作者：胡 胜，熊利泽，陈绍洋，郑 玉，路志宏，刘艳红
【关键词】 地氟醚
关键词: 地氟醚;缺血预处理;脑缺血，暂时性
摘 要:目的 探讨地氟醚预处理对脑局灶性缺血损伤的影响. 方法 采用大脑中动脉阻闭（middle cerebral artery oc-clusion，MCAO）模型，将30只雄性SD大鼠随机分成3组:对照组（C组，n=10），动物不接受任何处理;地氟醚组（Des组，n=10），动物每日接受1h的地氟醚预处理（57mL L-1 地氟醚，940mL L-1 O2 ），连续5d;吸O2 组（O2 组，n=10），动物每日接受1h的吸O2 预处理（940mL L-1 O2 ，无地氟醚），连续5d.所有动物均在大脑中动脉阻闭120min后恢复再灌注，观察再灌注后24h动物神经行为学改变及脑梗死容积. 结果 再灌注后24h神经行为学评分Des组明显低于C组和O2 组（P&<0.01）;24h脑梗死容积C组为（276.10±155.63）mm3 ，O2 组为（253.84±174.39）mm3 ，Des组（59.56±30.37）mm3 ，Des组明显低于对照组（P&<0.01）. 结论 地氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血损伤具有保护作用.
Keywords:desflurane;ischemic preconditioning;cerebral is-chemia，transient
Abstract:AIM To investigate if desflurane preconditioning induces ischemic tolerance against neuronal damage produced by middle cerebral artery occlusion（MCAO）in rats.METHODS Thirty male SD rats weighing280～320g were randomly pided into three groups:control group（n=10），C group，without pretreatment;desflurane preconditioning group（Des group，n=10），which were pretreated with inhalation of57mL L-1 desflurane in940mL L-1 O2 1h per day for5d;and oxygen preconditioning group（O2 group，n=10），which inhaled940mL L-1 O2 1h per day for5d.Right MCAO（120min）was induced by a3-0nylon thread with round tip inserted cranially into right internal carotid artery.The neurologic deficit score（NDS）was evaluated24h after reperfusion and the infarct volume was determined24h after reperfusion.RESULTS The NDS of the Des group was lower than the other two groups（P&<0.01）.The infarct volumes of C，O2 and Des groups were（276.10±155.63）mm3 ，（253.84±174.39）mm3 and（59.56±30.37）mm3 respectively.The difference between Des and C groups was significant（P&<0.01）.CONCLUSION Desflurane pretreat-ment was able to induce ischemic tolerance against neuronal damage produced by transient MCAO in rats.
0 引言
自Murry等［1］ 1986年发现心肌缺血预处理现象以来，人们对缺血预处理（ischemic preconditioning，IP）进行了大量的研究.但IP是一种损伤性预适应，研究用药物诱导预适应来替代IP成为一种必然趋势.因此有人用化学预处理来模拟缺血预处理［2］ .最近国内外研究发现常用挥发性麻醉药异氟醚、七氟醚、地氟醚等预处理可在心肌缺血中模拟产生缺血预处理效应［3-7］ ，我们以前的研究发现，异氟醚预处理可诱导脑缺血耐受［8］ .地氟醚作为一种新型卤素化醚类吸入性全麻药，人们对其是否具有脑保护作用进行了大量研究，发现其与异氟醚等其他挥发性麻醉药一样，对脑缺血损伤具有保护作用［9，10］ ，但采用大脑中动脉阻闭（MCAO）模型实施预处理脑保护作用方面的研究报道甚少.我们旨在探讨地氟醚预处理模拟IP的可行性.
1 材料和方法
1.1 材料 实验动物由第四军医大学实验动物中心提供.30只雄性SD大鼠（280～320g），随机分成3组（每组n=10）:对照组（C组）、吸O
2 组（O2 组）和地氟醚预处理组（Des组）.对照组动物不接受任何处理;地氟醚组动物每日接受1h的地氟醚预处理（57mL L-1 地氟醚，940mL L-1 O2 ），连续5d;吸O2 组动物每日接受1h的吸O2 预处理（940mL L-1 O2 ，无地氟醚），连续5d.
1.2 方法
1.2.1 局灶性脑缺血模型 最后一次预处理结束24h后，动物用40mL L-1 异氟醚（氧流量4L min-1 ）面罩吸入诱导麻醉［8］ ，20mL L
-1 异氟醚（氧流量1.5～2.0L min-1 ）面罩持续吸入维持麻醉.MCAO模型采用右侧颈内动脉尼龙线线栓法，参考Tatlisumak等［11］ 根据Longa等［12］ 的改良方法，手术时间15～25min，术毕1min内动物基本清醒，恢复活动.阻闭120min后再次用异氟醚快速麻醉动物，抽出尼龙线，恢复再灌注.体温由直肠温探头连接多功能监测仪（Spacelab，USA）监测，并用烤灯维持在37.0～37.5℃.
1.2.2 动物恢复及神经行为学评估 麻醉苏醒后将动物放回鼠笼，自由饮食.脑缺血再灌注后24h，由一不了解分组情况的观察者评估记录神经行为学评分，方法参考Longa等［12］ 的报道，即6级评分法:0级，无功能障碍;1级，不能伸展左侧前肢;2级，向左侧旋转;3级，向左侧倾倒;4级，无自主活动伴意识抑制;5级，死亡.
1.2.3 脑梗死灶测量 24h神经行为学评分完成后，动物用异氟醚深麻醉后被处死，迅速取出鼠脑，置入冰盐水中10min，取冠状切面均匀切成2mm厚脑片，迅速放入TTC溶液中，置入恒温水浴槽中（HH-W21-Cr600，广东汕头医用设备厂），水温37℃，染色30min，最后用40g L-1 甲醛缓冲液固定.24h后用数码相机（Kodak，DC240，USA）拍照，输入计算机，用图像处理软件（Adobe，Photoshop5.0）计算梗死面积（粉红色区为正常脑组织，白色区为梗死区），各脑片梗死面积和乘以厚度（2mm）为总的梗死容积.统计学处理:数值用x ±s表示.梗死容积用单因素方差分析方法（ANOVA）统计.神经行为学评分用非参数检验（即Kruskal-Wallis方法），P&<0.05表示差异有统计学意义.
2 结果
2.1 神经行为学改变 术后对照组和吸O2 组动物出现明显神经功能障碍，Des组神经功能损伤明显轻于前两组.再灌注24h神经行为学评分，与对照组 （2.0±0.7）相比，O2 组为2.0±0.6，Des组为0.9±0.6（P&<0.01，Fig1）.
图1 略
2.2 脑梗死容积 再灌注24h脑梗死容积，与对照组（276.10±155.63）mm3 相比，O2 组为（253.84±174.39）mm 3 （P&>0.05），Des组为（59.56±30.37）mm3 （P&<0.01，Fig2）.
图2 略
3 讨论
药物性预处理是近年来研究热点之一.氟醚类吸入麻醉药如异氟醚、七氟醚和地氟醚等预处理可减轻心肌缺血损伤［3-7］ ，但采用MCAO模型行地氟醚预处理脑保护作用研究尚未见报道.本研究结果表明地氟醚可诱导脑缺血耐受产生而对大鼠短暂性局灶性脑缺血引起的脑缺血损伤起保护作用.Kersten等［3］ 进一步研究发现异氟醚诱导心肌预适应作用与其激活心肌细胞上KATP通道有关，KATP通道选择剂优降糖取消其对缺血再灌注心肌的保护作用.本研究中地氟醚是否同样经激活KATP通道诱导脑缺血预适应尚待进一步研究.
本研究仅观察雄性SD大鼠吸入57mL L-1 （1MAC［16］ ）地氟醚，每日1h，连续5d的预处理效果，主要参照异氟醚预处理的实施方案［8］ .但不同地氟醚吸入浓度和时间对脑的预处理效应如何以及其作用机制尚待进一步研究.
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