【关键词】 骨桥蛋白 ;肝炎 ;发病机制 ;细胞免疫 ;综述
骨桥蛋白是Senger 于1979年首次发现的一种磷酸化糖蛋白，由多种组织细胞合成与分泌，广泛的分布于多种组织和细胞，参与多种生理和病理过程。肝炎是全球范围内的严重公共卫生问题，近年的研究发现骨桥蛋白与肝炎的发病关系密切，可通过多种细胞免疫途径介导肝炎的发生，本文对骨桥蛋白与肝炎关系的相关研究作一综述。
1 骨桥蛋白与肝炎的关系
骨桥蛋白与肝炎的关系的研究主要来自中毒性肝炎、丙型肝炎、自身免役性肝炎、酒精性肝炎，乙型肝炎的研究较少。骨桥蛋白在肝炎发病过程中的作用，大部分研究提示是促进肝炎的发生和加重。早期就是在四氯化碳引起的急性肝炎模型中发现骨桥蛋白表达增高。Apte 等[1]研究发现酒精性肝炎的小鼠血浆及肝组织骨桥蛋白水平增高。Sahai A等[2]对非酒精性脂肪性肝炎小鼠模型(通过喂养缺乏甲硫氨酸和胆碱的饮食)的骨桥蛋白测定，发现该小鼠骨桥蛋白蛋白水平和mRNA水平均增高。Mochida[3]等对176例慢性丙型肝炎患者的临床研究发现：骨桥蛋白增强子序列-433位基因多态性与患者血清中ALT水平有关，可能是反映慢性丙型肝炎炎症活动的一个有用指标。Matsui A[4]对暴发型肝炎患者的骨桥蛋白水平明显高于急、慢性肝炎及健康人，II期肝性脑病及病程10天内出现典型肝坏死者，骨桥蛋白水平升高更明显。Arai M等[5]对暴发性肝衰竭和自限性肝炎患者血浆骨桥蛋白水平测定，发现前者明显高于后者。这些均提示在炎症性肝病中骨桥蛋白表达增高，且与炎症的严重程度有关。
但也有相反的结果，Koh HS[6]等在对血清淀粉样P组分控制表达骨桥蛋白的转基因小鼠研究发现，这些小鼠在12周时单核细胞浸润，随着年龄增长更广泛，这些浸润是原发的细胞毒细胞，表达CD8和HLA-DR为特征。四氯化碳处理该小鼠，坏死程度和细胞浸润均较野生鼠小，因此推测过度表达骨桥蛋白可能是一保护角色。
2 骨桥蛋白致肝炎的发病机制
细胞介导的免疫损伤是炎症性肝病的主要机制。微生物进入血循环后大部被巨噬细胞清除，少部分激活巨噬细胞产生炎症反应致炎症细胞如中性粒细胞、单核细胞、T细胞、B细胞、NK细胞浸润到肝，最终致肝损害。骨桥蛋白通过细胞免疫介导肝炎的机制主要有以下几个方面。
2. 1 Th1和Th3免疫平衡失调 Mimura S等[7]对唯一过度表达骨桥蛋白的转基因小鼠的研究中，给予Con-A处理转基因小鼠和野生小鼠，转基因小鼠骨桥蛋白的增高幅度较野生鼠明显升高，得出结论为骨桥蛋白启动Th1反应，Th1/Th3平衡紊乱，Th1占优势，从而导致大片肝坏死。骨桥蛋白如何启动Th1反应在之前的研究已经有报道，骨桥蛋白通过氨基端与整合素受体结合使IL-12升高，通过磷酸化与CD44结合使IL-10下降，从而启动Th1反应[8]。
2. 2 骨桥蛋白促进NKT细胞活化，活化的NKT细胞触发中性粒细胞聚集[9] 用Con-A处理野生小鼠和骨桥蛋白缺乏小鼠，骨桥蛋白表达缺乏的小鼠的肝损害明显低于野生小鼠，血浆转氨酶水平和高生存率可反映该区别。具体机制是Con-A注射于小鼠后，肝内固有的NKT细胞分泌骨桥蛋白，骨桥蛋白促进NKT细胞活化和触发中性粒细胞浸润与活化，致肝炎加重。更为详细的过程是，NKT细胞表达α9和α4抗原与凝血酶剪切的骨桥蛋白结合后，进一步激活NKT细胞，NKT细胞产生巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2，一种中性粒细胞趋化因子)，从而使中性粒细胞聚集于肝脏致肝损害。但具体MIP-2致中性粒细胞聚集的过程仍不清楚。
2. 3 骨桥蛋白调节iNKT细胞的功能[10] 该研究对骨桥蛋白缺乏小鼠与野生小鼠iNKT细胞功能变化来间接说明骨桥蛋白对iNKT细胞成熟和功能的调节作用。研究中骨桥蛋白缺乏小鼠与野生小鼠相比，胸腺iNKT细胞数相同，但外周血iNKT细胞数明显减少。而且iNKT细胞的功能也不足，表现在以下三点：第一，下调iNKT细胞受体不足;第二，IL-4表达下调，INF-γ表达没有改变;第三，FasL表达减少，导致对肝细胞的依赖Fas/FasL的细胞毒反应下降。
2. 4 骨桥蛋白基因多态性与肝炎病毒的清除有关 Shin HD等 [11]对1069名乙肝患者骨桥蛋白五种基因型与患者病程的关系进行前瞻性研究，发现最普遍的以单元型SPP1-ht2 [T-T-C-T-A]为支架的基因型在乙肝病毒携带者比自愈患者表达要高，而且以后肝癌发生年龄早。该研究提示骨桥蛋白基因多态性与乙肝病毒的清除有关，但具体的机制仍需进一步的研究。
2. 5 骨桥蛋白调节巨噬细胞的活化迁移导致肝损伤 骨桥蛋白最早在活化的T细胞被称为早期T淋巴细胞活化蛋白-1(ETA-1)，提纯的该蛋白与巨噬细胞结合表现出饱和现象，皮下注射该蛋白的老鼠出现富含巨噬细胞的炎症浸润。另一实验中，用化学趋化肽亮氨酰苯丙氨酸注射于小鼠同样可产生富含巨噬细胞的炎症反应，灌注骨桥蛋白的中和抗体，则该巨噬细胞浸润减少60%.另外内源性骨桥蛋白还与巨噬细胞的分化有关。[12]RAW264. 7巨噬细胞应用骨桥蛋白siRNA使骨桥蛋白表达减少，则该巨噬细胞的迁移功能受损和凋亡率增加，同时细胞的显型发生变化，外源性的骨桥蛋白不能逆转该改变，表明内源性骨桥蛋白的减少影响了巨噬细胞的分化成熟。
2. 6 骨桥蛋白与中性粒细胞 Apte[4]等研究发现酒精性肝炎的小鼠血浆和肝组织骨桥蛋白水平增高，且高中性粒细胞浸润、坏死和肝损伤与血浆和肝内骨桥蛋白的水平相关。进一步研究[13]骨桥蛋白与中性粒细胞浸润的因果关系，在另一腹膜内注射骨桥蛋白制造腹膜炎的小鼠模型，腹膜液内的中性粒细胞明显增加，但当应用骨桥蛋白的中和抗体来控制骨桥蛋白的功能时，中性粒细胞浸润减少几乎50%。更为详细的机制[14]可能为骨桥蛋白氨基末端整联蛋白序列通过抗原抗体反应吸引中性粒细胞聚集。
3 临床价值
骨桥蛋白在肝炎活动时升高，有加重肝炎病理损害的作用，是否能通过调节骨桥蛋白的水平来减轻肝炎病理损害，从而治疗肝炎，其研究主要有以下几个方面。
3. 1 骨桥蛋白特异性小干扰性RNA(siRNA)的潜在治疗价值 骨桥蛋白siRNA是体外化学合成骨桥蛋白序列特异性双链RNA，能有效使内源性和外源性骨桥蛋白基因沉默，从而使骨桥蛋白表达下降。Saito Y等[15]对Con-A导致暴发性肝炎的小鼠模型研究发现，骨桥蛋白siRNA注射后肝中骨桥蛋白水平明显下降，反映肝组织损害的血清ALT水平明显下降，肝组织病理几乎正常，从而表明肝组织损害明显改善。
3. 2 多配体蛋白聚糖-4的应用有望抵御骨桥蛋白介导的急性肝损伤[16] 骨桥蛋白通过凝血酶切割活化，结合整合素受体发挥促炎作用。骨桥蛋白分子内有两种肝素结合区域，能结合肝素和肝素样葡糖氨基聚糖类如多配体蛋白聚糖-4。多配体蛋白聚糖-4与骨桥蛋白的结合区域同骨桥蛋白的凝血酶的切割位点重叠。多配体蛋白聚糖-4与骨桥蛋白结合后屏蔽了该切割点，使骨桥蛋白不能活化，不能发挥作用，从而改善肝损伤。
4 研究的局限和发展前景
4. 1 局限 虽然骨桥蛋白致肝炎的发病机制已有一些研究，但仍然不清楚的地方需要进一步的研究。第一，虽然知道骨桥蛋白通过受体结合调节肝炎症细胞如中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞迁移和浸润，但并不清楚骨桥蛋白是直接调节整合素-受体信号系统作用于炎症，还是间接的通过巨噬细胞功能变化如巨噬细胞源细胞因子起作用。第二，骨桥蛋白诱导肝炎的分子机制是什么也不清楚。第三，骨桥蛋白细胞外调节炎症发生的功能已有较多的研究，但细胞内的功能还未行透彻研究。第四，骨桥蛋白经过多个不同的修饰(凝血酶、金属蛋白酶、磷酸化、聚合作用)后有不同的形式，现在仍缺乏可靠的始终如一的检测各种形式的骨桥蛋白的抗体。
4. 2 发展前景 骨桥蛋白与肝炎的关系已有部分研究，待两者的关系完全清楚的得到阐明，有望通过干预骨桥蛋白从而达到治愈各种炎症性肝病的目的。另外骨桥蛋白与肝癌的关系在本综述中没有涉及到，但也有较多的研究提示骨桥蛋白升高与肝癌的发生和转移有密切联系，有望成为肝癌的早期诊断的特异性和敏感性均较高的一个有用指标，从而使肝癌的早期诊断和早期治疗成为可能。
参考文献
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