【摘要】 ：目的 建立肤疾洗剂中苦参碱的含量测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法，Inertsil Nh3色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，以乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(83∶8.5∶8.5)为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长为220 nm。结果 苦参碱在0.039～1.560 μg范围内线性关系良好(r＝0.999 7)，平均回收率为97.8%，RSD＝1.1%。结论 本法简便、快速、准确，可用于该制剂的质量控制。
【关键词】 肤疾洗剂 苦参碱 反相高效液相色谱法
Abstract：Objective To establish a method for determination of matrine in Fuji Lotion. Methods An Inertsil Nh3 column (250 mm×4.6 mm， 5 μm) was used with acetonitrile-ethanol absolute-3% phosphoric acid (83∶8.5∶8.5) as mobile phase， the flow rate was 1.0 mL/min， and the UV detection wavelength was set at 220 nm. Results The calibration curve of matrine was linear in range of 0.039～1.560 μg， r＝0.999 7. The average recovery was 97.8% with RSD of 1.1% (n＝6). Conclusion The method is simple， quick and accurate. It can be used for the quality control of Fuji Lotion.
Key words：Fuji Lotion；matrine；RP-HPLC
肤疾洗剂收载于中华人民共和国卫生部部颁标准《中药成方制剂》第十五册[1]，由苦参、百部、花椒等6味药组成，具解毒杀虫、止痒收敛、活血祛瘀之功。在该标准中仅有简单的鉴别及检查项，且其含量测定方法未见报道。为了有效控制药品质量，本试验建立了肤疾洗剂君药苦参中苦参碱的含量测定方法，采用反相高效液相色谱法对制剂中苦参碱的含量进行测定，方法简便、快速、准确，可为肤疾洗剂质量控制提供依据。
1 仪器与试药
DIONEX(美国)高效液相色谱仪，UVD 170U，P680 HPLC PUMP， ASI-100自动进样器，戴安变色龙色谱工作站(美国)。
乙腈为色谱纯；水为重蒸馏水；其余试剂均为分析纯。苦参碱对照品购自中国药品生物制品检定所，批号110805- 200306。肤疾洗剂样品(批号分别为060402、060403、060404)及阴性样品由西安芳草园医药科技有限公司提供。
2 色谱条件
色谱柱：Inertsil Nh3柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(83∶8.5∶8.5)；柱温：室温；检测波长：220 nm；流速：1.0 mL/min；进样量10 μL。
3 溶液制备
3.1 对照品溶液的制备
精密称取苦参碱对照品19.5 mg，置25 mL量瓶中，加乙腈-无水乙醇(80∶20)溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液(0.78 mg/mL)。精密吸取该溶液0.25、1.5、2.5、5、7.5、10 mL，分别置50 mL量瓶中，加乙腈-无水乙醇(80∶20)稀释至刻度，摇匀，分别制成浓度为0.003 9、0.023 4、0.039 0、0.078 0、0.117 0、0.156 0 mg/mL的对照品系列溶液。
3.2 供试品溶液的制备
精密量取本品5 mL，置分液漏斗中，加浓氨试液1 mL，用三氯甲烷提取3次，每次20 mL，提取液蒸干，残渣加乙腈-无水乙醇(80∶20)溶解并定容于25 mL量瓶中，微孔滤膜滤过，即得。
3.3 阴性样品溶液的制备
取缺苦参的阴性样品，按“3.2”项下方法操作即得。
4 系统适用性试验
分别吸取浓度为0.078 0 mg/mL的对照品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定(色谱图见图1)。按苦参碱峰计算，理论塔板数为3 000以上。在上述色谱条件下，其它成分对苦参碱的测定无干扰，苦参碱峰与相邻峰的分离度良好(R&>1.5)。
5 方法学考察
5.1 线性关系考察
精密吸取上述对照品系列溶液各10 μL，注入液相色谱仪，以苦参碱色谱峰面积对进样量(μg)进行线性回归，得回归方程为：Y＝85 331.461 7X－1 971.370 8，r＝0.999 7。结果表明，苦参碱浓度在0.003 9～0.156 0 mg/mL(即进样量在0.039～1.560 μg)范围内线性关系良好。
5.2 精密度试验
取批号为060403的供试品溶液，按上述色谱条件连续进样6次，每次10 μL，测定峰面积，RSD＝0.77%，表明精密度良好。
5.3 稳定性试验
取同一供试品溶液(批号060403)，按上述色谱条件分别在0、4、8、12、16 h进样，各10 μL，测定峰面积，RSD＝1.40%，表明供试品溶液在16 h内稳定。
5.4 重现性试验
取同一批号的样品(批号060403)，按“3.2”项下方法制备6份样品溶液，按上述色谱条件测定，测得苦参碱平均含量为0.417 mg/mL，RSD＝1.43%。
5.5 回收率试验
精密称取苦参碱对照品适量，加入乙腈-无水乙醇(80∶20)，制成每1 mL含0.499 mg的溶液，作为对照品溶液。取样品(批号060403，0.417 mg/mL)6份，各2.5 mL，分别精密加入0.499 mg/mL苦参碱对照品溶液各2 mL，按“3.2”项下方法制备，按上述色谱条件测定，计算回收率，结果见表1。表1 加样回收率试验结果（略）
6 样品测定
取3批肤疾洗剂，按“3.2”项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液和0.078 0 mg/mL对照品溶液各10 μL，注入液相色谱仪测定，计算苦参碱平均含量，结果见表2。表2 肤疾洗剂中苦参碱的含量测定结果(略)
7 讨论
7.1 测定成分的选择
2005年版《中华人民共和国药典》(一部)[2]苦参项下，测定苦参碱与氧化苦参碱的总量以控制苦参药材质量。本制剂在制备过程中，氧化苦参碱转化为苦参碱，成品中几乎没有氧化苦参碱，故本制剂仅以君药苦参中有效成分苦参碱作为含量测定的指标成分；且本制剂在制备时，苦参药材中氧化苦参碱转化为苦参碱，因此计算制剂中苦参碱转移率时，应以苦参碱与氧化苦参碱的总量来计。
7.2 供试品溶液的制备
参考2005年版《中华人民共和国药典》(一部)[2]，依次考察了浓氨试液用量(0.5、1、1.5 mL)、三氯甲烷提取次数(2、3、4次)对肤疾洗剂中苦参碱提取效率的影响，最后确定“3.2”项下方法为最佳供试品溶液的制备方法。
【参考文献
】
[1] 中华人民共和国卫生部.中药成方制剂(第十五册)[S].1997.111.
[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社，2005.162.