【关键词】 高氧液
关键词: 高氧液;脑缺血;再灌注损伤;自由基;一氧化氮
摘 要:目的 探讨高氧液对兔全脑缺血再灌注损伤的保护作用. 方法 18只家兔随机分3组（n=6）.用夹闭双侧颈总动脉加降压法建立全脑缺血模型.A组再灌注时用平衡液20mL kg-1 静脉推注（对照组）;在再灌注时用高氧液20mL kg-1 静脉推注（治疗组）;C组于实验前3d用高氧液20mL kg-1 静脉推注每日1次（预处理组）.各组在缺血前、缺血20min和再灌注45min抽取颈内静脉血测定血浆一氧化氮（NO），超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）. 结果 再灌注后B组和C组MDA含量明显低于A组（P&<0.01或P&<0.05），B组和C组血浆SOD活性高于A组（P&<0.05）.B组和C组血清NO含量明显低于A组（P&<0.01或P&<0.05）. 结论 高氧液对神经元缺血损伤具有保护作用.
Keyword:hyperoxia solution;brain ischemia;reperfusion in-jury;free radical;nitric oxide
Abstract:AIM To investigate the protective effect of hy-peroxia solution on the cerebral ischemia model.METHODS 18domestic rabbits were randomly pided into three groups.In Group A the balance salt20mL kg-1 （which was replaced by hyperoxia solution in Group A）was given intra-venously to the animals after reperfusion.And in Group C hyperoxia solution20mL kg-1 was infused intravenously ev-eryday for3d before ischemia.The amount of NO and MDA as well as the activity of SOD in plasma were observed at dif-ferent time points（before ischemia，after20min ischemia and after45min reperfusion）.RESULTS 45min after reperfusion，the amounts of NO and MDA in Group B and Group C were lower than those in Group A（P&<0.01an
d P&<0.05respectively）.But the activity of SOD in Group B were significantly higher than in Group A（P&<0.05）.CONCLUSION Hyperoxia solution can mitigate the cerebral ischemia and reperfusion injury.
0 引言
脑血管疾病是我国的常见病和多发病，已成为人类三大死亡原因之一.近年的研究对脑缺血再灌注伤的机制有了较深入的了解.急性脑缺血及再灌注损伤可触发一系列的生化反应，并导致神经元的二次损伤，其中一氧化氮（NO）和自由基被认为是最重要原因之一［1，2］ .我们用兔全脑缺血再灌注模型，以NO和自由基为观察指标，探讨我国新近发明的高氧液体对急性脑缺血及再灌注损伤预处理的效果及治疗作用，为临床应用提供理论依据.
1 材料和方法
1.1 材料 成年家兔18只（由第四军医大学实验动物中心提供），雌雄不拘，体质量1.8～2.2kg.随机分为3组（n=6）.高氧液制备是将氧气经高氧医用液体治疗仪（西安高氧医疗设备有限公司产品）光量子处理后，溶入平衡盐液15min，制成氧分压大于120.00～133.33kPa（900～1000mmHg）及臭氧浓度为10～20mg L-1 的高氧液体.NO，超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）试剂盒由南京建成生物工程研究所提供.
1.2 方法
1.2.1 动物模型与分组 动物模型采用两条血管夹闭加低压全脑缺血模型［3］ .动物由耳缘静脉注入10g L-1 戊巴比妥钠20mg kg-1 麻醉，无菌操作下经颈正中切口分离双侧颈总动脉穿线备用，游离一侧股动脉置管测动脉压.用无损伤动脉夹夹闭双侧颈总动脉20min，同时用酚妥拉明将动脉压降至5.33～6.67kPa（40～50mmHg）.A组为平衡盐液对照组:再灌注时用平衡液20mL kg-1 经静脉推注，20min内完成;B组高氧液治疗组:再灌注时用高氧液20mL kg-1 经静脉推注，20min内完成;C组高氧液预注组:于实验前3d每日用高氧液20mL kg-1 经静脉推注，最后一次静脉推注后即行手术操作.
1.2.2 检测指标 各组分别于实验前（C 0 ）、缺血20min（C20 ）和再灌注45min（R）3个时间点抽取颈内静脉血，离心血浆，-20℃冻存，用硝酸还原法测定NO，黄嘌呤氧化酶法测定SOD，硫代巴比妥酸法测定MDA.
统计学处理:计量资料以x ±s表示，结果用方差分析和t检验，P&<0.05认为有显著性差异.数据经SPSS10.0软件处理.
2 结果
2.1 血浆总SOD活性及MDA含量的变化 缺血损伤20min后血浆总SOD活性下降（P&<0.01），再灌注后A组和C组仍呈下降趋势（P&<0.05），而B组总SOD活性升高，与A组同一时间点差异显著（P&<0.05，Tab1）.MDA在缺血20min后升高（P&<0.01），再灌注45min后A组和C组继续升高，B组下降（P&<0.05），第三时间点B组和C组与A组比较有显著差异（P&<0.01或P&<0.05，Tab2）.
2.2 血浆NO含量的变化 脑缺血损伤20min后，血浆NO含量增加（P&<0.05），A组和C组再灌注45min后仍上升，但组间有差异（P&<0.05），B组含量下降（P&<0.05），且与同时点A组差异非常显著（P&<0.01，Tab3）.
表1 血浆总SOD含量的变化 略
表2 血浆MDA含量的变化 略
表3 血浆NO含量的变化 略
3 讨论
近年来在脑缺血再灌注损伤机制的研究中，自由基损伤学说一直认为是较明确的缺血再灌注损伤中造成继发损伤的重要机制［4］ .其中对NO的认识也逐渐深入.NO是一种弥漫作用的小分子物质.随着对NO-cGmp信号系统通路认识的深入，确认其为一种神经递质［5，6］ ，在急性脑创伤或脑缺血性损伤的诱发作用下，组织一氧化氮合酶（NOS）的活性升高，NO产量增加.NO能快速与超氧阴离子反应生成氧自由基过氧亚硝酸阴离子（ONOO），它在细胞内形成的过氧亚硝酸是一种不稳定产物，可分解为羟自由基和NO;NO，超氧阴离子和过氧亚硝酸均能介导各组织细胞损伤［7］ .另外，NO作用于铁蛋白，抑制含铁硫基团关键酶活性，进而影响核酸代谢，引起基因毒性;还可抑制线粒体有氧呼吸链，进而影响ATP的合成［8］ .循着这一思路，一些实验显示SOD和NOS抑制剂都可起到减轻神经损伤的效果［9］ .
经研究认为，高氧液体对兔脑急性缺血再灌注损伤有明显的保护作用，其机制与保护SOD活性及减少MDA和NO含量有关，在临床上应有一定的应用前景.
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