【摘要】目的 探讨HER2、ER、PR蛋白在北流地区乳腺癌患者中的表达情况，及HER2与ER、PR表达之间的相关性。方法 北流地区乳腺癌手术标本均经10%中性福尔马林固定，采用SP两步法进行免疫组合染色。结果 HER2蛋白与ER表达呈负相关，与PR表达也呈负相关。
【关键词】乳腺癌 ER PR HER2
乳腺癌是危害女性健康的恶性肿瘤之首，发病率呈逐渐上升的趋势。乳腺癌是全身性疾病，确切的病因仍未完全清楚。肿瘤的浸润与转移是一个多基因调控，多步骤、多阶段演进的过程，其中肿瘤细胞异常增生是肿瘤浸润于转移的基础，粘附性改变和运动能力增强以及细胞外接触抑制丧失是侵袭转移的条件。在乳腺癌相关蛋白中与其预后和治疗相关的主要为ER、PR和HER2，了解这三种蛋白的表达情况是乳腺癌治疗的关键。
1 材料和方法
1.1研究材料 收集2006年1月-2009年12月期间北流市人民医院病理诊断乳腺癌手术标本84例，发病年龄最小的37岁，最大的71岁，平均年龄51岁，中位年龄53岁。所有标本均经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋切片，所有标本均经重新制片及重新阅片以进一步明确诊断。
1.2研究方法 所有免疫组织化学染色试剂均购自福建迈新公司，即用型。采用SP两步法进行免疫组织化学染色，浓缩型DAB显色试剂盒，操作步骤按照说明书进行。
1.3检测方法 所有标本均经过10%中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，切片厚度为4μm，采用常规免疫组化染色SP法进行染色。具体方法如下：所有载玻片均经APES处理过的胶片，4μm连续切片，脱蜡至水化；3%双氧水室温孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活化，蒸馏水浸泡2分钟；微波高火修复15分钟；滴加一抗，4℃冰箱过夜，PBS冲洗5分钟×3；滴加A试剂，室温孵育30分钟，PBS冲洗3分钟×3；滴加B液，室温孵育20分钟，PBS冲洗3分钟×3；DAB溶液显色，自来水终止显色；苏木素复染细胞核、脱水、透明、封片。用已知的阳性片作为阳性对照，以0.01mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作为阴性对照。
1.4结果判断 癌细胞无着色为（-）、浅黄色或阳性细胞数≤25%为（+）、棕黄色或阳性细胞数在25%-50%为（2+）、棕褐色或阳性细胞数＞50%为（3+）；每张切片随机选择10个高倍视野，每个视野观察100个肿瘤细胞，计算平均阳性细胞比例为该肿瘤的阳性细胞百分比。其中HER2的判读参考2007年CAP/ASCO的标准，即任何比例的浸润性癌细胞有微弱的、不完整的包膜染色为（1+）；≥10%的浸润性癌细胞呈现不均一或弱但有明显环绕分布的膜着色或≤30%的浸润性癌细胞呈现强的、完整的包膜着色为（2+）；＞30%的浸润性癌细胞呈现均一的、强的包膜着色为（3+）。ER、PR的着色部位为癌细胞的细胞核。
2 结果
HER2与ER、PR在乳腺癌中的表达情况见下表
如上表所示，本文中84例乳腺癌患者中，HER2与ER、PR的表达均呈负相关，其表达均具有显著的统计学意义（P＜0.01）。
3 讨论
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，发病率呈逐年上升趋势。据世界卫生组织国际癌症中心最新统计数据显示，全世界每年约有120万乳腺癌患者。乳腺是性激素依赖器官，其生长、发育和细胞的增值均受雌激素和孕激素的影响[1]。HER2（human epithelial growth fator receptor-2，HER2）在包括乳腺癌在内的多种上皮源性肿瘤中过表达[2]，与肿瘤的发生、发展、转移及放化疗敏感性下降关系密切，是极具发展前途的基因治疗靶位[1]。
乳腺癌患者术后经典的化疗方案为CMF方案（环磷酰胺、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶）和CMF方案（环磷酰胺、阿霉素、氟尿嘧啶），分别为烷化剂的典型代表和蒽环类药物，主要通过信号调节和控制细胞周期而抑制肿瘤细胞；而HER2过表达可使细胞过度增生，细胞更快地从化疗药物的细胞毒作用中恢复，从而引起耐药。赫赛汀（Trastuzumab）是一种新型高效、低毒、选择性强的靶向治疗药物，能够克服HER2过表达乳腺癌对化疗、放疗、内分泌治疗的耐受，增加后者的疗效。赫赛汀不但不良反应轻，且适合与其他化疗药物联合应用，为HER2过表达的乳腺癌患者提供了一条新的治疗途径，带来了新的希望。
乳腺组织中存在雌、孕激素（ER、PR）的表达，为激素调节转录子，介导细胞激素反应，在乳腺癌细胞中仍保留对ER、PR的表达。ER蛋白是由2个沉降系数为4S，分子质量为65000的激素结合蛋白分子所构成的二聚体；PR是雌激素作用的最终产物，PR的合成必须有雌激素作为启动，且PR的存在表明ER确实具有活力[6]。雌激素与其受体结合，可促进新的蛋白合成，其中包括孕激素受体的合成，二者调节乳腺细胞的生长、分化。当乳腺上皮细胞发生癌变时，ER、PR会部分或全部缺失。有研究显示，乳腺癌细胞中ER、PR的mRNA水平降低。有报道指出，雌、孕激素受体的表达与HER2蛋白的表达呈负相关，在本次研究中也得到了同样的结果。有研究显示乳腺癌细胞分化程度高，恶性程度低，其ER、PR的表达率高，内分泌治疗效果和预后较好。Chu等[7]的研究显示，在乳腺癌细胞中，ER、PR的阳性率约为50-70%，在本研究中ER、PR的表达率分别为73.81%和71.43%，与文献报道基本一致。ER、PR阳性乳腺癌患者对内分泌药物三苯氧胺（tamoxifen，TAM）的敏感性较高，单独ER阳性对乳腺癌内分泌治疗反应占55%，而ER、PR同时阳性则为75%-80%；阴性者则对内分泌治疗敏感性较差。故ER、PR检测目前已经成为观察乳腺癌治疗和预后的指标之一。
恶性肿瘤的发生与多种基因的改变有关，多基因协同作用的假说在不断的受到重视，认为恶性肿瘤的发生、发展和转移的各阶段，至少有两个以上功能不同的异常激活的基因各自发挥不同的作用，并在时间和空间上互相配合，协同作用促进了癌变。ER、PR是具有特定功能的蛋白，检测它们对判断预后、指导内分泌治疗具有一定的指导意义。有研究证实，ER、PR阳性表达的乳腺癌术后5年生存率明显高于ER、PR阴性乳腺癌，且术后复发和远处转移较少[8]。HER2是与肿瘤生长、侵袭、转移有关的重要分子，以HER2分子为靶点的基因治疗，能够同时抑制多种肿瘤的恶性表型，尤其是对HER2过表达的乳腺癌，从而对肿瘤进行有效的控制。随着医学科学的发展和对HER2蛋白及分子研究的深入，HER2过表达与乳腺癌放化疗方案的选择、内分泌治疗及靶向治疗的相关性必将被彻底了解，从而为有效控制乳腺癌，尤其是HER2阳性的乳腺癌提供新的思路和方法。
参 考 文 献
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