【摘要】 ：目的 建立四方胃胶囊中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法 采用HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(25∶75)为流动相，检测波长230 nm。理论塔板数按盐酸小檗碱计算应不低于3 000。结果 该含量测定方法线性良好，线性范围0.201 6～1.008 μg(r＝0.999 8)；加样回收率为98.7%， RSD＝1.24%(n＝5)。结论 该方法简单、准确，分离度及重复性好，可用于四方胃胶囊的质量控制。
【关键词】 高效液相色谱法 四方胃胶囊 盐酸小檗碱 含量测定
Abstract：Objective To establish the content determination method of berberine hydrochloride in Sifangwei capsules. Methods HPLC method was used with octadecylsilane chemically bonded silica as the filler， acetonitrile-0.05 mol/L Kh3PO4 solution (25∶75) as the mobile phase， detective wavelength was 230 nm. The number of theoretical plates should not be less than 3 000. Results The content determination method has a good linear relation at the range of 0.201 6～1.008 μg (r＝0.999 8). The recovery rate was 98.7%， RSD＝1.24% (n＝5). Conclusion The method is simple， accurate， with good separation and reproducibility， and can be used for the quality control of Sifangwei capsules.
Key words：HPLC；Sifangwei capsules；berberine hydrochloride；content determination
四方胃胶囊收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂》第14册，功效疏肝和胃、制酸止痛，用于肝胃不和所致胃痛、胃酸过多、消化不良、胃及十二指肠溃疡者。原标准中无含量测定项，本试验采用HPLC法测定方中主要药味黄连中盐酸小檗碱的含量[1]，为控制产品质量提供依据。
1 仪器与试药
日本岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪，岛津SPD-10ATvp检测器，浙江大学智达N2000双道色谱工作站。盐酸小檗碱(中国药品生物制品检定所，批号110713- 2002087)；四方胃胶囊(市售，河南百年康鑫药业有限公司，批号040201、040601、040901、041201)。乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件及系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(25∶75)为流动相，检测波长230 nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不低于3 000，进样量10 μL。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取盐酸小檗碱对照品5.04 mg，加甲醇制成每1 mL含50.4 μg的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
取装量差异项下的本品内容物，研细，称取约1 g，精密称定，置100 mL锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，超声20 min，放至室温后，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液，即得。
2.4 线性关系考察
分别精密吸取上述对照品溶液(50.4 μg/mL)4、8、12、16、20 μL，按上述色谱条件测定，以点样量对峰面积进行回归，得回归方程Y＝43.916X－3.052 4，r＝0.999 8，在0.201 6～1.008 μg范围内线性关系良好。
2.5 精密度考察
精密吸取上述对照品溶液10 μL，重复进样5次，按上述色谱条件进行操作，测峰面积，以峰面积计算RSD＝0.78%，结果表明，本品精密度良好。
2.6 稳定性试验
取上述供试品溶液(批号040201)，分别在0、2、4、6、8 h测定，进样量10 μL，测定盐酸小檗碱峰面积，以峰面积计算， RSD＝1.43%，结果表明，供试品溶液在8 h内稳定。
2.7 重复性试验
取相同批号样品(040201)制备5份供试液，按照上述含量测定方法分别进样10 μL，测得峰面积，计算，RSD＝1.22%，结果表明，本方法重复性良好。
2.8 空白试验
按照处方比例不加黄连，制得缺黄连模拟制剂，按工艺制备方法制备空白对照溶液，按上述方法进行测定。结果供试品溶液在对照品溶液出峰位置上无峰出现，表明无干扰。色谱图见图1。
2.9 加样回收率试验
取样品(批号040201)5份，每份取0.5 g，精密称定，分别精密加入盐酸小檗碱1.2 mg，按供试品溶液的制备方法制备，依法测定，计算加样加收率。结果平均回收率98.7%，RSD＝1.53%，表明本方法回收率良好。结果见表1。表1 加样回收率试验结果（略）
2.10 样品测定
按上述测定方法，对3批样品进行测定，结果见表2。表2 样品中盐酸小檗碱含量测定结果(略)
3 讨论
3.1 提取溶剂的考察
取本品(批号040201)1 g，精密称定，置100 mL锥形瓶中，分别加入不同溶液50 mL，称定重量，超声提取20 min，提取液放冷后用提取液溶剂补足减失重量，滤过，取上清液，测定含量。结果表明，70%甲醇、甲醇、乙醇3种溶液所测含量一致，但用甲醇所提的供试品溶液杂质峰最少，故采用甲醇为提取溶剂。
3.2 提取方法的考察
取本品装量差异项下的内容物，研细，称取1 g，精密称定，置100 mL锥形瓶中，加甲醇50 mL，称定重量，超声20 min，放至室温后，加甲醇补足减失的重量，取上清液测定。结果超声处理和回流提取含量高，因超声简便，故确定提取方法为超声提取。
3.3 提取时间的考察
取本品(批号040201)1 g，精密称定，置50 mL锥形瓶中，加甲醇40 mL，分别超声不同时间，放冷后补足甲醇，滤过，取上清液测定。结果超声15 min含量不再增加，故确定超声时间为20 min。
参考文献
[1] 苗明三，李振国.现代实用中药质量控制技术[M].北京：人民卫生出版社，2003.455.