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【摘要】 目的 研究电刺激对坐骨神经干兴奋性的影响。方法 用不同的电刺激参数刺激坐骨神经干,测定引起的动作电位的幅度和传导速度分别衰减20%以及潜伏期延长20%时所需的时间。结果 随着刺激强度、频率和波宽的增大,动作电位的幅度和传导速度衰减20%以及潜伏期延长20%时所需的时间明显缩短。结论 高强度、长时间、快速反复的电刺激将使神经纤维兴奋性降低。
【关键词】 坐骨神经;动作电位;传导速度; 兴奋性;潜伏期
神经干动作电位(action potential,AP)的幅度、传导速度和潜伏期是反映神经干兴奋性的主要指标。电刺激是电生理实验中使用最多的刺激方式,选择合适的电刺激参数如强度、频率、波宽(持续刺激时间)对保持坐骨神经干的兴奋性尤为重要。本研究观察电刺激参数如强度、频率和波宽对坐骨神经干兴奋性主要指标动作电位的幅度、传导速度和潜伏期的影响。
1 材料和方法
1.1 仪器、试剂和实验动物 SBR-1型双线示波器(汕头超声电子仪器厂),FZG-1A型直流前置放大器(南京电生理仪器厂), JDC-Ⅱ多用隔离刺激器(开封市华中电子仪器厂),自制的屏蔽装置。试剂为按照SOP配制的任氏液。实验动物经检验为清洁健康的雄性、体重100 g左右的蟾蜍,由徐州医学院实验动物中心提供。
1.2 方法
1.2.1 蟾蜍坐骨神经标本的制备 按照周希平[1]、周华等[2] 和高兴亚[3]介绍的方法制备蟾蜍坐骨神经标本。需要注意的是神经干应尽可能分离得长(上起脊椎处的主干,下沿腓总神经与胫神经一直分离至踝关节附近),腓总神经和胫神经均应保留;在制备蟾蜍坐骨神经标本过程中应尽量少损伤神经,以确保神经标本的兴奋性。
1.2.2 实验过程 利用上述电生理仪器和自制的屏蔽装置,通过改变电刺激的强度、频率和波宽,当神经干兴奋性的主要指标AP的幅度和传导速度分别衰减20%以及AP的潜伏期延长20%时,测定其所需的时间。
1.2.3 自制的屏蔽装置和连接 见图1。
1.2.4 AP的传导速度测定[4] 测量A、 C之间的距离差S, 再求出A通道和B通道2个AP起始点图1 自制的屏蔽装置和连接示意图
的时间差t,按公式V= S/t(m/s),计算出AP的传导速度V。
1.3 统计学处理 实验数据采用±s表示,数据分析采用Prism 4.0统计软件。多组间的比较采用单因素方差分析,两组间的比较采用t检验。P<0.05为差异有显著性。
2 结 果
2.1 A、B 两个通道引导的神经干双相动作电位(AP) A通道引导的AP在前,B通道引导的AP滞后;APB的潜伏期大于APA的潜伏期;2个通道引导到的AP波形相似。
2.2 电刺激的强度对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响 在频率为100 Hz、波宽为0.5 ms、极性为正极性情况下,电刺激的强度对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响见表1。
2.3 电刺激的频率对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响 在强度为2 V、波宽为0.5 ms、极性为正极性情况下,电刺激的频率对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响见表2。
2.4 电刺激的波宽对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响 在强度为2 V、频率为 100 Hz、极性为正极性情况下,电刺激的频率对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响见表3。表1 电刺激的强度对兴奋性主要指标的影响表2 电刺激的频率对兴奋性主要指标的影响表3 电刺激的波宽对兴奋性主要指标的影响
3 讨 论
电刺激强度由1 V增加到2 V时,所产生的动作电位幅度和传导速度分别衰减20%以及潜伏期延长20%时所需的时间变化不明显;当强度由2 V增加到3 V时,该时间缩短;当强度由3 V增加到6 V时,该时间明显缩短。这是因为随着电刺激强度的增大,电刺激引起神经干(特别是粗纤维)的电化学损伤增大,兴奋性降低[5]。
电刺激频率由50 Hz增加到100 Hz时,所产生的神经干动作电位幅度和传导速度分别衰减20%以及潜伏期延长20%时所需的时间无明显变化;在电刺激频率由100 Hz增加到500 Hz时,该时间缩短; 当频率由500 Hz增加到2 000 Hz时,该时间明显缩短。理论上讲,神经纤维具有相对不疲劳性、AP的大小接近于Na+平衡电位、绝对不应期为1 ms。随着电刺激频率的增加,特别是当频率超过1 000 Hz时,虽然产生的神经干动作电位的数量不再增多,但是反映坐骨神经干兴奋性的主要指标将发生明显地改变。这可能是因为相对离体坐骨神经干而言,由于坐骨神经干所处的外环境、能量供给等因素发生了改变,快速反复地刺激引起神经干疲劳,导致神经干的兴奋性降低[6]。
随着电刺激波宽的增加,所产生的AP幅度和传导速度分别衰减20%以及潜伏期延长20%时所需的时间缩短明显。这是因为电化学损伤与持续刺激时间成正比,较长时间的持续电刺激引起神经干的电化学损伤程度快速增加,使其兴奋性降低[7]。
总之,在电刺激蟾蜍坐骨神经干时,应避免使用高强度(电压≥3 V)、长时间(波宽 ≥ 2 ms)和高频率(频率≥500 Hz)的刺激,以保护其兴奋性。
【参考文献】
[1] 周希平. 神经干动作电位引导、兴奋传导速度及不应期的测定[M]//谢可鸣,周希平,茅彩萍,等. 机能学实验.苏州:苏州大学出版社,2005:94-98
[2] 周 华,郑 煜,张承武.神经干动作电位引导、兴奋传导速度及不应期的测定[M]//杨芳炬.机能学实验.成都:四川大学出版社,2003:78-80
[3] 高兴亚. 神经干动作电位引导、兴奋传导速度及不应期的测定[M]//高兴亚,汪 晖,戚晓红,等.机能实验学.第2版.北京:科学出版社,2004:101-103
[4] 金 燕.蟾蜍坐骨神经动作电位的波形分析[J].动物医学进展,2004,25(2):72-75
[5] 沈 强,邰常峰,蒋大宗.用双向脉冲作选择性神经刺激的研究[J].中国生物医学工程学报,1999,18(1):35-43
[6] 车力龙,张成标.细胞的基本功能[M] //张建福.人体生理学.第2版.上海:第二军医大学出版社,2003:15-26
[7] Agnew WF,McCrery DB,Yuen TGH,et al. Histologic and physiologic evaluation of electrically stimulated peripheral nerve:considerations for the selection of parameters[J]. Ann Biomed Eng,1989,17:39-60
关于电刺激参数对坐骨神经干兴奋性的影响
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