【关键词】 血管内皮生长因子 ; 胰腺癌
外分泌胰腺癌侵袭性强，很早即有局部淋巴结转移，确诊时仅有10%～15%的病人可行手术切除，由于局部浸润，早期淋巴转移和血性转移，其确诊后1年生存率12%，5年生存率小于4 %[1]，手术以后的5年生存率也在12%～20%之间[2]，是消化系统肿瘤中预后最差的一种。
实体肿瘤的生长和转移有赖于血管生成(angiogenesis)。通常血管中的氧气向周围组织弥散的极限距离是100～200μm，如果没有新生血管提供氧气和养分，实体肿瘤生长的直径不会超过1～2cm。实体肿瘤的生长要超过这个体积，肿瘤内促进血管生成的因子就要高表达，抑制血管生成的因子低表达，以促进肿瘤内的血管新生[3]。在肿瘤血管的新生过程中，有众多的血管生成因子参与，其中在众多促血管生成因子中，血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是目前已知最重要的促血管生成因子。本文复习有关文献，对VEGF在胰腺癌中的研究现状综述如下。
1 VEGF及其受体
VEGF由Dvorak等于1979年首次发现，最初称之为“血管渗透因子”，现已统一命名为“血管内皮生长因子”。 天然的VEGF以二聚体形式存在，是一种碱性的，能与肝素结合的糖蛋白，分子量约为45 kD。人VEGF基因位于染色体6p21. 3，由8个外显子及7个内含子构成，编码区大概为14kb。VEGF家族包括VEGF-A(已知最重要的VEGF成员，也即通常所指的VEGF)、胎盘生长因子(PLGF)、VEGF-B，VEGF-C，VEGF-D，VEGF-E，和VEGF-F。人VEGF-A随基因剪接方式不同至少有9种亚型，为VEGF121 、VEGF145、 VEGF148、 VEGF162、 VEGFl65、VEGF165b、VEGF183、VEGF 189和VEGF [4，5]206，它们在8个相同位点含8个半胱氨酸残基，保守性极强。其功能蛋白为其中2个半胱氨酸残基通过链间二硫键形成的二聚体，功能有促进血管内皮细胞增殖、血管发生、血管通透性调节、缺氧保护效应等，其中VEGFl65的功能最重要，因此对其研究最多。
VEGF通过VEGF受体发挥生物学效应，迄今已发现VEGF有3个受体 VEGFR-1(Flt-1)、VEGFR-2(Flk-1)和VEGFR-3(Flt-4)。前两者主要在内皮细胞中表达，在肿瘤细胞中也有表达，而VEGFR-3主要在淋巴管组织中表达 。其中前2个受体与VEGF-A亲和力高，属酪氨酸激酶家族，与配体结合导致其本身二聚化、胞内段酪氨酸自磷酸化，随后激活下游信号蛋白而发挥其生理功能。前两者主要在内皮细胞中表达，在肿瘤细胞中也有表达，而VEGFR-3主要在淋巴管组织中表达[6，7]。
2 VEGF及其受体的作用
VEGF是血管内皮细胞强有力和特有的促有丝分裂原，可促进血管生成过程的所有环节。在几个研究血管生成的体内试验中，VEGF均可诱导血管新生，在对体外培养的血管和淋巴管内皮细胞的试验中，VEGF能促进其增殖、迁移及管状结构形成。VEGF可以增加毛细血管及后微静脉的渗透性，皮肤或肌肉注射后能迅速诱导连续性的内皮结构出现破坏。VEGF与VEGFR结合，使VEGFR二聚体化、自我磷酸化，通过多个细胞内途径传递信号(包括MAPK、PI3激酶、Ras和磷脂酶C途径等)最终发挥作用[8]。VEGF各受体的作用有所不同：VEGFR-2起着调节内皮生长、分化、渗透性的作用，而VEGFR-1则与调节内皮细胞移动、聚集有关，并且通过VEGFR-2抑制信号的传导。VEGFR-3对于血管发育可能也有作用，但更独特的是其在淋巴管组织中表达，可能对淋巴系统生成有重要作用[9]。
3 VEGF的调节
许多机制都可诱导VEGF表达，包括：K-as、p-53基因的突变，VHL(von hippel lindau)基因产物，生长因子如FGF-2和TGF-β，缺氧，转录因子如缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)和SP1等。肿瘤细胞是诱导VEGF的主要来源，主要机制是通过肿瘤基因的激活和其它基因的突变。现已知许多基因受缺氧调控，包括编码促红细胞生成素、VEGF、糖酵解酶以及可诱导一氧化氮合成酶(iNOS)的基因。肿瘤细胞快速生长所造成的缺氧环境首先激活Src激酶，再激活下游信号传导系统，最后使HIF-1a的表达增加[10]。HIF-1a随后使VEGF基因转录增加，并最终诱导血管生成，在其他细胞血管平滑肌细胞、外膜细胞、视网膜色素上皮细胞和内皮细胞中均发现缺氧诱导VEGF出现表达或表达上调。
4 VEGF及其受体在胰腺癌中的表达
1993年，Brown等首次对单个胰腺癌标本进行免疫阳性染色，发现了VEGF-A 的表达[11]。迄今VEGF-A是最强的促血管生成蛋白。它引起增殖、出芽和内皮细胞管道形成，在体内，已显示VEGF-A表达与血管新生和生理血管生长的重要步骤关联。在组织学上，VEGF的表达程度与MVD显着相关[12]，VEGF水平对于胰腺癌生长转移及预后有重要影响，而微血管密度(MVD)则是反映肿瘤血管生成程度的良好指标。
有研究表明胰腺癌组织VEGF表达阳性率较癌旁组织、正常组织有统计学意义差异，分别为：77.14%，5.71%，12.86%，在直径为&<2 cm、2～4 cm和&>4 cm的肿瘤中，VEGF的阳性率分别为42.86% 、92.86%和78.57%，分化程度高、中、低肿瘤VEGF的阳性率分别为71.43% 、70.59%和90.91%，认为VEGF与胰腺癌的高血管生成活性相关[13]。Niedergethmann等研究了70例行根治性手术的胰腺管状腺癌病例，发现VEGF和MVD水平与病人预后相关，且血浆VEGF水平可作为预测早期复发的指标[14]。Buchler等在多个人类胰腺癌细胞系中进一步证实了VEGF、VEGFR-1和VEGFR-2 mRNA的存在;对人类胰腺癌标本行免疫组化染色发现，VEGFR-1和VEGFR -2阳性且VEGFR-2水平与生存时间显著相关;VEGF在体外可明显促进胰腺癌细胞系增殖，运用VEGFR-2的反义寡聚核苷酸可抑制该作用;在人类胰腺癌原位种植裸鼠的动物模型中，VEGFR-2的反义寡聚核苷酸能明显抑制肿瘤生长、降低肿瘤MVD水平、减少胰周浸润和腹腔内转移，但对腹腔外转移无效[15]。Karayiannakis等研究了行根治性手术的胰腺管状腺癌病例后，发现VEGF和MVD水平与病人预后相关，且血浆VEGF水平可作为预测早期复发的指标，并在发生转移的胰腺癌患者腹水中发现了VEGF的过度表达[16]。
总体来说，目前大多数研究结果认为：(1)胰腺癌的血管生成程度(MVD表示)和VEGF水平明显高于正常组织，且两者之间有良好的一致性，说明VEGF对于胰腺癌血管新生有重要意义;(2)胰腺癌中VEGF和MVD表达水平与病人预后之间呈负相关，提示肿瘤血管生成程度可作为判断胰腺癌预后的一项重要指标。
5 抗VEGF在胰腺癌治疗中的进展
抗血管生成药物已在临床试验中显示出一定的疗效。已有体内实验证实阻滞VEGF信号通路可以使血管“正常化”-血管数量减少，渗透性降低，具有更完整的基底膜和周细胞包围。这些形态学的改变，伴随着血管功能的改变，间质压力减少，肿瘤内氧气含量升高，药物达到肿瘤内部的量增多，这些都使药物杀伤肿瘤细胞的效率增加[17]。最近越来越多的证据显示VEGF受体阻断剂在治疗胰腺癌以及其他的恶性肿瘤中的作用[18，19]。Ying-Ying Lu等的研究表明，VEGF受体阻断剂-埃罗替尼作用于胰腺癌细胞后，VEGF的表达与对照组相比明显减少，而且肿瘤组织VEGF mRNA的表达与对照组相比明显降低[20]。Ryuichi Noguchi等的研究表明在治疗胰腺癌时，联合应用抗VEGF的药物与化疗药，显示出比单独应用抗VEGF或单独应用化疗药取得更好的疗效[21]。CAO Guang的研究显示，当低分子肝素钠作用于胰腺癌细胞PANC-1时，PANC-1表达VEGF-C被受到抑制，Western blotting 和RT-PCR的结果显示出，VEGF，VEGFmRNA表达减少，并且随着低分子肝素钠浓度的增加，这种抑制作用更为明显，期待低分子肝素钠在抑制胰腺癌淋巴转移中能起到作用[22]。
6 小 结
通过对血管生成尤其是VEGF在胰腺癌中表达及作用的研究，我们认为VEGF这一主要的促血管生成因子对于胰腺癌的生长和转移有重要作用，VEGF及血管生成水平可作为判断胰腺癌发展及预后的良好指标。同时这些研究启示：包括抗VEGF在内的抗血管生成疗法，特别是与其它非手术方法的联用，可能为临床上治疗这一棘手的疾病提供了一条新的途径。
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