1.0～4.0 g/kg)可明显增加对老年小鼠脑和肝SOD活性。老年小鼠脑和肝MDA含量较青年小鼠显著升高，复方鹿茸口服液(1.0～4.0 g/kg)对老年小鼠脑和肝MDA含量有明显降低作用。
2.2 复方鹿茸口服液对老年小鼠肝DNA、RNA和蛋白质含量及〔3H〕Uridine和〔3H〕Leucine掺入老年小鼠肝组织RNA和蛋白质的影响 见表2。老年小鼠肝RNA和蛋白质含量较青年小鼠显著降低，DNA仅有下降趋势，复方鹿茸口服液对老年小鼠肝RNA和蛋白质含量有明显增加作用，但肝DNA含量无明显影响。老年小鼠〔3H〕Uridine和〔3H〕Leucine掺入肝组织RNA和蛋白量较青年小鼠有降低趋势，复方鹿茸口服液可使其明显增加。表1 复方鹿茸口服液对各组小鼠MAOB活性、单胺类递质含量、MDA含量及SOD活性的影响与青年对照组比较：1)P<0.05，2)P<0.001;与老年对照组比较：3)P<0.05，4)P<0.01，5)P<0.001;下表同表2 复方鹿茸口服液对老年小鼠肝脏DNA、RNA和蛋白质含量及3H〕Uridine和〔3H〕Leucine掺入老年小鼠肝组织RNA和蛋白质的影响
3 讨 论
据文献报告，人类45岁后，脑MAOB活性随年龄明显升高，并且单胺能的调节作用日益下降，与某些老年性疾病(帕金森氏病和抑郁症)有关。例如老年抑郁症是由于脑中5羟色胺过少，帕金森氏病人脑的多巴胺比正常人的1/10还少〔5〕。本实验证明，老年小鼠脑和肝MAOB活性较青年小鼠明显升高，而复方鹿茸口服液可明显抑制老年小鼠脑MAOB活性，并降低脑单胺类递质含量(5HT，DA，NE)，作用强于人参蜂王浆。表明复方鹿茸口服液可能通过对脑MAOB活性的抑制，降低脑单胺类递质含量，达到延缓衰老的效果。
衰老的自由基学说认为，自由基可引起生物膜的脂质过氧化，产生过氧化脂质，造成生物膜结构和功能破坏，还可引起蛋白质、核酸等生物分子的非特异性氧化损伤，导致机体功能衰退，最后导致衰老。而SOD是机体内唯一直接清除自由基的重要抗氧化酶，可以清除氧自由基对机体的毒害作用〔6〕。本实验证明，与青年小鼠相比，老年小鼠MDA含量明显升高，SOD活性明显降低。而复方鹿茸口服液可明显增加老年小鼠SOD活性，降低MDA含量，并且作用强于人参蜂王浆。提示复方鹿茸口服液可能通过增强SOD活性，清除体内过多的氧自由基，从而减少脂质过氧化产物生成，达到延缓衰老的效果。
本实验证明，老年小鼠肝DNA、RNA和蛋白质含量较青年小鼠显著降低，并且老年小鼠〔3H〕Uridine和〔3H〕Leucine掺入肝组织RNA和蛋白量较青年小鼠有降低趋势，即老年小鼠RNA和蛋白质的合成能力下降。复方鹿茸口服液可明显增加老年小鼠肝RNA和蛋白质含量，作用强于人参蜂王浆，但对老年小鼠肝DNA含量无明显影响。复方鹿茸口服液还可明显增加老年小鼠〔3H〕Uridine和〔3H〕Leucine掺入肝组织RNA和蛋白质，即明显促进RNA和蛋白质的合成。提示复方鹿茸口服液促进老年小鼠RNA和蛋白质合成很可能是其抗衰老作用机制之一。我们以前的研究证明，鹿茸多胺是鹿茸促进小鼠肝脏RNA和蛋白质合成的有效成分，并能显著增强RNA聚合酶的活性〔5〕。至于复方鹿茸口服液中是否还存在其他促进RNA和蛋白质合成的有效成分，值得深入研究。
参考文献
1 陈晓光，常丁一，崔志勇，等.鹿茸提取物对老年小鼠衰老指标的影响〔J〕.中药药理与临床，1992;8(2)：17.
2 陈晓光，常丁一，崔志勇，等.五味子提取物对老年小鼠衰老指标的影响〔J〕.老年学杂志，1991;11(2):112.
3 陈晓光，王本祥，张 洁，等.尿嘧啶对单胺氧化酶的抑制作用〔J〕.生物化学杂志，1992：8(1)：81.
4 陈晓光，宋海鹏，王本祥，等.鹿茸提取物促进老年小鼠核酸和蛋白质合成作用及机制的研究〔J〕.中药药理与临床，1991;7(4):21.
5 王本祥，陈晓光，张 洁，等.鹿茸多胺对小鼠肝细胞RNA聚合酶活性的影响〔J〕.药学学报，1990;25(9)：652.
6 Harman D.Aging：a theory based on free radical and radiation chemistry〔J〕. J Gerontol，1956;11:298300.