作者：闵存云，刘和强，詹 锋，丘伟钟
【摘要】 目的 观察丹皮酚对糖尿病大鼠前列环素(PGI2)、血栓素A2(TXA2)、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)的影响。方法 采用腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)的方法制备糖尿病动物模型，然后分别以高、中、低等不同剂量的丹皮酚对模型大鼠进行灌胃，采用放射免疫法检测各组大鼠用药前后PGI2、TXA2、ET、NO的变化。结果 各用药组用药前后的血糖值无明显变化，与对照组相比，没有显著性差异，6-Keto-PGF1α(pg/mL)分别由89.75±2.75、89.97±7.28、89.97±11.36升至120.03±13.85、108.34±11.25、105.32±8.85，与对照组相比，有显著性差异。各用药组大鼠的TXB2(pg/mL)分别由157.64±10.36、156.64±11.35、153.33±19.40降至124.46±18.67、136.40±18.15、138.40±22.20，高剂量组下降最明显，各用药组大鼠的ET(pg/mL)分别由181.68±5.10、181.27±4.76、181.04±4.19降至140.55±3.01、150.51±2.22、161.02±3.76，其中高剂量组最明显，与对照组相比，有显著性差异；各用药组大鼠的NO值稍有升高，但与对照组相比，没有显著性差异。结论 丹皮酚对糖尿病大鼠的ET、6-Keto-PGF1α、TXB2均有一定影响。
【关键词】 丹皮酚；糖尿病；血管内皮细胞；大鼠
Abstract：Objetive To study the effect of Paeonol on PGI， TXA2， ET and NO in diabetic rats. Methods Streptozocin was used in dosage of 60 mg/kg on rats to make diabetic animal model. Defferent dosages of Paeonol were used on diabetic animal models. 6-Keto-PGF1α， TXB2， ET and NO were tested after 30 days. Results Compared to the control group， 6-Keto-PGF1α (pg/mL) of Paeonol groups increased from 89.75±2.75， 89.97±7.28， 89.97±11.36 to 120.03±13.85， 108.34±11.25， 105.32±8.85 respectively；TXB2 (pg/mL) decreased from 157.64±10.36， 156.64±11.35， 153.33±19.40 to 124.46±18.67， 136.40±18.15， 138.40±22.20 respectively；ET (pg/mL) decreased from 181.68±5.10， 181.27±4.76， 181.04±4.19 to 140.55±3.01， 150.51±2.22， 161.02±3.76. The change of 6-Keto-PGF1α， TXB2 and ET was related to the dosage of Paeonol. NO has no significant change.
Conclusions Paeonol can decrease the ET and TXB2 in diabetic rats， and increase 6-Keto-PGF1α in diabetic rats.
Key words：Paeonol；diabetes mellitus；vessel endothelial cells；rat
随着社会经济的快速发展，糖尿病(DM)已成为危害公众健康的主要疾病之一。笔者观察了丹皮酚对糖尿病大鼠前列环素(PGI2)、血栓素A2(TXA2)、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)的影响，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 动物和试剂
SD雄性大鼠，清洁级，体重180 g左右，中山大学实验动物中心提供，许可证：SCXK(粤)2004-1011，合格证号：粤监证字2004A089。链脲佐菌素(STZ)为Sigma公司产品，ET、NO、PGI2、TXA2试剂盒为中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所产品。
1.2 动物模型的建立
取雄性SD大鼠40只，体重在180 g左右，按60 mg/kg的剂量腹腔注射STZ，注射后72 h，测血糖在11.1 mmol/L以上者为造模成功。
1.3 分组及给药
取丹皮酚药材颗粒剂(三九药业提供)，制成浓度为10 g(原药材)/mL的制剂备用。造模成功后的大鼠随机分为空白对照组(A组)及丹皮酚高(B组)、中(C组)、低(D组)剂量组，每组10只。用药组分别按4.32、2.16、1.08 g/kg体重的剂量给予丹皮酚制剂，空白对照组给予相同体积的生理盐水，连续灌胃5周，以上各组均给予高糖高脂饮料，分别于用药前、后进行各项指标的检测。
1.4 检测指标与方法
1.4.1 空腹血糖的检测
各组大鼠均于用药前、后分别常规检测空腹血糖。
1.4.2 血浆ET、NO检测
采用放射免疫分析法。取血标本2 mL置于内含10% EDTA二钠30 μL和400 IU抑肽酶的抗凝管中混均，随即于4 ℃、3 000 r/min离心15 min，吸取血浆，-20 ℃保存备测。操作严格按试剂盒说明书进行。
1.4.3 PGI2、TXA2的检测
采用放射免疫法。因PGI2、TXA2代谢速度过快，一般方法检测不到，以检测它们的代谢产物6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)代替。快速取血标本3 mL，置于内含消炎痛-EDTA二钠抗凝液约0.2 mL的抗凝管中混均，于4 ℃、3 500 r/min离心15 min，吸取血浆，-20 ℃保存备测。操作严格按试剂盒说明书进行。
1.5 统计学方法
检测结果用SPSS软件进行统计学分析。数据用x±s表示，组间计量资料的比较用t检验，计数资料的比较用χ2检验。
2 结果
(见表1～表3)表1 各组大鼠用药前后血糖的变化(略)表2 各组大鼠用药前后ET、NO的变化(略)注：与用药前比较，*P&<0.01(下同)。表3 各组大鼠用药前后6-Keto-PGF1α、TXB2变化(略)
3 讨论
ET是最强的局部缩血管多肽，其过量释放可通过影响血流动力学的改变而参与微血管病变的发生。DM患者ET合成较正常人明显增加。ET和NO在调节血管收缩、舒张功能方面具有相互拮抗的作用。DM患者和DM动物模型中均存在NO合成减少和ET增多[1]。正常情况下，内皮细胞能合成和释放血管松弛物质，主要有PGI2和NO。PGI2的主要作用是抑制血小板聚集，并能拮抗TXA2使血管扩张；相反TXA2则有促进血小板聚集的作用。大量的临床和动物实验表明，DM患者血管内皮细胞合成和释放的PGI2减少，而TXA2增加，从而使血栓易于形成、血管的结构改变，造成微血管及大血管的损伤，加快DM并发症的发生[2]。
丹皮酚为毛莨科芍药属植物牡丹的根皮，性微寒，味苦、辛，归心、肝经，具有清热凉血、活血化瘀之功效。药理研究表明，丹皮酚能抑制炎症组织的渗出，降低毛细血管的通透性，抑制炎症细胞的游走，对多种急性炎症反应有抑制作用，其抗炎作用不依赖于垂体-肾上腺系统，可能是直接对抗炎症介质、抑制白细胞游走和抑制PGE的生物合成。而且不抑制特异性抗体的产生，不影响补体旁路途径的活性，在发挥抗炎作用的同时，不影响正常体液免疫功能[3]。丹皮多糖粗品灌胃给药，既能降低DM模型大鼠的血糖，还可使正常小鼠血糖显著降低[4]。此外，丹皮酚还有抗血小板聚集、减少血小板TXA2的释放，通过多种机制抑制血栓形成、抗动脉粥样硬化，增加冠状动脉血流量，降低心肌耗氧量，抗心肌缺血，利尿等作用[5]。我们的实验结果表明，丹皮酚可以降低DM大鼠血中的ET、TXB2含量，升高6-Keto-PGF1α的含量，但对血糖和NO无明显的作用。
【参考文献】
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