关于母牛分枝杆菌菌苗预防尖锐湿疣复发及其对细胞免疫的影响

【摘要】 目的 探讨母牛分枝杆菌菌苗预防尖锐湿疣复发的效果，及其对细胞免疫的影响。方法　治疗组采用肌肉注射母牛分枝杆菌菌苗联合激光治疗，对照组仅用激光治疗。采用双抗体夹心ELISA技术检测尖锐湿疣(CA)患者(治疗组和对照组)治疗前后血清IL10、IFNγ水平。结果　和治疗前相比，治疗后治疗组IL10水平明显降低，IFNγ水平明显升高 (P&<0.05)；与对照组比较，差异有显著性；而对照组治疗前后IL10、IFNγ水平无明显改变(P&>0.05)；治疗组复发率为13.8%，对照组为42.9%，差异有显著性 (P&<0.05)。结论　母牛分枝杆菌菌苗能有效提高尖锐湿疣患者的细胞免疫功能，减少该病的复发率。
【关键词】 母牛分枝杆菌菌苗；尖锐湿疣；细胞免疫
Abstract:Objective To study the effect of Mycobacterium vaccine on the patients with condyloma acuminatum (CA) and cellular immunity. Methods Patients of CA were randomly pided into treatment group (M.vaccine and laser group) and control group (laser group). Doubleantibody sandwich ELISA (DAS ELISA) was used to study the serum levels of interleukin10 (IL10) and interferongamma (IFNγ) in CA patients (before and after treatment with or without vaccine). Results After treatment， the levels of IL10 in the treatment group were significantly decreased while the levels of IFNγ were significantly increased (P&<0.05). There was no significant difference in the control group (P&>0.05). The effect on the treatment group was much better than that on the control group (P&<0.05). The relapse rates of the treatment group and the control group were 13.8% and 42.9% respectively. And there was significant difference between them (P&<0.05).Conclusion Vaccae could improve the cellular immune function of patients with CA， and decrease the relapse rate of CA.
　　Key words:Mycobacterium vaccine; condyloma acuminatum (CA); cellular immunity
　　 尖锐湿疣(CA)是由人乳头瘤病毒(HPV)感染所致，在HPV感染的各个阶段均存在免疫功能异常，尤其是细胞免疫功能的异常［1］。有研究表明CA患者存在着明显的Th1和Th3细胞因子失衡［2，3］。母牛分枝杆菌菌苗(商品名微卡) 属快生长非结核分枝杆菌，是一种具有多种免疫调节功效的新型免疫调节剂，常用于治疗肺结核、哮喘、肿瘤等疾病。本实验通过研究CA患者经微卡治疗后血清Th1/Th3型细胞因子水平的变化，探讨微卡治疗CA的作用机制，为微卡的临床应用提供一定的理论依据。我科在2005年6月～2007年6月采用肌肉注射微卡联合激光治疗CA患者100例，收到较好的临床效果，现报告如下。
　　1 材料与方法
　　1.1 病例入选标准
　　全部病例均为皮肤性病科门诊符合卫生部制订的尖锐湿疣诊断标准的初诊患者，共100例，其中男58例，女42例；已婚63例，未婚37例；年龄19-64岁，中位年龄37岁。病程7 d至6个月。发病部位：男性多位于冠状沟、阴茎头、包皮及系带等处；女性多位于大小阴唇、阴道口、尿道口及肛周。皮损形态多为乳头状、丘疹状、菜花状等，大小约为0.5～5 cm。排除标准：(1)1个月内曾系统应用免疫抑制剂者；(2)1个月内曾系统应用皮质类固醇激素者；(3)1个月内参加过研究药物实验者；(4)1周内发生发热或外伤等应激情况者；(5)患有严重肝、肾、血液系统及其它疾病者；(6)有营养不良，抑郁症或乙醇中毒，影响治疗实施者。将患者随机分成治疗组和对照组。治疗组:65例，其中男44例，女21例；对照组35例，其中男14例，女21例。两组的年龄、性别等一般情况差异无显著性 (P&>0.05)，具有可比性。
　　1.2 治疗方法
　　治疗组用CO2激光手术去除疣体后，肌肉注射微卡注射液，每次1支，每周1次，2个月为1个疗程。对照组用CO2激光手术去除疣体，但不采用微卡注射。两组病人在治疗期间要求每周复诊1次，治疗结束后嘱病人每个月就诊1次，观察6个月。如有新发皮疹，应及时就诊(不受1个月复诊1次的时间限制)。
　　1.3 检测方法
　　抽取治疗前后CA患者静脉血3 mL，应用ELISA双抗体夹心法，测定血清IL10、IFNγ水平(IFNγ和IL10 ELISA试剂盒为北京晶美公司产品)。
　　1.4 复发标准
疣体用激光去除后，随访6个月，随访期间有新发皮疹者定为复发，反之，则无复发。
　　1.5 统计学分析
　　应用SPSS 11.0 for Windows软件做统计学处理。采用t检验和χ2检验，以P&<0.05为差异有显著性。
　　2 结 果
　　2.1 两组治疗前后血清IL10和IFNγ水平的变化
　　治疗后治疗组IL10水平明显降低，IFNγ水平明显升高，与治疗前比较差异有显著性 (P&<0.05)；而对照组IL10、IFNγ水平在治疗前后无显著改变(P&>0.05)。治疗后治疗组IL10水平明显低于对照组，IFNγ水平明显高于对照组(P&<0.05)。见表1。

2.2 两组复发率比较
　　治疗组有9例复发，复发率为13.8%；对照组有15例复发，复发率为42.9%，对照组复发率明显高于治疗组，两组比较差异显著 (P&<0.05)。见表2。表1 两组治疗前后血清细胞因子IL10和IFNγ水平变化与治疗前比较:*P&<0.05;与对照组比较:#P&<0.05表2 两组的复发时间及例数
　　3 讨 论
　　尖锐湿疣(CA)是一种病毒感染性疾病，临床复发率较高，以往CA的治疗多采用抗病毒及局部治疗，随着对其发病机制研究的深入，细胞免疫功能的抑制和失衡越来越受到重视。有研究表明，CA患者体内存在多种Th1和Th3型细胞因子水平异常及明显的Th1/Th3型细胞因子产生失衡［4，5］。细胞免疫功能的抑制和失衡可能是CA患者病情反复发作、病程迁延不愈的原因。
　　本研究采用激光去除疣体联合微卡注射治疗。微卡属快生长非结核分枝杆菌，对人和动物无致病性，其含有丰富的Ⅰ型抗原和65KD抗原，可介导共同保护性免疫反应， 有效地提高IFNγ mRNA的表达，诱导Th1型T淋巴细胞分泌IFNγ等细胞因子， 从而提高IFNγ水平，激活巨噬细胞，使其吞噬杀菌能力增强，并能增强单核细胞的吞噬作用，激活中性粒细胞、NK细胞、血管内皮细胞等， 增加h3O2和NO水平，并与其它细胞因子协同，在抗病毒、抗肿瘤和免疫调节方面有重要作用；降低IL10水平， 而IL10作为一种细胞因子合成抑制因子，能有效地抑制Th1型细胞因子(如IL2、IFNγ等)在mRNA水平的合成，通过抑制IL2、IFNγ等的产生达到其免疫抑制的目的。由此启动Th1应答，抑制Th3应答，从而恢复Th1/Th3比例平衡，增强人体的免疫性和防御能力［6，7］。本研究结果显示，与单独使用激光治疗相比，经联合治疗后治疗组IL10水平明显降低，而IFNγ水平明显升高，而且复发率也明显降低。由此可见，运用微卡联合激光治疗CA，有利于增强患者Th1免疫应答，降低CA复发率，值得临床推广。
【参考文献】
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