深圳市坪山新区2010年手足口病疫情的病原学检测浅析

论文网： 【摘要】目的 了解深圳市坪山新区手足口病（hand-food-mouth disease，HFMD）疫情的病原学情况，为疫情的控制和病例的治疗提供科学依据。方法 对手足口病病例采集粪便或咽拭子标本，提取标本中的核酸，采用实时荧光定量PCR方法扩增病毒的特异性片断，检测EV71和CA16核酸。结果 在19起手足口病疫情56例病例中，共采集31例病人标本。其中18起由EV71引起，另1起由CoxA16引起，构成比分别为94.74%和5.26%；3例重症病例（其中1例死亡）EV71阳性；EV71和CoxA16采样阳性率分别为38.71%（12/31）和6.45%(2/31)，两者间差异有显著性；EV71和CoxA16核酸均阴性者占54.84%(17/31)；不同性别间EV71和CoxA16感染率无显著性差异；疫情主要集中在4、5、6月份；3-6岁幼托儿童为主。结论 EV71是2010年深圳市坪山新区手足口病疫情以及重症病例的主要病原体。
【关键词】手足口病 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A16型
【Abstract】 Objective To understand the pathogenic detectable epidemics of hand-foot-mouth disease(HFMD) and provide scientific proofs for the epidemic control and patient care. Methods RNA was extracted from each stool and throat swab samples that were collected from HFMD cases，EV71 and CoxA16 were diagnosed by real-time RT-PCR method amplifying the virus specific fragments. Results A total of 56 cases were reported ，and 31 samples were collected form the cases.Among the 19 HFMD populars，18 were infected by EV 71，1 by CoxA16，with a ratio of 94.74% and 5.26%;Three severe cases (include the death case ) were caused by EV 71.The positive rates of EV71 are 38.71% and CoxA16 are 6.45%，with significant difference，nither of them was 54.84%(17/31).There is no significant difference was found between gender.The populars mostly happened in April、 May、June，most of the cases were children aged from 3 to 6 in the kindergarten. Conclusion Most of the HFMD cases especially the severe cases are caused by Enterovirus 71 in Pingshan new District in Shenzhen in 2010.
【Key words】Hand-foot-mouth disease Enterovirus type 71 Coxsakie virus type A16
　　手足口病（hand-foot-mouth disease，HFMD）是由多种人肠道病毒[以肠道病毒71型、柯萨奇病毒A组16型（CA16）多见]引起的一种儿童常见传染病。主要症状表现为手、足、口腔等部位的斑丘疹、疱疹，部分病例有发热症状，少数患儿可出现中枢神经系统、呼吸系统、消化系统损害，引发无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹，神经源性肺水肿、心肌炎等，个别重症患儿病情进展快，可导致死亡[1]。与其他肠道病毒引起的手足口病相比，由肠道病毒EV71型感染引起的疾病发生重症比例较大，病死率较高。根据国内外资料，其重症病病死率可达10～25%[2]。为制定防治对策提供科学依据，对坪山新区2010年手足口病的疫情特征及病原学情况，进行了解分析。
　　1 材料与方法
　　1.1 采样对象 标本采集对象是2010年发生手足口病疫情时的临床诊断病例，即有急性起病，手掌、脚掌、臀部或口腔粘膜出现斑丘疹和疱疹，部分患者还有不同程度的发热。采集此类病人发病3-7天内的粪便或咽拭子标本，用于病原检测。
　　1.2 方法
　　1.2.1 样品前处理
　　1.2.1.1 取绿豆大小的粪便标本，加入等体积的PBS或生理盐水，充分混匀，6000rpm 离心1分钟，取上清备用。
　　1.2.1.2 将咽拭子放入装有500ul PBS或生理盐水的无RNA酶污染的离心管中充分振荡，将拭子中的液体尽量挤出，将装有液体的离心管6000rpm离心1分钟，取上清备用。
　　1.2.2 病毒RNA的提取 用深圳太太基因工程有限公司生产的肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒，按照说明书提取样品处理液中病毒的RNA并立即进行RT-PCR 扩增。结果判断按照试剂说明书进行。
　　2 结果
　　2.1 疫情情况 2010年深圳市坪山新区发生的19起手足口病疫情中18起由EV71引起，另1起由CoxA16引起；共报告56例病例，大部分为轻症病例；重症3例，占5.36%（3/56）；死亡1例，占1.79%（1/56）。个案调查42例，有19例有明确接触史，占45.24%。 55例就诊于二级以上医院，占98.21%，1例（死亡病例）就诊于村诊所（私人诊所），占1.79%。33.33%（14/42）的病例有发热，45.24%（19/42）病例有手、足部皮疹，23.81%（10/42）病例有口腔炎，11.90%（5/42）病例有呼吸系统症状（流涕和/或咳嗽、咽痛），9.52%（4/42）病例有消化道症状（恶心和/或呕吐、腹痛、腹泻），7.14%（3/42）病例有神经系统症状（嗜睡、头痛、惊厥等）；3例重症病例（其中1例为死亡病例）均有手或手足、手足臀部出疹，并发头痛头晕等神经系统症状，以及有发热症状3天以上。
　　2.2 病原分型分布 56例病例中31例采集了标本，其病原学分型分布见表1。
　　表1 31例病例病原学分型分布
　　
　　2.3 时间分布 全年几乎都有发病，但以3～6月份最多，发病42例，占75.00%，有明显季节性分布。
　　2.4 人群分布
　　2.4.1 性别分布 共采集疫情标本31份，EV71阳性12份，CoxA16阳性2份，EV71采样阳性率为38.71%(12/31)，CoxA16采样阳性率为6.45%(2/31)；其中男性EV71阳性率为41.18%（7/17），CoxA16阳性率为5.88%(1/17)；女性EV71 阳性率为35.71%(5/14)，CoxA16阳性率为7.14%(1/14)。EV71和CA16阳性率有显著性差异（P&<0.05），不同性别间的阳性率没有显著性差异（P&>0.05）。 转贴于 　　2.4.2 年龄分布 发病年龄为7个月至12岁，3～6岁儿童为主(40例)，占71.43%。
　　2.4.3 职业分布 以幼托儿童为主（36例），占64.29%，其次为散居儿童17例，占30.36%，学生3例，占5.36%。
　　3 讨论
　　坪山新区2010年手足口病几乎全年可发病，发病高峰是3～6月份，比陈秋霞[3]报道的5-7月份有所提前，这可能与坪山新区地处南方沿海地区，气候较温暖潮湿，有利于肠道病毒的繁殖有关；发病以3～6岁幼托儿童为主，提示我们今后的防控重点是进一步加强对托幼机构的卫生监督管理和手足口病基本知识的宣教，督促晨午检的落实，发现疑似病例及时就诊。多数病例有明确接触史，提示我们要重视对患儿与其他儿童的隔离，做好疫点的消毒，对密切接触者可服用抗病毒药物和提高免疫力药物进行预防；对不需要住院治疗的轻症患儿家属做好宣传教育工作，尽量让幼儿在家休息，做好患儿的居家隔离措施，避免其他家庭成员感染；98.21%病例就诊于二级以上医院，使得大部分患儿能够得到及时的正规治疗。
EV71型阳性率大大高于CoxA16型采样阳性率，大部分病例由EV71型引起，与杨洪[4]报导的不一致;还有54.84%采样病例两者均阴性，有可能是其他肠道病毒感染。
　　通常情况下，EV71和CoxA16引起的手足口病在临床症状等方面难以区别，但EV71易致无菌性脑膜炎、脑干脑炎等多种神经系统相关性疾病，可危及生命。目前世界上几起严重的手足口病暴发流行均由EV71引起，而CoxA16则较少导致手足口病的大规模暴发。深圳市往年疫情主要是由CoxA16引起[4]，而坪山新区2010年主要由EV71引起，3例重症病例（其中1例为死亡病例）均检测出EV71，均有手或手足、手足臀部出疹，并发头痛头晕等神经系统症状，以及有发热症状3天以上。这提醒我们要特别关注由EV71引起的有中枢神经系统合并症的重症病例，对这些病例要及时对症治疗，以防止发生死亡意外。
　　1例手足口病重症死亡病例，初诊由私人无牌诊所诊断为非手足口病，大大延误了对重症患儿的救治，与患儿最后导致死亡不无关系。提示我们卫生监督部门要加强对非法医疗机构的打击力度，并且加强对辖区居民的卫生知识宣教，提高全人群尤其是幼儿家长及幼儿园老师对手足口病的认识，掌握基本的预防控制措施，发现疑似病例及时到正规医疗部门就医，做到“早发现、早诊断、早隔离、早治疗、早处理疫点”是控制本病流行的有效措施。
参 考 文 献
[1] 中华人民共和国卫生部.手足口病预防控制指南[s]. (2009版).
[2] 吴春敏等.南平市2008年手足口病检测结果分析[J].中国卫生检验杂志，2009，19（10）：2380～2381.
[3] 陈秋霞.2008年厦门市同安区手足口病疫情监测分析[J].预防医学论坛，2010，16(1):92～93.
[4] 深圳市2004年肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的监测[J].疾病控制杂志，2006，10(4):389～391.