作者：孙绪德 柴伟 王玉 马加海 高昌俊 张贵和 杨永慧 赵晖 徐礼鲜
【关键词】 失血性休克
关键词: 失血性休克;再灌注损伤;高氧平衡盐液
摘 要:目的 观察高氧平衡盐液对防治家兔失血性休克再灌注损伤效果. 方法 家兔休克90min后回输放血总量1/3的血液，同时分别输注平衡盐液（对照组，n=10）及高氧平衡盐液（治疗组，n=10）. 结果 再灌注后治疗组平均动脉压（MAP）迅速上升，于再灌注后3h显著高于对照组，CVP及HR较快恢复至休克前的水平，血清丙二醛（MDA）呈下降趋势.而对照组再灌注后MDA显著上升，MAP进行性下降，反映机体组织遭受了再灌注损伤. 结论 高氧平衡盐液能迅速逆转失血性休克血流动力学改变，有效防治休克再灌注损伤.
Keywords:bleeding shock;reperfusion injury;hyperoxia balanced saline solution
Abstract:AIM To observe protective effect of hyperoxia balanced saline solution on reperfusion injury caused by bleeding shock.METHODS 20rabbits were randomly di-vided into two groups（n=10）.90minutes after bleeding shock artificially modeled by bleeding，one third volume of the lost blood was perfused，then balanced saline solution（BBS）and hyperoxia BBS were intravenously dripped into rabbits in Group A and Group B，respectively.MAP，CVP and HR were recorded and MDA evaluated by radioim┐munoassay.RESULTS In Group B，MAP rose swiftly and became significantly higher3h after the reperfusion than that of Group A;CVP and HR in Group B rose to normal level less time consuming while serum MDA showed the tendency to decrease.On the other hand，MDA in Group A was signif-icantly higher than that in Group B which indicated the dam-age inducd by reperfusion injury.CONCLUSION Hyperoxia BBS was able to correct the haemodynamic disorder in bleed-ing shock and effectively prevented the occurrence of reperfu-sion injury.
0 引言
高氧晶体液能够增加组织氧供［1］ ，经充氧后的晶体液对心肌缺血性损害［2］ 及缺血心肌的再灌注损伤［3］ 有一定预防作用.本研究观察高氧平衡盐液对失血性休克再灌注损伤的防治效应和外源性氧供对再灌注时氧自由基所致组织脂质过氧化反应的影响.
1 材料和方法
1.1 材料 健康大白兔20只，雌雄不拘，体质量2.5～3.5kg（由第四军医大学实验动物中心提供），随机分为对照组（n=10）及治疗组（n=10）.高氧液用西安高氧医疗设备有限公司研制的“高氧医用液体治疗仪”制备，用量子化溶氧机制以临床常用液体（50g L-1 葡萄糖、生理盐水或平衡盐液等）为载体，溶O2 后可使液体PO2 由20kPa上升到100～130kPa和O3 （10～20mg L-1 ）高氧液体［4］ .丙二醛（MDA）试剂盒购自南京建成生物工程研究所;RM-6000型四导生理记录仪（NihonKohden，Japan）;700型全自动生化分析仪（美国贝克曼公司）.
1.2 方法 戊巴比妥钠（45mg kg-1 ，ip）腹腔麻醉，全身肝素化（3mg kg-1 ）.以MAP5.3kPa为标准，快速颈动脉放血.休克状态持续90min，总放血量为全身血量的40%～55%.休克90min后各组回输放血总量1/3的自体肝素化血，同时对照组输注平衡盐液，治疗组输注高氧平衡盐液.输液总量为放血量的2.5倍，其中1h内快速滴注总量的1/2，剩余1/2量于2～3h内输完.按前述方法制作模型.左侧颈动脉插管及经右侧颈内静脉插管至右心房，分别经三通管接于RM-6000型四导生理记录仪，连续监测MAP及间断测中心静脉压（CVP）及心率（HR）.于休克前（S0 ）、休克1.5h（S1.5 ）及再灌注后1h（I1 ）、2h（I2 ）及3h（I3 ）经颈动脉抽取血样测MDA，并记录MAP，CVP及HR.上述操作完成后于I3 时迅速处死动物，剖腹取同一部位肝组织及小肠（回肠）组织各1g左右，用生理盐水洗净血液后浸于生理盐水中用于测组织中MDA［5］ .采用齐风菊等［6］ 改良的八木国夫法测定MDA的含量.血清MDA单位为μmol L-1 ，组织中MDA单位为每克组织湿质量nmol（nmol g-1 ）.
统计学处理:所有数据以x ±s表示.组间比较用方差分析.
2 结果
两组休克动物失血量无统计学差异.治疗组再灌注后血压稳定，MAP逐渐回升（Tab1），而对照组MAP呈进行性下降.I2 时治疗组MAP值与S0 时已无统计学差异，于I3 时显著高于对照组（P&<0.05），提示高氧平衡盐液作为失血性休克扩容液可较快提高MAP.S1.5 时两组HR显著下降，CVP增加，反映心肌作功能力减弱.再灌注后对照组HR进一步下降，CVP持续较高，而治疗组HR及CVP于I2 时即已恢复至S0 水平，提示高氧平衡盐液能较快恢复心肌功能.两组S1.5 时血清MDA均显著高于其S0 值（P&<0.05），再灌注后对照组MDA继续升高，于I3 时显著高于其S1.5 时值（Fig1），反映休克缺血期组织脂质过氧化反应程度增加，而再灌注加重了组织脂质过氧化损害.治疗组再灌注后血清MDA无明显增加，并于I2 时降至接近休克前水平，但I3 时其血清MDA再次上升.I3 时治疗组小肠MDA明显低于对照组，而两组肝MDA值无显著性差异.
失血性休克及其再灌注时机体均会遭受明显的氧自由基损伤［7，8］ ，用具有氧自由基清除作用的药物防治其再灌注损伤［8］ 已取得一定效果.然而休克的病理生理基础是组织缺氧和细胞能量耗竭，我们运用高氧晶体液以期增加组织氧供，较快阻断休克缺氧恶性循环的发展.治疗组再灌注后MAP迅速回升，于I2 时其MAP，CVP及HR均恢复至休克前水平.主 要血流动力学指标的改善，提示休克动物心血管功能的迅速恢复.我们以往的研究［9］ 提示，休克的缺氧代谢，一旦组织供氧改善即能得到纠正，并逐渐恢复.对缺血心肌［3］ 超微结构的观察结果表明，高氧晶体液能明显减少其线粒体的破坏变性、防止其肌原纤维的挛缩及断裂.因此，我们认为高氧平衡盐液通过增加组织氧供启动或促进了组织的有氧代谢，从而加速了心肌等组织结构及功能的恢复.
表1 各组休克再灌注后MAP变化 略
图1 略
目前公认再灌注时氧衍生的自由基主要通过引起单位膜脂质过氧化而致细胞损伤.按理再灌注时外源性氧有可能加重氧自由基所致损伤.通过对过氧化脂质主要代谢产物MDA的测定结果表明，再灌注后治疗组并未出现血清MDA的升高;相反，于I2 时其血清MDA降至接近休克前水平（Fig1），说明高氧平衡盐液能在一定程度上降低组织脂质过氧化程度.出现这一效应的原因尚不十分清楚，可能与再灌注早期即应用外源氧，组织供氧改善后有氧代谢增强，补充了ATP，促进了内源性抗氧化酶系统功能的恢复等作用有关.至于I3 时治疗组血清MDA的再次上升，我们认为与对照组再灌注后MDA的进行性上升有本质不同，而可能与微循环功能改善后组织中MDA的外排有关.
参考文献
［1］Flitter WD，Siompson PJ，Luccheei BR.Free radical and my-ocardial reperfusion injury ［J］.Br Med Bull，1999;49（9）:545-546.
［2］Guyton RA.Improved myocardial recovery after cardioplegic ar-rest with an oxygenated crystalloid solution ［J］.Thorac Cardio-vasc Surg，2000;89:877-879.
［3］Sun XD，Chai W，Ma JH，Xu LX.Protective effect of hyperoxi-aliquid on myocardial ischemia reperfusion ［J］.Xinzang Zazhi（J Chin Heart），2001;13（1）:24-26.
［4］Carvajal K，El-Hafidi M，Banos G.Myocardial damage due to ischemia and reperfusion in hypertriglyceridemic and hyperten-sive rats:Participation of free radicals and calcium overload ［J］.J Hypertens，1999;17（11）:1607-1616.
［5］Ohkawa H，Ohishi N，Yagi K.Assay for lipid peroxides in ani-mal tissue by thiobarbituric acid reaction ［J］.Anal Biochem，1979;95:351-358.
［6］Qi FJ.The assay of plasma MDA-The improvement method of Bamertuliang’［J］.Di-yi Junyi Daxue Xuebao（J First Mil Med Univ），1986;6（2）:152-153.
［7］Okabe E.Superoxide anion radical selectively increases Ca2+ re-lease from cardiac sarcoplasmic reticulum through ryanodine re-ceptor Ca2+ channel ［J］.Nippon Yakurigaku Zasshi，1998;112（Suppl1）:58-62.
［8］Vanden HT，Li C，Shao Z.Significant levels of oxidants are generated by isolated cardiomyocytes during ischemia prior to reperfusion ［J］.J Mol Cell Cardiol，1997;29（9）:2571-2583.
［9］Sun XD，Chai W，Ma JH，Xu LX.Influence of hyperoxia liquid on biochemical indexes and ultrastructure during myocardial is-chemia and reperfusion injury ［J］.Di-si Junyi Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），2001;22（13）:1176-1178.