关于骨疏灵胶囊中异补骨脂素的含量测定

作者：王涛，曾元儿，徐敏，谢金华，麦惠环


【关键词】 骨疏灵胶囊
　　摘要：【目的】通过测定骨疏灵胶囊中异补骨脂素的含量以控制制剂内在质量。【方法】采用高效液相色谱法，以甲醇水(V甲醇∶V水＝48∶５２）为流动相，流速11mL/min，色谱柱为Ｃ１８柱，检测波长为245nm。【结果】异补骨脂素在00342～02736μg线性关系良好(r＝09998)，平均回收率为9211%(RSD＝189%，n＝５)，方法重现性好(RSD＝205%)。【结论】以高效液相色谱法检测骨疏灵胶囊中的异补骨脂素含量，可避免制剂中其他化学成分的干扰，专属性好，且操作简便。
　　关键词：骨疏灵胶囊／分析；异补骨脂素／分离与提纯
　　骨疏灵胶囊是由淫羊藿、补骨脂、女贞子等多味中药组成的复方制剂，对更年期妇女骨质疏松症有一定疗效。补骨脂为方中君药之一，其主要成分为补骨脂素与异补骨脂素，采用高效液相色谱法可对两者的含量进行测定，因暂缺补骨脂素对照品，本实验仅对制剂中的异补骨脂素含量进行了测定。
　1 仪器及试药
　　高效液相色谱仪(LC10AT输液泵，SPD10A紫外检测器，日本岛津)；异补骨脂素对照品(中国药品生物制品检定所)；甲醇(色谱纯)；其余试剂均为分析纯。实验用制剂由香港浸会大学徐敏教授提供。
　　2 方法与结果
　　21 对照品溶液的制备　　　　
　　精密称取异补骨脂素对　　　　　　照品171mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL含异补骨脂素00684mg)。
　　22 供试品溶液的制备　　　　
　　取骨疏灵胶囊内容物50mg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声处理20min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀。用微孔滤膜滤过，取续滤液即得。
　　23 色谱条件　　　　
　　色谱柱：EMerck Lichroshpher 100RP18(250mm×4mm，5μm)；流动相：甲醇水(V甲醇∶V水＝48∶52)；流速11mL/min；柱温40℃；波长245nm［１］。
　　24 测定方法　　　　
　　分别精密吸取对照品溶液1μL、供试品溶液15μL，注入液相色谱仪，测定，即得。结果见图1。 　　25 标准曲线的绘制　　　　
　　精密吸取对照品溶液05、1、2、3、4μL，注入液相色谱仪，测定。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制曲线，得回归方程：Ｙ＝５４６９５＋６６９９９×１０６X，r＝09998，异补骨脂素在00342～02736μg之间呈良好的线性关系。
　　26 精密度试验　　　　
　　精密吸取对照品溶液1μL，按上述色谱条件重复进样测定，异补骨脂素峰面积平均积分值为493247(Ｎ＝５），ＲＳＤ为107%。
　　27 重现性试验　　　　
　　用同一批号的样品，分别测定5次，测得异补骨脂素含量平均值为0239%，ＲＳＤ为205%。
　　28 回收率试验　　　　
　　取骨疏灵胶囊内容物24mg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密吸取对照品溶液1mL，按供试品溶液制备项下的方法制备并测定，结果见表1。表1 回收率测定结果（略）
　　29 样品测定　　　　
　　根据拟定方法测定，3批骨疏灵胶囊中异补骨脂素含量测定结果见表2。表2 样品中异补骨脂素的含量（略）
　　3讨论
　　骨疏灵胶囊是由多味中药组成的复方制剂，其中所含的异补骨脂素成分属于香豆素类［２］，由于结构中含有苯并α吡喃酮母核，可产生紫外吸收，故选择高效液相色谱法对其进行分离与检测。实验色谱图显示，阴性对照溶液中的组分不干扰制剂中异补骨脂素的测定，说明方法的专属性好。
　　方法建立中反复对流动相进行了筛选，确定了以甲醇水(V甲醇∶V水＝48∶５２)为流动相，流速为11mL/min的测定条件，异补骨脂素的分离度及拖尾因子均符合药典［３］要求。本法操作简便，重现性好，但回收率稍低，估计与实验中样品的取样量偏低有关。
　　　　　　　　　　
　　参考文献：
　　［1］陈发奎．常见中草药有效成分含量测定［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，1997．３４１－３４２．
　　［2］肖崇厚．中药化学［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，1997．224－２３５．
　　［3］国家药典委员会．中华人民共和国药典［Ｍ］．北京：化学工业出版社，2000．附录38－附录４０．转贴于