分光光度法测定咳尔康口服液中多糖的含量

　　　　 作者：巩丽虹 李孟全 李春彦 石秀梅 于万君 金秀东

【摘要】 　　［目的］建立咳尔康口服液中多糖含量的测定方法。［方法］采用改良的苯酚硫酸法，以葡萄糖为对照品，考察方法的线性、稳定性及加样回收率。通过检测葡萄糖的含量，反映样品中多糖的含量。［结果］葡萄糖浓度在18.2～91.0mg·ml-1范围呈线性关系（R2=0.9952）；平均回收率99.94%；相对标准偏差RSD=1.10％。［结论］运用改良的苯酚硫酸法测定三批咳尔康口服液中多糖的含量分别为36.32，30.90，32.75mg·mL-1，方法简便，重现性好，可以作为咳尔康口服液中多糖成分的质量控制方法。

【关键词】 咳尔康口服液；多糖；含量测定

　　Abstract： ［Objective］ To determine the content of total polysaccharide in Keerkang Oral Liquid.［Methods］ Taking glucose as contrast，the determination was performed with the improved pheno1sulfuric acid method.The content of polysaccharide was reflected with content of glucose.［Results］ The linear range for the detection of glucose was 18.2～91.0 mg·mL-1 （R2=0.9952）and the average recovery was 99.94%; the relative standard deviation was 1.10％.［Conclusion］This method was simple and accurate and it could be used for quality control of total polysaccharide in Keerkang Oral Liquid.

　　Key words：Keerkang Oral Liquid；polysaccharide；content determination

　　咳尔康口服液是在名方“六君子汤”基础上，经过临床多年反复实践研究衍化而成的一种纯中药制剂，本课题组前期研究结果表明该产品具有止咳、祛痰、平喘作用［1］。多糖是该制剂的主要有效成分，为建立其质控标准。笔者对咳尔康口服液中多糖含量的测定方法进行了探讨。

　　1 材料

　　1.1 药品与试剂

　　咳尔康口服液，课题组提供。葡萄糖标准品，中国药品生物制品检定所 批号 110833。其它试剂均为分析纯。

　　1.2 仪器

　　紫外分光光度计，美国瓦里安Cary100。离心机，上海天美科技有限公司。

　　2 方法与结果

　　2.1 5%苯酚溶液的配制

　　称取苯酚晶体5.00g，溶解，定容至100ml，摇匀即得，置于棕色瓶中备用。

　　2.2 葡萄糖标准贮备液的配制

　　精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品91.0mg置于100 ml量瓶中，加纯化水溶解并稀释至刻度，摇匀即得浓度为0.91mg/ml的标准贮备液。

　　2.3 样品液的制备

　　精密量取咳尔康口服液0.5ml，加无水乙醇至10ml，搅拌，于离心机中以3000r/min离心15min，弃去上清液，沉淀用乙醇洗涤至无色，挥干乙醇。将沉淀用纯化水溶解，定容至100ml，移取定容液20ml，定容至50ml即为样品液。

　　2.4 葡萄糖含量的测定

　　取标准贮备液或样品液0.5ml置于10ml具塞试管中，加入5％苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入浓硫酸5ml，立即混合均匀，室温放置30min；另取0.5ml纯化水同法加入试剂操作，得空白对照液，在487nm处测定吸收度A值。

　　2.5 线性关系考察

　　精密量取标准贮备液2.0，4.0，6.0，8.0ml，分别置于50ml量瓶中，摇匀。取稀释液各0.5ml按2.4项下的方法测定A值。以A为纵坐标，葡萄糖浓度C为横坐标进行回归处理，求得回归方程：Y=0.0485X+0.143 （R2=0.9952）。

　　2.6 稳定性试验

　　精密量取标准贮备液，按2.4项下的方法测定A值，每隔10min测定1次，直至1h，测得A值基本不变，RSD=0.93％，说明A值在60min内稳定。结果见表1。2.7 精密度试验 取按2.3项下处理的样品液4份，测定吸收度，求得RSD=4.65％。结果见表2。表1 稳定性试验（略）表2 精密度试验（略）
　　
　　2.8 加样回收率试验

　　精密量取已知含量的样品5份，每份定量加入葡萄糖对照品，振摇使溶解。加纯化水至刻度，摇匀。按2.4项下的方法操作，测得平均回收率为99.94％，RSD=1.10％。结果见表3。表3 加样回收率试验（略）
　　
　　2.9 样品多糖的含量测定

　　精密量取纯化水及样品液各0.5mL，照2.4项下的方法测定吸收度，样品多糖的含量根据下列公式计算（以葡萄糖量计算）。多糖含量（mg/ml）=标准曲线查得含量×200×2.5。三批样品多糖含量分别为36.32，30.90，32.75 mg/ml。

　　3 讨论

　　改良苯酚硫酸法测定样品中多糖的含量［2］，原理是多糖在浓硫酸水合产生的高温下迅速水解，产生单糖，单糖在酸性条件下与苯酚反应生成橙色衍生物，该衍生物在487nm处和一定浓度范围内，吸收度值与浓度呈线性关系。本实验测得葡萄糖浓度在一定范围内呈线性关系，稳定性试验、精密度试验、加样回收率试验结果良好，测定三批样品多糖含量分别为36.32，30.90，32.75 mg/ml，测定结果表明：其含量稳定，该方法快速简便，准确可靠，为控制咳尔康口服液的内在质量提供了科学依据。

参考文献