小柴胡汤对高脂血症性模型大鼠的作用观察

【摘要】 探察小柴胡汤的降脂及抗脂肪肝形成的作用。［方法］SD大鼠连续给予脂肪乳剂灌胃造模后分成模型组、小柴胡汤小、大剂量组、辛伐他汀组，各组继续给予脂肪乳剂灌胃，其中小柴胡汤小、大剂量组予小柴胡汤中药灌胃，辛伐他丁组给予辛伐他丁溶液灌胃，观测各组大鼠血脂、肝重及肝HE的变化。［结果］模型组大鼠给予脂肪乳剂灌胃1w后，血脂较正常组显著升高（P<0.01 或P<0.05），3w后血脂持续升高、肝脏指数增加及出现脂肪变。与模型组比较，各给药组大鼠血脂、肝脏指数及肝脂肪变程度均呈不同程度的降低，其中小柴胡汤大剂量组和辛伐他汀组的作用较明显。［结论］小柴胡汤具有一定的降脂及抗肝脂肪变的作用。

【关键词】 高脂血症；小柴胡汤；降脂；抗肝脂肪变；动物模型

　　 bstract: ［Objective］ To explore the function of Small Bupleurum Decoction on reducing lipid and anti fat liver. ［Method］ After successively making stomach perfusion of fat emulsion to make SD rats model， then randomly pide into model group， Small Bupleurum Decoction smalldosage， bigdosage groups and Simvastatin group; successively make corresponding perfusion; observe their lipid， liver weight and HE change. ［Result］ After 1w， in model group， the lipid is much more than before， after 3w， it rises continuously， so is liver index， the fat lesion begins; compared to model group， other groups indexes are in different reduction， among which， the bigdosage group and Simvastatin groups have more obvious change. ［Conclusion］ The decoction has definite lipid reduction and anti fat liver function.

　　Key words: hyperlipemia; animal model; Small Bupleurum Decoction; lipid reduction; anti liver fatty change

　　本研究运用高脂血症性脂肪肝大鼠模型，探查小柴胡汤的降脂及抗脂肪肝形成的作用，为拓展小柴胡汤的临床运用范围和发现具有降脂保肝作用的有效方剂提供一定的药理学基础。

　　1 材料

　　（1）动物：雄性健康SD大鼠，90只，体重（200±10）g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号SCXK(京)2007～0001。（2）中药制备：小柴胡汤的组成为柴胡24g，黄芩9g，半夏9g，生姜9g，人参（红晒参）9g，甘草9g，大枣12g。上7味，以8倍量水浸泡30min，加热保持微沸30min，过滤；残渣加5倍量水，微沸30min，过滤，合并2次滤液，滤液浓缩至折合原药材浓度2g/ml。（3）辛伐他汀溶液：将辛伐他汀片研成细粉末溶于水中，浓度为0.467mg/ ml，用时充分摇匀。（4）脂肪乳剂：

参考文献

　　1.1 试剂

　　胆固醇(北京普博欣生物科技有限责任公司，分装批号：PB10167，纯度大于99.5％)，脱氧胆酸钠(北京市化学试剂公司，批号：20070122)，丙硫氧嘧啶片 (上海复星朝晖药业有限公司，批号060902)，吐温80(天津市福晨化学试剂厂，批号20070307)，12 丙二醇(北京北化精细化学品有限责任公司，AR 级，批号20040726)，辛伐他汀片（浙江京新药业股份有限公司，批号0611233），猪油（市购）。TC 试剂盒（批号：70710G011）、TG试剂盒（生产批号：70709F021）、LDLC试剂盒（批号：70615F011）、HDLC试剂盒（批号：70718F011），均为北京利德曼生化技术有限公司提供。

　　1.2 仪器

　　低温离心机：DDL5型，上海安亭科学仪器厂产。多功能调速匀浆机：D8401型，天津市华兴科学仪器厂产。

　　2 方法

　　2.1 分组与处理

　　大鼠随机分为正常对照组30只和造模组60只。造模组大鼠每天AM 8：00开始给予脂肪乳剂(10ml/kg)灌胃，每日1次，连续1w。正常对照组给予等量生理盐水灌胃，二组大鼠均喂以普通饲料。于实验第2w，造模组大鼠再次随机分为模型组、小柴胡汤高剂量组、小柴胡汤低剂量组、辛伐他汀组共4组，每组各10只，各组继续给予脂肪乳剂灌胃2w，正常组给予等量生理盐水；其中小柴胡汤高、低剂量组分别于PM 4：00按9.45g/kg 和18.9 g/kg（分别相当于成人临床等效量和其2倍量），给予小柴胡汤灌胃，辛伐他丁组按4.67mg/kg剂量给予辛伐他丁溶液灌胃，正常对照组和模型组分别给予等量生理盐水，连续给药2w。分别于实验第8d、15d和第22d，从各组中取大鼠10只，10%水合氯醛腹腔麻醉，主动脉取血5ml，离心，取血清，低温保存，待测。采血后迅速剖取肝脏，称重后于固定位置切取小块肝脏组织，放于10%的甲醛溶液中保存，HE制片。

　　2.3 观测指标

　　体重、肝脏指数、血清生化指标、肝组织学观察。

　　2.4 统计学处理

　　各组数据均以x±s表示，总体方差分析后，多组间的均值比较采用q检验，全部数据用Spss统计软件处理。

　　3 结果

　　3.1 造模一周大鼠血脂的变化

　　由表1（表1 模型大鼠造模一周时的血脂变化(x±s，mmol/L)．与正常组比，☆P<0.05，☆☆ P<0.01）可以看出，与正常组比较，模型大鼠连续给予脂肪乳剂灌胃1w后，血中TC、TG、LDLC、HDLC 均呈不同程度升高，其差异均有显著或非常性意义（P<0.05 或 P<0.05）。

　　3.2 小柴胡汤给药不同时间对高脂血症模型大鼠血脂的影响

　　结果分别见表2、3。表2 小柴胡汤给药1周对高脂血症模型大鼠血脂影响(略)．与正常组比，☆ P<0.05，与模型组比，* P<0.05;与柴低组比，△ P<0.05．表3 小柴胡汤给药2周对高脂血症模型大鼠血脂影响(略)．与正常组比，☆☆ P<0.01；与模型组比，* P<0.05，** P<0.01，；与柴低组比，△P<0.05

　　3.3 小柴胡汤给药2周对高脂血症模型大鼠体重与肝脏指数的影响

　　见表4。表4 小柴胡汤给药2周对高脂血症模型大鼠体重、肝脏指数的影响(略)．与正常组比，☆ P<0.05；与模型组比，* P<0.05．

　　3.4 小柴胡汤给药2周对高脂血症模型大鼠肝组织的影响

　　肉眼观察到，正常对照组大鼠肝脏未见肿大，背面呈暗红色，质地柔软；模型组大鼠肝脏明显增大，边缘圆钝，包膜紧张，外观呈土黄色，与周围组织有粘连，切面有油腻感；小柴胡汤小剂量组的肝脏肿大，包膜较紧张，外观略呈土黄色，但程度不及模型组；小柴胡汤高剂量与辛伐他汀组的肝脏体积大小及外观颜色均接近正常组。

　　镜下观察到，正常对照组大鼠肝脏未见异常；模型组大鼠肝细胞肿大、肿胀肝细胞成圆形，体积明显增加，胞质内充满大量脂肪空泡，以大泡性脂滴为主，核被挤到一边，细胞边界不清，呈重度脂肪变；小柴胡汤小剂量组大鼠肝细胞脂肪变减轻，间有肝细胞变性，脂滴或空泡样变；小柴胡汤高剂量和辛伐他汀组大鼠肝细胞脂肪变程度均明显减轻。

　　4 讨论

　　4.1 关于高脂血症大鼠模型

　　本实验观察到，口服脂肪乳剂1周的确可诱导出高血脂症，连续口服脂肪乳剂3周可形成高脂血症性脂肪肝模型。但此模型容易恢复，停止给予脂肪乳剂2周后模型会恢复至正常。提示该模型在持续2周或更长时间的脂肪乳剂负荷的情况下适用于药物降脂或抗肝脂肪变作用的观察。

　　4.2 小柴胡汤的降脂作用

　　给予小柴胡汤可显著对抗模型大鼠血脂的升高，且随着给药时间的延长降脂作用明显，并能降低模型大鼠肝脏指数及减轻其肝脂肪变。表明小柴胡汤不仅具有降脂作用，而且具有一定的抗肝脂肪变的作用。实验中还发现，辛伐他汀降血脂和肝脂的显效作用比较快；小柴胡汤降低血清TG的作用出现较早，该方大剂量降血脂及降肝脂的作用较小剂量明显。

　　已知血中HDLC作为有益因子，在高血脂中有对抗动脉粥样硬化的形成作用，一些高脂血症往往伴随血HDLC的降低。但本实验中发现，模型大鼠血 TC、TG、LDLC升高的同时，伴随有HDLC的升高。推测一定条件下的高脂可诱导大鼠HDL脂蛋白的生成，作为一种保护性调节可能是该模型不容易形成动脉粥样硬化的原因之一。实验中的辛伐他汀和小柴胡汤对血中升高的HDLC均呈降低作用，其治疗学意义有待进一步探讨。