母婴血型不合HDN患儿致敏红细胞的抗体特异性

【摘要】 目的: 调查母婴血型不合新生儿溶血病（HDN）患儿致敏红细胞的抗体特异性， 比较不同抗体致敏新生儿红细胞所致HDN的血型血清学特征。方法: 对黄疸新生儿， 鉴定母婴血型， 做新生儿红细胞直接抗球蛋白试验（DAT）， 检测母婴血浆及新生儿红细胞放散液中可致敏新生儿红细胞的血型抗体以诊断HDN。结果: 血型血清学诊断为HDN的252例患儿中， 致敏红细胞的抗体分别为: 抗A 40例、 抗B 40例、 抗A+抗AB 92例、 抗B+抗AB 65例、 抗AB 4例、 抗A+抗M 1例、 抗M 3例、 抗c 1例、 抗cE 1例、 抗E 3例、 抗D 2例; 由ABO血型抗体及抗M所致HDN者DAT多为阴性或弱阳性， 由Rh血型抗体致HDN者DAT均为强阳性， ABO、 Rh血型抗体及抗M致HDN患儿红细胞热放散液中致敏红细胞的抗体效价均高于血浆游离抗体。结论: 被调查的HDN患儿绝大多数由来自O型母亲的IgG抗A、 抗B及抗AB所致， 其次为抗M及抗E， 由抗D引起的HDN呈逐步减少的趋势。

【关键词】 血型 ABO血型抗体 不规则抗体 新生儿溶血病 红细胞放散试验

　　可致敏新生儿红细胞引起新生儿溶血病（haemolytic disease of the foetus and the newborn， HDN）的红细胞血型抗体较多， 不同地区间因人群表达的红细胞血型抗原存在差异、 对同种免疫采取的预防措施不同， 引起HDN的抗体特异性也存在地区差异， 了解致敏HDN患儿红细胞的血型抗体产生情况， 对制定有针对性的预防措施具有重要意义。我们对检出的252例HDN患儿致敏红细胞的抗体特异性进行了调查分析， 并对不同特异性抗体所致HDN的血型血清学特性进行了比较。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料 多特异性（抗IgG、 抗C3d）单克隆抗球蛋白试剂(美国DBL公司生产)， 微柱凝胶抗球蛋白卡及专用孵育器、 离心机(长春博迅生物技术有限责任公司生产)， 筛检红细胞、 谱红细胞(上海市血液生物医药有限公司生产)， A、 B、 O型标准红细胞（本实验室分别取自3人份健康供血者配制）。研究对象为2004-05/2006-11， 我院诊断为HDN的新生儿252例， 年龄0～20 d， 平均3.8 d。

　　1.2 方法

　　1.2.1 患儿母亲血型血清学检测 对申请进行HDN血型血清学诊断的新生儿母亲， 鉴定ABO血型， 采用微柱凝胶抗球蛋白技术筛检血浆红细胞血型不规则抗体， 阳性者鉴定其特异性。

　　1.2.2 新生儿血型血清学检测 鉴定ABO血型、 做红细胞直接抗球蛋白试验（DAT）; 如果母婴ABO血型不合或母亲血浆中检出特异性红细胞血型不规则抗体者， 做红细胞热放散试验（放散前的未次洗液留作对照， 只有其中检不出任何抗体才可判定放散试验的准确性）， 并根据母婴ABO血型及母亲血浆红细胞血型不规则抗体检测结果进一步做如下检测: 母亲为A型， 新生儿为B型或AB型时， 检测新生儿血浆及红细胞放散液中的抗B; 母亲为B型， 新生儿为A型或AB型时， 检测新生儿血浆及红细胞放散液中的抗A; 母亲为O型， 新生儿为A型时， 检测新生儿血浆及红细胞放散液中的抗A， 并使红细胞放散液与B型红细胞反应以检测抗AB; 母亲为O型， 新生儿为B型时， 检测新生儿血浆及红细胞放散液中的抗B， 并使红细胞放散液与A型红细胞反应以检测抗AB; 母婴ABO血型为其他组合时， 不会发生ABO血型不合HDN， 故不检测新生儿血浆及红细胞放散液中的抗A、 抗B及抗AB; 母亲血浆中检出了特异性红细胞血型不规则抗体者， 检测新生儿血浆及红细胞放散液中与其母亲血浆相同特异性的不规则抗体， 并检测新生儿红细胞是否表达抗体对应的红细胞抗原。

　　1.2.3 HDN血型血清学诊断标准 母婴ABO血型不合， 新生儿血浆和（或）红细胞放散液中检出了可致敏新生儿红细胞的ABO血型抗体者诊断为ABOHDN; 新生儿血浆和（或）红细胞放散液中检出了与母亲血浆相同特异性、 并可致敏新生儿红细胞的不规则抗体者（新生儿红细胞表达抗体对应的抗原）诊断为非ABOHDN（NonABOHDN）。

　　2 结果

　　2.1 HDN患儿致敏红细胞的抗体 血型血清学诊断为HDN的252例患儿中， ABOHDN 241例（母婴血型为OA 132例、 OB 108例、 BAB 1例）， 占95.63%， 致敏红细胞的抗体分别为: 抗A 40例、 抗B 40例、 抗A+抗AB 92例、 抗B+抗AB 65例、 抗AB 4例; ABOHDN伴NonABOHDN 1例（母婴血型为O， M-A， M+）， 占0.40%， 致敏红细胞的抗体为抗A+抗M; NonABOHDN 10例， 占3.97%， 致敏红细胞的抗体分别为: 抗M 3例、 抗c 1例、 抗cE 1例、 抗E 3例、 抗D 2例。

　　2.2 不同血型特异性红细胞抗体致HDN的血型血清学特点 由ABO血型抗体及抗M所致245例HDN患儿中， 195例DAT为阴性， 50例DAT阳性（大多为弱阳性）者都为出生3 d以内的新生儿; 由Rh血型抗体所致7例HDN患儿DAT均为强阳性（+++）， 母婴ABO血型均相合; 由ABO血型抗体、 Rh血型抗体及抗M引起的252例HDN患儿红细胞热放散液中致敏红细胞的抗体效价均高于血浆游离抗体。

　　3 讨论
　　
　　母婴血型不合HDN是因母体IgG类红细胞血型抗体通过胎盘进入胎儿体内致敏胎儿红细胞所致， 母体可引起HDN的抗体的产生，部分（ABO血型抗体）或完全（Rh血型抗体）与输血、 妊娠等同种免疫有关。但不同种族或地区人群之间因所表达的红细胞血型抗原频率的不同， 红细胞同种免疫性抗体的频率及特异性也不同［1， 2］， 引起HDN的抗体特异性分布存在种族或地区差异［3］， 白种人中由于Rh(D)阴性频率高达15%［4］， Rh血型不合HDN最为多见， 有症状的HDN中65%的病例和90%的严重HDN是由抗D引起， 其次为Rh血型系统中的其他抗体（抗E、抗c、 抗C等）、 Kell血型系统抗体（抗K）等［5， 6］。
　　
　　由于我国人群中Rh(D)阴性频率极低， 本研究252例HDN患儿中， 致敏红细胞的抗体绝大多数为来自O型母体的抗A、 抗B及抗AB， ABO血型以外的不规则抗体仅占4.37%。因此， 对ABOHDN的防治应作为我国防治HDN的重点。有研究表明O型孕妇IgG抗A(B)的效价及抗A(B)的IgG亚类与新生儿ABOHDN的发病相关［7-9］， 而O型人的IgG抗A(B)大多在无明显同种免疫情况下产生， 对O型孕妇产前检测IgG抗A(B)的效价及抗A(B)的IgG亚类， 适时给予干预， 对预防ABOHDN可能取得一定效果。本研究中检出的NonABOHDN的抗体特异性与陈忠对1981～2000年中国大陆报道的333例NonABOHDN病例进行的综合分析 ［10］比较， 由抗D引起的病例比率较小， 由抗E、 抗M引起的病例比率较大。但与中国台湾和中国香港报道［11， 12］的较为接近。其原因可能为中国大陆较早并未在输血前常规鉴定Rh(D)血型， Rh(D)阴性的女性受血者受Rh(D)阳性血免疫产生同种抗体的机率极高， 而中国台湾和中国香港较早就采用Rh(D)相容性输血， 对Rh(D)阴性患者紧急情况输注了Rh(D)阳性血或Rh(D)阴性妇女分娩了Rh(D)阳性婴儿后可给予注射抗D免疫球蛋白预防抗D产生。近年来中国大陆也实行输血前鉴定Rh(D)血型， Rh(D)阴性受血者大多数都能接受Rh(D)阴性红细胞输注， 由抗D 引起的HDN有逐步减少的趋势。
　　
　　当母婴ABO及Rh血型均不相合时， 由于ABO血型不合对Rh血型不合有一定的保护作用［13］， ABOHDN与RhHDN同时发生的病例非常少见， 本研究7例RhHDN患儿的ABO血型与其母亲均相合。而本研究4例抗M引起的HDN中就有1例同时伴有ABOHDN， 表明母婴ABO与MNSs均不相合时， ABO血型不合对MNSs不合的保护作用并不明显， 但也未表现出增加红细胞致敏程度的情况。另外， 我们检出的由抗M及抗M+抗A所致的HDN患儿红细胞DAT同ABOHDN一样均呈阴性或弱阳性反应， 只有Rh血型系统抗体所致HDN患儿红细胞DAT呈强阳性反应， 这可能是因为ABO血型抗原及M血型抗原表位都是糖蛋白， 在新生儿时期尚未完全发育成熟， 与抗体的亲和力较弱， 而Rh血型抗原表位为多肽， 在新生儿时期抗原已经完全发育成熟， 与抗体的亲和力较强所致。

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