关键词: 急性白血病;P-糖蛋白;药物治疗
0 引言
急性白血病（AL）化疗失败的主要原因是白血病细胞多药耐药性（MDR）的产生，MDR的产生与位于人类第7号染色体长臂的多药耐药基因（MDR1 ）有关，MDR1 编码一种ATP依赖性的P-糖蛋白（P-gp），该蛋白的过度表达可导致细胞内的药物外流，而产生MDR［1］ .AL P-gp的研究已有不少报告，但其表达与治疗结果的关系仍无一致意见［2，3］ .我们观察了41例初治、复发及缓解期的AL P-gp表达与预后，现报告如下.
1 材料和方法
1.1 病例 AL病例共41（男23，女18）例，年龄13～63岁，初诊未经治疗的AL患者17例;复发AL患者13例;完全缓解（CR）期的患者11例.初治和复发的ANLL患者选用HA或DA标准方案化疗，ALL患者选用VDP或VDLP标准方案，缓解后的ANLL选用HA，DA，HOAP，HD-Ara-c，ALL选用VD（L）P，EA，HD-MIX序贯、交替强化治疗.
1.2 诊断标准及疗效判断标准 根据张之南主编《血液病诊断及疗效标准》评定［4］ .
1.3 P-gp的检测 在L-多聚赖氨酸预先处理的载玻片上，取自化疗前骨髓穿刺液直接涂片，自然干燥后-30℃保存，分批检测，所用抗P-gp的单抗（JSB-1），SABC-AP试剂盒武汉博士德生物工程公司提供.细胞表面P-gp表达测定采用SABC-AP免疫细胞化学的方法，涂片经丙酮固定，正常血清封闭，依次加一抗4℃过夜;加二抗，SABC分别37℃孵育30min，最后用BCIP/NBT显色，封片后专人盲法读片，每份标本计数200个单个核细胞，细胞膜及胞质有紫蓝色着色者为P-gp阳性细胞，每批标本同时设立阳性及阴性对照.正常对照12例，取材于非血液病患者的正常骨髓.
统计学处理:χ2 检验.
2 结果
2.1 初治与复发AL患者P-gp表达特点 见表1.由表1可见，正常对照12例中，11例（92%）P-gp+ 细胞的百分率&<20%，因此，以P-gp+ 细胞≥20%作为阳性标准，由此可见初治组P-gp+ 的阳性率为35%（6/17），复发组P-gp+ 阳性率为62%（8/13），完全缓解组P-gp+ 率为27%（3/11）.复发组P-gp+ 率显著高于初治组和完全缓解组（P&<0.05）. 转贴于 表1 AL患者骨髓细胞P-gp表达 略
2.2 P-gp表达与治疗结果的关系 初治与复发的30例患者中，除5例放弃治疗外，余常规接受标准HA，DA或VDP，VDLP方案的诱导或再诱导治疗.在初治组:4例接受化疗的P-gp+ 组的患者2例获得CR，2例未缓解（NR）;10例接受化疗的P-gp- 组的患者8例获得CR，1例部分缓解（PR），1例NR;在复发组中:7例接受化疗的P-gp+ 组的患者2例PR，5例NR;4例接受化疗的P-gp- 组的患者中1例CR，1例，2例NR.
2.3 缓解后巡访 对初治组获得CR的10例患者和缓解组的11例患者进行巡访，初治获得CR的10例患者中，5例复发，其中4例为P-gp- 组病例，1例为P-gp+ 组病例.P-gp- 组病例复发时2例骨髓中P-gp+ 细胞的比例增加（分别增加18%和35%），2例复发时P-gp+ 细胞比例仍很低.11例缓解组的患者中3例复发，1例为P-gp+ 组患者，2例为P-gp- 组患者，其中1例复发时P-gp+ 细胞比例增加.而另外2例已无病生存7a和3a的患者P-gp仍为阳性（分别为30%和55%）.
3 讨论
我们对41例AL患者骨髓细胞P-gp的研究结果证明，初治组P-gp+ 率为35%，复发组为62%.这一结果与文献报告28%～70%的结果相似［2］ .对初治获得完全缓解的10例患者和缓解组的11例患者进行随访观察，复发的8例患者中3例P-gp+ 细胞的比例增加，提示患者有获得性MDR的产生.P-gp的高表达与治疗效果的关系各家报告不一
［1，3］ ，多数学者认为，P-gp表达增高预示缓解率低，无病生存期短，易于复发的特点.本文结果证实:无论是初治组、复发组患者，P-gp+ 组的患者获得完全缓解的比例明显低于P-gp- 组的患者.7例P-gp+ 的复发患者再次诱导治疗后无1例获得完全缓解，说明P-gp的过度表达仍然是白血病细胞产生MDR的主要原因.
参考文献
［1］Mckenna SL.Multidrug resistance in leukemia ［J］.Br J Haemotol，1997;96（4）:659-674.
［2］Herzog CE，Trepel JB，Mickley LA et al.Various methods of analysis of mdr1/P-glycoprotein in human colon cancer cell lines ［J］.J Natl Cancer Inst，1992;84（9）:711-716.
［3］Drach D，Zhao S，Drach J et al.Subpopulations of normal pe-ripheral blood and bone marrow cells express a functional mul-tidrug resistant phenotype ［J］.Blood，1992;80（11）:2729-2734.
［4］扬天楹.急性白血病.见:张之南主编.血液病诊断及疗效标准［M］.第2版.北京:科学出版社，1998:168-218.