作者：宋苏沛，李冬，马蓉蓉，魏峥，戴体俊
【摘要】 目的 观察瑞芬太尼与咪达唑仑合用对小鼠学习记忆的影响。方法 按分层随机区组设计将小鼠分为3组:瑞芬太尼+生理盐水(R) 组、咪达唑仑+生理盐水(M) 组、瑞芬太尼+咪达唑仑(RM) 组。用跳台实验分别观察小鼠潜伏期和错误次数，以评估药物对小鼠学习记忆功能的影响。结果 用药后第1天，与R组相比，RM组潜伏期缩短、错误次数增加（P<0.01，P<0.05），与M组相比RM组的错误次数增加（P<0.05）；用药后第2天，与R组相比，RM组的潜伏期缩短、错误次数增加（P<0.05）；用药后第3天，各组间潜伏期和错误次数的差别无统计学意义（P>0.05）。结论 瑞芬太尼与咪达唑仑合用能加强损害小鼠学习记忆的作用，但不会造成持久的学习记忆能力障碍。
【关键词】 瑞芬太尼；咪达唑仑；跳台实验；学习记忆
麻醉术中知晓(简称术中知晓)是一种不愉快的经历，可以给患者带来不同程度的精神损伤［1］。瑞芬太尼(remifentanil，R)和咪达唑仑（midazolam，M）是临床上常用的复合麻醉用药。瑞芬太尼是新型超短时效阿片类镇痛药，具有麻醉平稳、代谢不依赖肝肾功能、持续输注无积蓄等优点，因而优于传统阿片类药物［2］。咪达唑仑为苯二氮艹卓类镇静催眠药，静脉注射起效快，持续时间短，生物利用度高，无明显积蓄现象［3］。咪达唑仑可产生遗忘作用［4］，但两药合用能否加强遗忘作用国内外鲜见报道。本研究通过跳台实验观察瑞芬太尼与咪达唑仑合用对小鼠学习记忆的影响。
1 材料和方法
1.1 实验动物
昆明种小鼠30只，体重18～22 g，雌雄各半，由徐州医学院实验动物中心提供。实验前2天使小鼠熟悉实验室环境，自由摄食、饮水，每日上午9:00 - 12:00进行实验。
1.2 实验药品
咪达唑仑注射液（徐州恩华药业集团有限公司， 批号20070209），盐酸瑞芬太尼（宜昌人福药业有限公司，批号071005)，均用生理盐水(NS)稀释成所需浓度。
1.3 主要仪器
YLS-3T型跳台仪（成都泰盟科技有限公司）。
1.4 动物分组及处理
按分层随机区组设计将小鼠分为3组：瑞芬太尼+NS组(R组)、咪达唑仑+NS组(M组)、瑞芬太尼+咪达唑仑组(RM组)，每组10只，使各组小鼠雌雄比例、平均体重基本相同。训练前4 min，R组和RM组皮下注射瑞芬太尼，剂量为20 μg·kg-1，M组注射NS；训练前2 min，M组和RM组腹腔注射咪达唑仑，剂量为1 mg·kg-1，R组注射NS；NS注射容积为0.1 ml·10 g-1。
1.5 跳台实验
首先将小鼠放入跳台仪内适应3 min，然后底部铜栅通以0.05 mA电流，小鼠受到电击即会跳上平台躲避电击，如此训练3 min。用药后第1、2、3天将小鼠再次放在平台上，记录第1次跳下平台的时间(潜伏期)和3 min内跳下平台的次数(错误次数)，3 min内未跳下平台的小鼠，错误次数记为0次，潜伏期记为180 s。
1.6 统计学处理
用SPSS 13.0统计软件进行统计学处理，计量资料采用±s表示，多组各组间比较采用单因素方差分析LSD检验，P<0.05认为差异有统计学意义。
2 结果
在本实验中，用药后第1天，与R组相比，RM组潜伏期缩短、错误次数增加（P<0.01，P<0.05），与M组相比RM组的错误次数增加（P<0.05）；用药后第2天，与R组相比，RM组的潜伏期缩短、错误次数增加（P<0.05）；用药后第3天，各组间潜伏期和错误次数差别无统计学意义（P>0.05）。见表1。表1 瑞芬太尼与咪达唑仑合用对小鼠学习记忆的影响（略）
3 讨论
增强遗忘作用、防止术中知晓是麻醉手术的重要组成部分。在对脑内记忆过程的研究中，跳台实验是常用的研究动物学习记忆的实验方法［5］。
在本实验中，用药后第1天和第2天，瑞芬太尼与咪达唑仑合用组小鼠的记忆能力比单用组减退；用药后第3天，各组小鼠的学习记忆能力的差异无统计学意义。实验结果显示，随着给药后时间的推移，各组小鼠的潜伏期有增加的趋势，错误次数有减少的趋势。表明瑞芬太尼与咪达唑仑合用不会对小鼠的学习记忆造成持久的影响。提示两药合用在临床麻醉中防止术中知晓方面是合理的。
咪达唑仑具有激活GABAA受体的功能，能抑制大鼠离体海马脑片的长时程增强［6］，对学习记忆起负性调节作用。瑞芬太尼为μ受体激动剂，而在海马，μ受体参与了对乙酰胆碱的抑制［7］，且海马中乙酰胆碱转移酶活性与乙酰胆碱含量呈正相关［8］。另有研究发现［9-10］，GABA和阿片肽系统在脑杏仁复合体整合，影响其β肾上腺素受体活性，再由杏仁复合体发出纤维投射到其他脑区，接着影响胆碱能系统而影响记忆储存。因此，瑞芬太尼和咪达唑仑可能分别通过阿片受体和GABA间接作用于乙酰胆碱受体，抑制其释放，从而影响小鼠的学习记忆。
参考文献
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［10］McGaugh JL， Cahill L. Interaction of neuromodulatory systems in modulating memory storage ［J］. Behav Brain Res，1997，83 (1-2):31-38.